·论 著·
不同化学消毒剂杀伤难辨梭状芽胞杆菌孢子活性的研究
缪珩华
（上海市浦东新区南汇中心医院供应室，上海２０１３００）
摘要：目的 探讨当前常用化学消毒剂杀伤难辨梭状芽胞杆菌孢子活性的效果，为医院消毒供应中心选取化学
消毒剂杀灭难辨梭状芽胞杆菌孢子提供参考。方法 制备难辨梭状芽胞杆菌孢子待测样本，使用不同化学消毒
剂进行消毒，分为清洁环境（０．３％白蛋白）和污浊环境（３％白蛋白），消毒时间为１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ，以孢子基数／消
毒后存活数＞１０３为标准，评价消毒剂是否有效。结果 仅有８种化学消毒剂能在清洁环境和污浊环境中消毒
１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ情况下，有效杀灭难辨梭状杆菌孢子，２１种化学消毒剂效果次之，３种化学消毒剂无效。结论 选
取有效成分为二氧化氯的消毒剂、保持消毒供应中心整洁、延长消毒时间是杀灭难辨梭状芽胞杆菌孢子的关键。
关键词：难辨梭状芽胞杆菌；消毒供应中心；化学消毒剂；孢子活性
中图分类号：Ｒ１８７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００５－４５２９（２０１３）０２－０４０７－０２
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ ｏｎ ｋｉｌｌｉｎｇ
ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ ｓｐｏｒｅｓ
ＭＩＡＯ Ｈｅｎｇ－ｈｕａ
（Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｎａｎｈｕｉ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，Ｐｕｄｏｎｇ Ｎｅｗ Ａｒｅａ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２０１３００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥ Ｔｏ ｄｉｓｃｕｓｓ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ ｏｎ ｋｉｌｌｉｎｇ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ ｓｐｏｒｅｓ ｓｏ ａｓ ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ ｔｏ ｋｉｌｌ ｔｈｅ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ
ｓｐｏｒｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｃｅｎｔｒａｌ ｓｔｅｒｉｌｅ ｓｕｐｐｌｙ ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ．ＭＥＴＨＯＤＳ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ ｓｐｏｒｅ ｓａｍｐｌｅｓ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ
ａｎｄ ｗｅｒｅ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ，ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｃｌｅａｎ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ（０．３％ａｌｂｕｍｉｎ）ａｎｄ ｄｉｒｔｙ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ（３％ａｌｂｕｍｉｎ）．Ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｓｔｅｒｉｌｉｚｅｄ ｆｏｒ １ｍｉｎｕｔｅ ａｎｄ ６０ｍｉｎｕｔｅｓ．Ｔｈｅ
ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ ｗａｓ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｉｎ ａｃｃｏｒｄａｎｃｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｃａｒｄｉｎａｌ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｐｏｒｅｓ／ｓｕｒｖｉｖａｌ
ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｓｐｏｒｅｓ ａｓ ｔｈｅ ｓｔａｎｄａｒｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ Ｏｎｌｙ ８ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ ｗｅｒｅ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙ
ｋｉｌｌｉｎｇ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ ｓｐｏｒｅｓ ｕｎｄｅｒ ｂｏｔｈ ｃｌｅａｎ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ａｎｄ ｄｉｒｔｙ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｆｏｒ
１ｍｉｎｕｔｅ ｏｒ ６０ｍｉｎｕｔｅｓ，ｔｈｅｒｅ ｗｅｒｅ ２１ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ ｔｈａｔ ｗｅｒｅ ｌｅｓｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ａｎｄ ３ｋｉｎｄｓ ｏｆ
ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔ ｔｈａｔ ｗｅｒｅ ｉｎｖａｌｉｄ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮＩｔ ｉｓ ｔｈｅ ｋｅｙ ｏｆ ｋｉｌｌｉｎｇ ｔｈｅ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ ｓｐｏｒｅｓ ｔｏ
ｓｅｌｅｃｔ ｔｈｅ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｔｈｅ ｃｈｌｏｒｉｎｅ ｄｉｏｘｉｄｅ ａｓ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ，ｔｏ ｋｅｅｐ ｔｈｅ ＣＳＳＤ ｃｌｅａｎ ａｎｄ ｔｉｄｙ，ａｎｄ
ｔｏ ｅｘｔｅｎｄ ｔｈｅ ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｔｉｍｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ ｓｐｏｒｅｓ；Ｃｅｎｔｒａｌ ｓｔｅｒｉｌｅ ｓｕｐｐｌｙ ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ；Ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔ；Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ
ｓｐｏｒｅｓ
收稿日期：２０１２－０９－２５； 修回日期：２０１２－１１－３０ 难辨梭状芽胞杆菌属厌氧性细菌，一般寄生在
人的肠道内。过度服用某些抗菌药物，艰难梭菌的
菌群生长速度加快，影响肠道中其他细菌，引发炎
症。难辨梭状芽胞杆菌是导致患者腹泻的重要病原
菌，主要通过手、医疗器材和染菌杂物等传播。难辨
梭状芽胞杆菌高度厌氧，暴露在空气中１５ｍｉｎ即死
亡。加热、干燥以及常用消毒剂也能有效杀灭难辨
梭状芽胞杆菌。然而其孢子则具有很强的物理、化
学环境适应性，难以杀灭。研究表明，难辨梭状芽胞杆菌孢子可在不良环境中存活数月，且随着时间推
移，医院病房难辨梭状芽胞杆菌孢子存在的可能性
越大。本研究以孢子基数／消毒后存活数＞１０３为
标准，评价３２种化学消毒剂对难辨梭状芽胞杆菌孢
子活性的杀伤效果，从而为医院消毒供应中心选取
化学消毒剂提供参考。
１ 材料与方法
１．１ 化学消毒剂 纳入研究的３２种化学消毒剂，
按照其使用说明推荐的最低剂量对孢子待测样本进
行消毒，消毒时间为１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ。按有效成分，·７０４·中华医院感染学杂志２０１３年第２３卷第２期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｎｏｓｏｃｏｍｉｏｌ Ｖｏｌ．２３Ｎｏ．２ ２０１３本研究采用化学消毒剂分为如下几类：二氧化氯类
１９种；次氯酸钠类５种；三胺类４种；季铵盐混合物
类３种；过氧乙酸类１种。
１．２ 难辨梭状芽胞杆菌孢子制备 用头孢甲氧噻
吩－环丝氨酸－果糖－黄琼（ＣＣＦＡ）干粉配置ＣＣＦＡ培
养皿。ＣＣＦＡ培养皿为选择性培养皿，难辨梭状芽
胞杆菌能在ＣＣＦＡ培养皿上形成特殊形状的菌落，
并且其他厌氧菌的生长受到抑制［１］。培养温度为
（３７±２）℃，持续２４ｈ，制备得到难辨梭状芽胞杆
菌。将得到的难辨梭状芽胞杆菌培养皿置于４～
８℃厌氧环境中，培养３～５ｄ，然后将其置于厌氧环
境中以７０℃恒温加热２０ｍｉｎ。
１．３ 处理方法 将难辨梭状杆菌孢子配置成两种
待测样本，即清洁环境待测样本（含０．３％白蛋白）
和污浊环境待测样本（含３％白蛋白）。按照化学消
毒剂产品使用说明推荐的最低剂量，分别处理两种
待测液，处理时间分别为１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ，处理过程
均在厌氧环境，室温１８℃条件下进行。
２ 结 果
纳入研究的３２中化学消毒剂产品，仅有８种
（序号１～８）化学消毒剂能在清洁环境和污浊环境
中，消毒１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ情况下，有效杀灭难辨梭
状杆菌孢子（孢子基数／消毒后存活数＞１０３）。消毒
产品１～４效果最显著，在两种环境和两种消毒时间
下孢子基数／消毒后存活数＞１０３基数。此８种化
学消毒剂的有效成分均为二氧化氯。两种产品（９
号，有效成分为季铵盐混合物类；１０号，有效成分为
二氧化氯）在清洁环境下，消毒１ｍｉｎ和６０ｍｉｎ均
能使孢子基数／消毒后存活数＞１０４，但在污浊环境
中则需要消毒＞６０ｍｉｎ才能有效杀灭孢子。６种产
品（序号１４～１９，有效成分为次氯酸钠或次氯酸钠
混合物、三胺类）仅在消毒６０ｍｉｎ有效杀伤清洁环
境和污浊环境中的难辨梭状杆菌孢子。剩余１０种
产品（序号２０～２９，其中６种有效成分为二氧化氯、
３种为三胺类、１种为过氧乙酸）仅在清洁环境下消
毒６０ｍｉｎ有效杀伤孢子活性。除序号３０的化学消
毒剂外，有效成分为二氧化氯的化学消毒剂在清洁
环境中消毒６０ｍｉｎ均能使孢子基数／消毒后存活数
＞１０３。３种产品（序号３０～３２）无效。见表１。
３ 讨 论
消毒供应中心是医院无菌物品的处理和供应中
心，是保证医疗护理质量及控制医院感染的关键科
室［２］。难辨梭状杆菌是常见院内获得性感染重要致表１ 不同化学消毒剂杀伤难辨梭状芽胞杆菌孢子活性
Ｔａｂｌｅ １ Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｄｉｓｉｎｆｅｃｔａｎｔｓ ｏｎ
ｋｉｌｌｉｎｇ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ ｓｐｏｒｅｓ
序 号有效成分孢子基数／消毒后存活数清洁环境（０．３％白蛋白）１ｍｉｎ ６０ｍｉｎ污浊环境（３％白蛋白
）１ｍｉｎ ６０ｍｉｎ１二氧化氯＞４＞４＞４＞４２二氧化氯＞４＞４＞４＞４３二氧化氯＞４＞４＞４＞４４二氧化氯＞４＞４＞４＞４５二氧化氯＞４＞４ ３＞４６二氧化氯＞４＞４ ３ ４７二氧化氯＞４＞４ ３＞４８二氧化氯３＞４ ３＞４９季铵盐３＞４＜３＞４１０二氧化氯３＞４＜３ ３１１二氧化氯３＞４＜３＜３１２二氧化氯３＞４＜３＜３１３二氧化氯３＞４＜３＜３１４三胺类＜３＞４＜３＞４１５次氯酸钠＜３＞４＜３＞４１６次氯酸钠＜３＞４＜３＞４１７次氯酸钠＜３＞４＜３＞４１８次氯酸钠＜３＞４＜３ ３１９次氯酸钠＜３＞４＜３ ３２０二氧化氯＜３＞４＜３＜３２１二氧化氯＜３＞４＜３＜３２２二氧化氯＜３＞４＜３＜３２３二氧化氯＜３＞４＜３＜３２４二氧化氯＜３＞４＜３＜３２５二氧化氯＜３＞４＜３＜３２６三胺类＜３＞４＜３＜３２７过氧乙酸＜３ ４＜３＜３２８三胺类＜３ ３＜３＜３２９三胺类＜３ ３＜３＜３３０二氧化氯＜３＜３＜３＜３３１季铵盐＜３＜３＜３＜３３２季铵盐＜３＜３＜３＜３
注：表中同类化学消毒剂为不同厂家提供。
病菌，与ＡＡＤ关系密切。其孢子存活能力较强，是
供应室消毒工作中的难题。本研究表明，尽管当前
市售的化学消毒剂种类繁多，但有效成分为二氧化
氯的化学消毒剂杀灭难辨梭状芽胞杆菌孢子效果较
好。清洁环境中的消毒效果好于污浊环境，提示供
应室应注重保持消毒设备与消毒用品的清洁。在消
毒供应中心条件许可的情况下，延长消毒时间也有
助于更好地杀灭难辨梭状杆菌孢子。
参考文献
［１］ 刘晶晶，袁耀宗．难辨梭状芽胞杆菌与炎症性肠炎［Ｊ］．国际消化病杂志，２０１０，２（３０）：１１－１３．［２］ 易元平．医院供应室工作中存在的问题与对策［Ｊ］．检验医学与临床，２００９，６（１１）：９２５－９２６．·８０４·中华医院感染学杂志２０１３年第２３卷第２期 Ｃｈｉｎ Ｊ Ｎｏｓｏｃｏｍｉｏｌ Ｖｏｌ．２３Ｎｏ．２ ２０１３