二 Y染色体微缺失ห้องสมุดไป่ตู้关基因
• AZFa - b缺失患者 50%严重少精子50%无 50%严重少精子50%无
精子 • AZFa - c缺失患者 100%无精子 100%无精子 • AZFb - c缺失患者 4%严重少精子 , 96%无 4%严重少精子 96%无 精子
二 Y染色体微缺失相关基因
• AZFa缺失较为少见 ,占整个 AZF缺失 4 .9%。 AZFa缺失较为少见 AZF缺失 .9%。
• EGFR属于受体酪氨酸激酶 ( recep t or EGFR属于受体酪氨酸激酶
tyrosine kinases, RTKs) ,调控细胞的生长、 ,调控细胞的生长、 分化、 血管生成及凋亡抑制 ,其信号通路与 恶性肿瘤的生长、 侵袭及转移关系密切。 • 靶向药物称作酪氨酸激酶抑制剂 ( tyr osine kinases inhibit ors, TKIs) ,其中吉非替尼 ,其中吉非替尼 (Gefitibib,商品名为 (Gefitibib,商品名为 Iressa 易瑞沙)和埃罗 易瑞沙) 替尼 ( Erlotinib,商品名为 Tarceva 特罗凯) Erlotinib,商品名为 特罗凯) 治疗可以使肿瘤缩小。 • 在 Gefitibib和 Erlotinib的临床试验和治疗 Gefitibib和 Erlotinib的临床试验和治疗 中 ,仅有一部分 NSCLC人群对药物有反应 NSCLC人群对药物有反应
和睾丸组织学表型多种多样。一般说来 ,AZFc缺 ,AZFc缺 失患者尚存精子生成能力。AZFc缺失见于无精子 失患者尚存精子生成能力。AZFc缺失见于无精子 症或严重少精子症患者 ,罕见情况下 ,也可以在自 然状态下遗传给其男性后代 在无精子症患者中,AZFc缺失者通过睾丸精子穿刺 在无精子症患者中,AZFc缺失者通过睾丸精子穿刺 获得精子的机会比其他缺失类型大 ,同时可以从睾 丸穿刺获得精子进行 I CSI受孕 ,但这些患者的男 CSI受孕 性后代都将是 AZFc缺失的携带者，建议在进行试 AZFc缺失的携带者，建议在进行试 管婴儿前 ,行遗传咨询。
• 为临床治疗各种男性不育提供分子或细胞水平的
EGFR突变与非小细胞肺癌酪氨酸激 EGFR突变与非小细胞肺癌酪氨酸激 酶抑制剂靶向治疗
一 背景
• • • •
肺癌是当今世界上最常见的恶性肿瘤 ,男性肺癌占各类恶 性肿瘤发病率的首位 ,女性肺癌发病率仅次于乳腺癌占第 2位。 尽管手术和化疗技术不断提高 ,但肺癌患者的预后仍然很 差 , 5年生存率仍 < 20%。 5年生存率仍 20%。 近年来随着分子生物学技术的提高 ,产生了一些针对分子 靶点的抗肿瘤药物。这些药物针对性强 ,能特异性地杀伤 肿瘤细胞。 其中以表皮生长因子受体 ( epidermal growth factor receptor, EGFR)为靶点的分子靶向治疗 (molecular EGFR)为靶点的分子靶向治疗 targeted therapy)在非小细胞肺癌的治疗中日渐突出。 therapy)在非小细胞肺癌的治疗中日渐突出。
• 发现几乎所有对 TKIs敏感的 NSCLC患者都 TKIs敏感的 NSCLC患者都
存在EGFR基因的体细胞突变。因此 存在EGFR基因的体细胞突变。因此 ,研究 NSCLC患者不同治疗反应性的机制、 NSCLC患者不同治疗反应性的机制、 以及 从中筛选出最适治疗对象进行有针对性的 治疗具有重要临床意义。
二 Y染色体微缺失相关基因
• Y染色体是最短的近端着丝粒染色体 ,是男性特有的染色体。1976年， 1976年，
Tiepolo和Zuifaidi首先提出Y Tiepolo和Zuifaidi首先提出Y染色体上有多个基因参与生精过程。多年 研究，发现男性特有的Y 研究，发现男性特有的Y染色体上面存在一个关键的与生育相关的因 子的区域，称为AZF区。目前认为在AZF区上存在四个精子发生亚区 子的区域，称为AZF区。目前认为在AZF区上存在四个精子发生亚区 （AZFa、AZFb、AZFc、AZFd），各亚区包含的位点在男性生殖细胞 AZFa、AZFb、AZFc、AZFd），各亚区包含的位点在男性生殖细胞 发育的不同时期起着不同的作用，位点的缺失可致患者表现为少、弱 精症或无精症从而引发不育。 • 一般认为，Y染色体的近端缺失（涉及AZFa和AZFb），表现以唯 一般认为，Y染色体的近端缺失（涉及AZFa和AZFb），表现以唯 支持细胞综合症为主的严重生精障碍，Y 支持细胞综合症为主的严重生精障碍，Y染色体的远端缺失（涉及 AZFd和AZFc），可残留岛状的生精正常区域。对无精症患者中，对 AZFd和AZFc），可残留岛状的生精正常区域。对无精症患者中，对 检查睾丸过小或睾丸活检仍无精子患者，一般不再行AZF基因检测。 检查睾丸过小或睾丸活检仍无精子患者，一般不再行AZF基因检测。 总之，开展染色体和AZF检测，可全面评价男性不育遗传缺陷，从而 总之，开展染色体和AZF检测，可全面评价男性不育遗传缺陷，从而 更好的解释发病原因，提供遗传咨询和指导临床诊疗。
四 Ｙ 染色体微缺失的检测方法
• 选择位于 Y染色体短臂 ( Y p ) 的睾丸决定基因( S RY ) 和 的睾丸决定基因(
锌指蛋白基因( 锌指蛋白基因( Z F X ／ Z F Y ) 为对照。Z F X ／ Z F Y 为对照。Z 既存在于 x染色体短臂， 也存在于 Y p ， 其与 S R Y一 Y一 起构成2 起构成2个 目前推荐使用 的参照基因。每个 A Z F区域至 F区域至 少设置2 少设置2个 S T S位点 才能正确有效. S位点 才能正确有效. 其推荐的 S T S为 A Z F a ： s Y 8 4， s Y 8 6：A Z F b： S为 4， 6： b： s Y 1 2 7， s Y 1 3 4； A Z F c ： s Y 2 5 4， s Y 2 5 5 。 7， 4； 4， 多重 P C R 实验 中的引物应包括 ： s Y 1 4 ( S R Y ) ， z FY， ， s Y 8 4， s Y 8 6 ， s Y 1 2 7 ， s Y 1 3 4 ， s FY， 4， Y254，sY255。
二 Y染色体微缺失相关基因
• AZFa缺失的病人 , 主要表现为唯支持细胞 AZFa缺失的病人
综合征伴睾丸体积缩小 ,无精子生成 • AZFb缺失的病人主要表现为生精过程阻滞 AZFb缺失的病人主要表现为生精过程阻滞 在精母细胞阶段 ,无精子生成 • AZFc区缺失病人表现多样化 ,会出现无精子 AZFc区缺失病人表现多样化 症和少精子症的不同临床表现
四 Ｙ 染色体微缺失的检测方法
目前关于 Ｙ 染色体微缺失的检测方法最常用 的是多重聚合酶链反应 (ＰＣＲ) 技术 而检测的位 ＰＣＲ) 点有很多 但有研究表明 ＳＹ８４ ＳＹ１５２ Ｓ Ｙ１２７ ＳＹ１４７\ＳＹ２５４-ＤＡＺ 和 ＲＢ ＳＹ１４７\ＳＹ２５４ＭＹ１ 这 ６ 个基因标志物能覆盖大部分已发现 的微缺失 其他的位点序列灵敏度比较低, 当然不 其他的位点序列灵敏度比较低, 同种族间可能会有轻微的差异
• 1996年将 AZF区划分为 3个区:AZFa、AZFb、 AZFc。1999 年研究发现在 1996年将 AZF区划分为 个区:AZFa、AZFb、 AZFc。
AZFb 和 AZFc 间存在AZFd。研究发现 ,在 Y染色体 AZFa、 AZFb、 AZFc3个 间存在AZFd。研究发现 AZFa、 AZFb、 AZFc3个 区至少发现 15个与精子发生相关的基因，AZFd区尚未发现相关基因。 15个与精子发生相关的基因，AZFd区尚未发现相关基因。
•
五 染色体微缺失相关基因研究的 意义
1 用于原发性无精或少弱精症的遗传咨询。 通过遗传病因诊断， 找到男性不育的遗传 病因， 则可避免不必要的药物及手术治疗。 2 进行辅助生育之前对其进行遗传病因诊断， 可尽量避免将不良基因传递给下一代 3 辅助生育精子质量筛选 4 为未来的基因治疗提供理论依据。
整个 AZFa区域缺失通常表现为 SCOS,为绝 AZFa区域缺失通常表现为 SCOS,为绝 对的无精子症。若患者为 AZFa缺失 ,不建 AZFa缺失 议做睾丸穿刺寻找精子进行卵细胞胞质内 单精子注射，目前只能寻求供精人工授精 技术来获得妊娠。
二 Y染色体微缺失相关基因
• AZFb缺失也不多见 ,占整个 AZF缺失 AZFb缺失也不多见 AZF缺失
Y染色体微缺失检测
迪安医学检验中心
一、背景
•1 •2 •3 •4
全球不育夫妇占已婚夫妇10%全球不育夫妇占已婚夫妇10%-15% 其中男性原因占40%其中男性原因占40%-50% 遗传因素占男性不育的30% 遗传因素占男性不育的30% 10%~15%的特发性无精症存在 10%~15%的特发性无精症存在 Y 染色 体的微缺失
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三 AZF微缺失与其他不育因素 AZF微缺失与其他不育因素
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AZF微缺失与隐睾症 AZF微缺失与隐睾症 AZF微缺失与精索静脉曲张 AZF微缺失与精索静脉曲张 AZF微缺失与双侧输精管缺如 AZF微缺失与双侧输精管缺如 AZF微缺失与睾丸支持细胞 AZF微缺失与睾丸支持细胞 AZF微缺失与生殖激素异常 AZF微缺失与生殖激素异常 AZF微缺失与其他不育因素 AZF微缺失与其他不育因素
二 Y染色体微缺失相关基因
• AZFa缺失患者 33%为严重少精子,67%表现 AZFa缺失患者 33%为严重少精子,67%表现
为无精子 • AZFb缺失患者 9%轻度少精子, 23%严重少 AZFb缺失患者 9%轻度少精子, 23%严重少 精子 , 68%无精子 68%无精子 • AZFc缺失患者 46%严重少精子 , 54%无精 AZFc缺失患者 46%严重少精子 54%无精 子
四 Ｙ 染色体微缺失的检测方法
• 核型分析总体上来说操作繁琐、效率不高, 核型分析总体上来说操作繁琐、效率不高,
尤其是难以检测出微小的染色体异常或变 异。荧光原位杂交(Fluorescence 异。荧光原位杂交(Fluorescence isitu hybridization, FISH)虽然有更高的分辨率, FISH)虽然有更高的分辨率, 但其检测的范围为 20 kb~5 Mb,对于微小 Mb,对于微小 的染色体缺失也难以检测, 的染色体缺失也难以检测, 且繁琐的实验操 作与高昂的成本也限制了 FISH 技术在临床 中的广泛应用。