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氯仿甲醇法提取

氯仿/甲醇法提取
称取干燥、粉碎的南极磷虾置于匀浆机,按1:6(m/V)料液比分别加入氯仿/甲醇(2:1,V/V)、无水乙醇和正己烷于室温(25 ℃)搅拌浸提。

过滤后用少量提取溶剂冲洗滤渣,合并滤液。

采用无水乙醇和正己烷提取的滤液真空旋转蒸发,温度为40 ℃。

采用氯仿/甲醇法提取的滤液中要加入10%氯化钠溶液,振荡摇匀后静置过夜,溶液分层明显,收集下层氯仿层,通过无水硫酸钠脱水后移至旋蒸瓶,于40 ℃下真空旋转蒸发。

每100克新鲜或冷冻样品将组织在Waring Blendor中用混合物均化2分钟,100毫升氯仿和200毫升甲醇。

然后向混合物中加入100毫升氯仿和混合30秒后,加入100ml蒸馏水并继续混合30秒。

过滤匀浆。

通过在Coors No. 3布氏漏斗上的Whatman No.1滤纸轻微吸力。

过滤通常很快,当残留物变成时干燥,在烧杯底部施加压力,以确保最大限度地重新加入溶剂的混合物。

将滤液转移至500毫升量筒中,并且,在允许几分钟完全分离和澄清后,记录氯仿层的体积(至少150ml)和酒精通过抽吸去除图层。

少量氯仿层也是移除以确保完全移除顶层。

氯仿层含有纯化的脂质。

对于定量脂质提取,保留在组织残留物中的脂质是通过将残余物和滤纸与100ml氯仿混合来回收。

将混合物通过原始布氏漏斗和混合器过滤。

将罐和残余物用总共50ml氯仿冲洗。

这种滤液是在除去醇层之前与原始滤液混合。

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