慢，因而滴定开始时，染料要迅速加入，而后尽可能一点一点地加入， 并要不断地摇动三角瓶直至呈粉红色，于15s内不消退为终点。
(6) 提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留取上清液进行滴定。
思考题：
1．为了测得准确的维生素C含量，实验过程中都应注意哪些操作步 骤？为什么？
2．试简述维生素C的生理意义。
操作方法:
一、提取 水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果，用纱布或吸水纸吸干表面
水分。然后称取20g，加入20ml 2%草酸，用研钵研磨，四层纱布过滤， 滤液备用。纱布可用少量2%草酸洗几次，合并滤液，滤液总体积定容 至50ml。 二、标准液滴定
准确吸取标准抗坏血酸溶液1ml置100ml锥形瓶中，加9ml 1%草 酸，用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并保持 15s不褪色，即达终点。由所用染料的体积计算出1ml染料相当于多少毫 克抗坏血酸（取10ml 1%草酸作空白对照，按以上方法滴定）。 三、样品滴定
维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）
目的要求:
（1）学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法。 （2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
实验原理:
维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，缺少它时会产生坏血 病，因此又称为抗坏血酸（ascorbic acid）。它对物质代谢的调节具有 重要的作用。近年来，发现它还有增强机体对肿瘤的抵抗力，并具有化 学致癌物的阻断作用。
本法用于测定还原型抗坏血酸，总抗坏血酸的量常用2,4-二硝基苯肼 法和荧光分光光度法测定。
试剂和器材:
一、试剂 2%草酸溶液: 草酸2g溶于100ml蒸馏水中。 1%草酸溶液: 草酸1g溶于100ml蒸馏水中。 标准抗坏血酸溶液（1mg/ml）: 准确称取100mg纯抗坏血酸（应为洁
白色，如变为黄色则不能用）溶于1%草酸溶液中，并稀释至100ml，贮 于棕色瓶中，冷藏。最好临用前配制。
准确吸取滤液两份，每份10ml, 分别放入2个锥形瓶内，滴定方法同 前。另取10ml 1%草酸作空白对照滴定。 四、计算
式中：VA为滴定样品所耗用的染料的平均毫升数； VB为滴定空白对照所耗用的染料的平均毫升数； C为样品提取液的总毫升数； D为滴定时所取的样品提取液毫升数； T为1ml染料能氧化抗坏血酸毫克数（由操作二计算出）； W为待测样品的重量（g）。
注意事项:
(1) 某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物泡沫太多，可加 数滴丁醇或辛醇。
(2) 整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程 一般不超过2min。滴定所用的染料不应小于1ml或多于4ml，如果样品含 维生素C太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。
(3) 本实验必须在酸性条件下进行。在此条件下，干扰物反应进行
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚（DCPIP），本身则氧化 为脱氢型。在酸性溶液中，2,6-二氯酚靛酚呈红色，还原后变为无色。 因此，当用此染料滴定含有维生素C的酸性溶液时，维生素C尚未全部 被氧化前，则滴下的染料立即被还原成无色。一旦溶液中的维生素C已 全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从 无色变成微红色时即表示溶液中的维生素C刚刚全部被氧化，此时即为 滴定终点。如无其它杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品 中所含还原型抗坏血酸量成正比。
0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛稀释至250ml，贮于棕色瓶中冷藏 （4℃）约可保存一周。每次临用时，以标准抗坏血酸溶液标定。 二、材料
苹果、卷心菜等。 三、器材
锥形瓶（100ml），组织捣碎器，吸量管（10ml），漏斗，滤纸， 微量滴定管（5ml），容量瓶（100ml，250ml）。
维生素C是具有L系糖型的不饱和多羟基物，属于水溶性维生素。它 分布很广，植物的绿色部分及许多水果（如橘子、苹果、草莓、山楂 等）、蔬菜（黄瓜、洋白菜、西红柿等）中的含量更为丰富。
维生素C具有很强的还原性。它可分为还原性和脱氢型。金属铜和酶 （抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。根据它具有还原 性质可测定其金属含量。
得很慢。 (4) 2%草酸有抑制抗坏血酸氧化酶的作用，而1%草酸无此作用。 (5) 干扰滴定因素有： 若提取液中色素很多时，滴定不易看出颜色变化，可用白陶土脱
色，或加1ml氯仿，到达终点时，氯仿层呈现淡红色。 Fe2＋可还原二氯酚靛酚。对含有大量Fe2＋的样品可用8%乙酸溶液
代替草酸溶液提取，此时Fe2＋不会很快与染料起作用。 样品中可能有其它杂质还原二氯酚靛酚，但反应速度均较抗坏血酸