白细胞计数ppt课件
器材
改良牛鲍血细胞计数板及 专用盖片、微量吸管、 带孔吸头、1ML刻度 移液管、小试管、洁 净软纱布、干棉球、 光学显微镜。
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毛细血管采血标准操作程序
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操作步骤: 1 采血部位成人以左手无名指内侧为宜,半岁以
下婴幼儿通常自拇指内侧或足跟两侧采血。 2 轻轻按摩采血部位。 3 用棉签蘸消毒液消毒局部皮肤、待干。
中指轻微挤压排出适量空气; 3将微量吸管插入抗凝血,拇、中指缓慢松劲(松动快血
液会吸入吸头),吸取抗凝血至所需刻度略上方(不能有 气泡),吸管呈水平略下垂,松开示指; 4用干棉球顺吸管向下拭尽管外余血(保证血量准确), 轻触吸管下口吸去多余血量,使管内抗凝血正处所需刻度; 5将微量吸管插入小试管底部,三指轻微用力慢慢排出血 液,用上清液冲洗管内余血2-3次,轻摇试管混匀; 6拔出微量吸管弃入污物桶。
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血细胞1计1 数板的方格
计数板上下各一个计数池 计数区域分为9个大方格 四角的大方格各划分为16个中方格 中央大方格划分为25个中方格 四角的大方格为白细胞计数区 中央大方格四角和正中5个中方格为红细胞计
数区
4. 结果计算
白细胞总数 =4大格白细胞数(N) /4×10 ×20 ×106 = N÷ 20 ×109/L
评价: 白细胞≤ 4.0×109/L者, 白细胞在(4.1-14.9)×109/L者 白细胞≥15.0 ×109/L者
超过上述标准者为不合格
RCS<30% RCS<20%
RCS<15%
b. 其他方法
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9.思考题
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1、某标本WBC为11.0x109/L,分类100个WBC见到10 个有核红细胞,试计算WBC的实际数目?
用△. △ ×109/L(小数点后一位)表示
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注意事项
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⊙稀释液,小试管、计数板 ⊙采血 ⊙充池 ⊙计数原则 ⊙ WBC过多 ⊙ WBC过少 ⊙ WBC校正 ⊙显微镜调试
5.注1意4 事项
(1).稀释液密封保存,防止污染,小试管、计数板、盖片 均须清洁,以免杂质、微粒等被误认为细胞。
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临床基础检验学 实验一
牛鲍计数板的使用
和白细胞计数
实验一、 白细胞计数 2
1.原理:血液经稀乙酸定量稀释并破坏成熟红细 胞,在血细胞计数池内计数规定区域内的白细胞 总数,换算成每升血液中白细胞数。
2.试剂器材 白细胞稀释液:冰乙酸 2.0ml 10g/L亚甲蓝 3滴 加蒸馏水 至100ml
(2).采血时针刺深度必须适当,不能过度挤压,防止组织 液渗入或采血时间太长引起血液凝固。
(3).稀释液和采血量要准确,充分混匀,充液适量,无不 足、外溢和气泡,细胞分布均匀。
(4).白细胞总数在参考范围内,大方格间的细胞数不得相 差10个以上,两次重复计数误差不得超过10%。
(5).白细胞数量过高时,可加大稀释倍数,白细胞数量过 低时,可计数8个大方格的白细胞数或取双倍血量。
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6.细胞计数原16 则
大方格四边压线 细胞数左不数右, 数上不数下,
弓形移动
7.正常参考值 成人 : ( 4.0-10.0)×109/L 新生儿: (15.0-20.0)×109/L
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8.考核评价
a. 常规考核标准 (RCS)
RCS= 四大格所见白细胞最大值—最小值 ×100% 四大格所见白细胞数平均值
2、某同学在进行白细胞计数时,一次计得四大格白细 胞数最多为46,最少值为32,试判断该同学考评结果 如何?
原理 试剂器材 操作步骤 实验结果 注意事项 思考题
实验报告内容
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(6).一些贫血患者血液中有核红细胞增多,会计数在 白细胞总数内,应校正。 校正公式:白细胞校正数/L=M×(100/100+N)
M为未校正前白细胞数,N为在白细胞分类时,计数 100个白细胞的同时计数到的有核红细胞数。 (7).调试显微镜 将血细胞计数板平放于载物台,低倍镜处所充计数池 正中盖片略上方,向下微调载物台(防止压碎盖片) 至看清计数区域内分隔线条为止。
3.操作步骤
(1)加稀释液 用移液管向小试管内加入0.38ml白细胞稀释液。 (2)采血、稀释 用微量吸管采血20ul,拭去管外余血,释放于小试
管底部,用上部稀释液洗净吸管内余血,轻摇试管混匀,静置等其 溶血。 (3)清洁计数板及盖片(动作轻柔),夹持盖片缘纵向前推轻放于两 侧支持堤上。 (4)充计数池 将小试管轻微振荡2min,立即以一次性微量吸管吸取 混匀后的白细胞悬液,充入计数池内。静置2-3min,使细胞沉于计 数池底面。 (5)调试显微镜 将计数板放置载物台上,选择(4 × )低倍镜,调节聚 光器使光线较暗,调节旋钮找到方格线,转至低倍镜(10×),调节 光亮 。 (6)计数 低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数,压线细胞数上 不数下,数左不数右。
4 紧捏刺血部位,使其自然充血。 5 用无菌刺针穿刺取血,动作应迅速,深度 2~3mm,稍加挤压以血液流出为宜。 6 用干棉球擦去第一滴血。 7 按需要依次采血。 8 采血完毕,用干棉球压住伤口,止血片刻。带孔乳胶吸头轻轻套在微量吸管上,连接紧密不漏气; 2拇指和中指夹住吸头中下端,示指盖住吸头小孔,拇、