一、采样前准备
1、当日术毕，按常规对手术间所有物表 及地面进行湿式清洁和擦拭。
2、检查净化空调系统运作是否正常，当 日完成手术间清洁后，调节空调系统处 于待机状态，次晨打开系统运行30min。 自净后采样。
二、采用平板沉降法 1、采样时间: 在净化空调开启30min进行采样，采样时洁净 手术室大门应保持关闭，以维持手术室正压 状态和洁净度。 2、采样护士准备： 在采样前应洗手（或手消毒）
采样时平板应从科室最靠内的房间放置， 依次向外布放，每个手术间也是从最靠 里的位置放置平板，最后放置最靠门的 采样点。采样点分布均匀，收取平板顺 序相反。
5、布点要求： 百级手术间，手术区（手术台两侧0.9m以内，两 端0.4m内）呈对角线，东南西北中5点，周边区 （距墙1m，每边2个）8点，共需13个培养皿；千 级手术间，手术区（手术台两侧0.6m以内，两端 0.4m以内）呈单角线3点，周边区（距1机，长边 2个，短边1个）6点，共需9个培养皿；万级手术 间:手术区（手术台4边，0.4m以内）呈对角线3点， 周边区（距离1m每边1个）4点，共需7个培养皿。 检测时可做一次空白对照和模拟操作。模拟操作 将一个对照皿打开后立即封盖，两个对照结果必 须为阴性，整个操作过程应符合无菌要求。
将用于革兰染色的标本置于无菌标本杯中
将用于培养的标本置于需氧运送培养基中， 密闭保存
分别标注患者及标本信息，30min内送检，否则置4℃冰 箱冷藏，24h内送检
四、使用中紫外线灯辐照度值测定法
方法：紫外线强度照射指示卡测定法
物品准备：标尺、紫外线强度照射指示卡
放好标尺，开启紫外线灯
开启紫外线灯5min后，将指示卡置于紫外线灯下垂直距离1m处， 有图案一面朝上
临床微生物标本采集方法
一 导管尖培养标本采集
物品准备： 无菌试管、 标本标签、 无菌剪刀、 无菌手套
操作者进行卫生消毒，戴帽子、外科口罩
戴无菌手套，将拔除的中央导管用无菌剪刀剪长 约5CM，导管尖端放入无菌试管内。
脱手套，洗手， 标本及时送检
二、留置导尿管患者中段尿培养标本采 集
物品准备：治疗车、 速干手消毒剂、治 疗方盘内有盖培养 试管1支、打火机一 支、无菌手套一副、 0.5%碘伏消毒液棉 球（置换药碗内） 数个、无菌镊子1个、 弯盘1个、酒精灯1 盏（A）
剂用含0.1%硫代硫酸钠中和剂。 3、氯与定、季铵盐类消毒剂用含0.3%吐温-
80和0.3卵磷脂的中和剂。 4、醛类消毒剂用含0.3%甘氨酸中和剂。 5、含有表面活性剂的各种复方消毒剂可在中和剂中
加入吐温-80到0.3%，也可使用经该消毒剂消毒 效果监测的中和剂鉴定试验确定的中和剂。
六、洁净手术室空气沉降菌采样
夹管30min以上。 3、采样部位：应选择尿管采样口或靠近尿道的导尿
管管壁。 4、采样部位的消毒：使用0.5%碘伏液棉球沿采样点
由内而外消毒，每个棉球只使用一次。 5、无菌物品需检查包装和有效期，确保合格。 6、采样过程中避免污染。
三、开放性伤口培养标本采集
物品准备
用生理盐水彻底冲洗伤口
用拭子深入伤口基底部或伤口与正常组织边缘处采 集两个标本，分别用于革兰染色和培养
（2）千级洁净手术间手术区小于 0.75cfu/30min,周边区小于 1.5cfu/30min。
（3）万级洁净手术间手术区小于 2cfu/30min,周边小于4cfu/30min.
（4）普通手术间小于5cfu/30min.
百级手术间
千级手术间
万级手术间
十万级手术间
注意事项：
1、平皿的取送与放置方法：
6、采样高度：
洁净手术间的手术区采样高度为0.81.2m,周边区在地面或0.8m采样，与 《医院洁净手术部建筑技术规范》要求 高度相符。
7、培养条件：
采样后的培养基按要求送至化验室（细 菌定）在37℃培养箱培养，24h观察结 果。
8、判断结果： （1）百级洁净手术间手术区小于
0.2cfu/30min,周边区小于0.4cfu/30min
戴口罩，帽子，穿无菌衣。操作时应轻稳， 避免污染培养皿。
3、采样方法：
把琼脂平板放在室内各采样点，采样时 把平板盖打开扣放于平板少许边沿上， 同时培养皿下垫灭菌疗巾，暴露30min 后，盖上平板盖，并作好手术间标志及 平板上注明手术区和周边区，固定培养 皿，放指定容器内。防再次污染。
4、采样顺序：
拿取平皿时，大在下，小在上，采样时要大 在上，小在下，大的斜盖在小的平皿上，不 能两个平皿同时向上。
操作人员准备：着装规范（卫生手消毒、帽子、口罩、 口罩、）; 患者准备：确认患者（核对姓名、床号、腕带），导尿管已夹住
松开患者导尿管，弃其前段尿液
使用0.5%碘伏溶液棉球消毒导尿管的采样部位
操作者用速干手消毒剂手消毒后戴无菌手套，
使用无菌注射器斜刺入导尿管的采样后，关掉紫外线灯，观察指示卡色块的颜色，进行结果 判定。将指示卡色块的颜色与“灯管强度90uW/CM²”、“灯管 强度70uW/CM²”标准色块进行比较，判定测定结果
五、消毒剂染菌量采样
用物准备：碘伏、含9ml中和剂试管、无菌注 射器、酒精灯、手消毒剂、记号笔
手消毒：按六步洗手法搓揉至干燥
消毒试管口：将试管放在酒精灯上旋转进行消毒， 此为重要步骤。
无菌法取注射器
用无菌注射器抽取使用 中的消毒剂1ml
将抽取的消毒剂注入含 9ml中和剂的试管内，注 意不接触试管口
再次用酒精灯消毒试管 口
将消毒剂与中和剂振荡 充分混匀
用记号笔在试管壁编写 号码，送检
备注：中和剂的选择： 1、醇类与酚类消毒剂用普通营养肉汤中和。 2、含氯消毒剂、含碘消毒剂和过氧化物消毒
协助者点燃 酒精灯，用 燃烧法消毒 试管管口和 盖子
将注射器内尿液注入试管（避免污染）
协助者再次用燃烧法消毒试管管口和盖子， 随即盖紧试管（标本不得倒置，以免污染）， 熄灭酒精灯，贴好检验单标签
清理好用物，手卫生，尿标本及时送检
注意事 项
1、采集指征：怀疑有尿路感染时，应考虑做尿培养。 2、采集时机：抗菌药物使用之前，留置导尿管者须