益母草药效成分及其人工种植研究论文
【摘要】目的考察益母草野生品和栽培品中主要有效成分水苏碱和多糖的含量，为人工种植益母草的必要性提供依据。

方法分别采用薄层扫描法测定水苏碱，分光光度法测定多糖。

结果栽培品中水苏碱和多糖含量普遍比野生品含量高，且含量变化有一定规律性。

结论为保证益母草药材质量，应该采用人工种植为好。

【关键词】益母草；水苏碱；多糖益母草来源于唇形科植物益母草(Leonurus japonicus Houtt.)的新鲜或干燥的地上部分，为妇科经产要药。

本实验为考察黔产益母草野生品和栽培品的质量，通过测定益母草中主要有效成分水苏碱和多糖的含量[3，4]，对益母草野生品和栽培品的质量进行比较，为人工种植益母草提供依据，达到提高益母草药材质量的目的。

一、仪器、试剂与药材1 仪器与试剂CS-9301PC双波长飞点层析扫描仪(日本岛津公司)；CAMAG LINOMAT V半自动点样仪(瑞士卡马公司)；定量毛细管(美国MICROCAPS公司)；XS205双量程电子分析天平，量程：万分之一和十万分之一两档(梅特勒-托利多仪器上海有限公司)；硅胶G板(青岛海洋化工厂)；DU-70紫外-可见分光光度计(美国BACKMAN公司)；盐酸水苏碱对照品购自中国药品生物制品检定所，批号：
110712-200407；苯酚、浓硫酸和葡萄糖等其他化学试剂均为分析纯；水为蒸馏水。

2 药材分别采自贵州省惠水县和贵阳市郊乌当，药材样品均经贵阳中医学院魏升华讲师鉴定为红花益母草Leonurus japonicus Houtt.，本实验均用益母草地上部分。

二、方法与结果2.1 水苏碱的分析2.1.1 供试品溶液和对照品溶液的制备精密称取干燥益母草样品粉末约1g，置圆底烧瓶中，加入乙醇约50ml，加热回流1.5h，放冷，滤过，滤渣及回流容器用乙醇50ml分次洗涤，合并滤液和洗液，蒸干，残渣用乙醇溶解，转移至10ml容量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，离心(5000转/min，5min)，取上清液作为供试品溶液。

精密称取在105℃干燥3h的水苏碱对照品适量，加乙醇制成每1ml含2.030mg的溶液，作为对照品溶液。

2.1.2 薄层色谱分析条件用硅胶G薄层板，点状点样，点样量10μl。

以正丁醇-盐酸-乙酸乙酯(8：3：1)为展开剂，展开，取出晾干后，在105℃加热15min，放冷，喷以稀碘化铋钾试液-1%三氯化铁乙醇溶液(10：1)混合溶液至斑点显色清晰，晾干，立即在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布密封。

反射法单波长锯齿形扫描。

波长λS=510nm，狭缝0.4mm×0.4mm。

在上述分析条件下对薄层色谱进行扫描分析。

2.1.3 线性关系的考察用半自动点样仪在同一硅胶G薄层板上点盐苏碱对照溶液2、4、6、8、10、12、14μl，用上述条件展开显色后进行薄层扫描测定，
以点样量(μg)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，求出回归方程为：Y = 185.75X - 411.09，r=0.996，表明水苏碱在4.06～28.42μg范围内线性关系良好。

由于直线不通过原点，因此用外标两点法计算含量。

2.1.4 稳定性考察在同一块薄层板上分别点8μl样品溶液和10μl对照品溶液，依上述色谱条件和扫描条件操作，分别在0、0.5、1、1.5、2h扫描测定盐酸水苏碱峰面积，结果峰面积的RSD为0.38%，表明盐酸水苏碱在本实验条件下2h内稳定。

2.1.5 同板精密度和异板精密度试验分别在同一薄层板上和在另外5块薄层板上点同一供试品溶液五个点，每个点10μl，并以水苏碱对照品溶液3、8μl作为随行标准，分别扫描测定其峰面积，按上述分析条件测定，以峰面积计算，同板精密度RSD为1.00%，异板精密度RSD为1.90%。

2.1.6 重复性试验和回收率试验分别称取同一益母草药材5份，按2.1.1“供试品溶液的制备”和2.1.2“薄层色谱分析条件”操作，测得水苏碱平均含量为1.09%，RSD为2.52%。

精密称取盐酸水苏碱平均含量为1.09%的益母草药材5份，每份约0.5g，精密加入水苏碱对照品5.00mg，同时加入约50ml乙醇回流提取，按上述“供试品溶液的制备”方法和“薄层色谱分析条件”进行溶液制备和测定，结果5次回收率平均值：99.76%，RSD=1.34%。

2.1.7 含量测定与结果按上述“供试品溶液制备方法”和“薄层色谱分析条件”对各样品进行溶液制备和测定，结果见表1。