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实验七 酵母菌的形态观察和死活细胞鉴别
实验材料
• 1. 培养2d的面包酵母斜面培养物 • 2. 0.1%吕氏碱性美蓝染液
实验方法
美蓝染液水浸片法
1. 滴一滴吕氏碱性美蓝染液于载玻片中央,无菌操作取酵母培 养物置于染液中,混合均匀。 2. 取盖玻片,将盖玻片一端与菌液接触,缓慢将盖玻片倾斜并 盖在菌液上。 3. 3min后,镜检。观察酵母菌形态及出芽情况,并根据细胞 颜色区别死活细胞。 4. 30min后,再次观察。
• 第6组:固体淀粉培养基:600ml,P243 蛋白胨6g,氯化钠3g,牛肉膏3g,可溶性淀粉1.2g,水 600ml,琼脂10g, 121℃灭菌20min。 • 第7组:明胶培养基,500ml,P243 蛋白胨5g,氯化钠2.5g,牛肉膏1.5g,明胶80g,水500ml ,每管7ml, 121℃灭菌20min。
• 第8组:蛋白胨水培养基:250ml,p244 蛋白胨2.5g,氯化钠1.25g,水250ml,每管7ml, 121℃ 灭菌20min
实验七 酵母菌的形态观察 与死活细胞鉴别
目的要求
1、观察酵母菌的形态及出芽生殖方式 2、学习区分酵母菌死活细胞的方法
实验原理
酵母菌是单细胞真核微生物, 其大小为常见细菌的几倍至几 十倍。大多数酵母采用出芽方 式进行繁殖。 美蓝是一种弱氧化剂,其氧化 态呈蓝色,还原态呈无色。用 美蓝对酵母细胞进行染色时, 由于新陈代谢,活细胞具有较 强的还原能力,可使美蓝由蓝 色的氧化型转变为无色的还原 型,染色后细胞呈无色。死细 胞或代谢能力弱的衰老细胞其 还原能力弱,染色后细胞呈蓝 色。
实验报告
• 绘的形态特征
• 第1组:牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,1000ml,121℃灭菌 20min,P241 • 第2组:伊红美蓝培养基(EMB培养基):伊红美蓝琼脂 22.5g, 水600ml, 121℃灭菌20min 20%乳糖水溶液120ml:24g加水120ml,115℃灭菌20min
第3组:3倍浓缩乳糖蛋白胨培养基100ml: 蛋白胨3g,氯化钠1.5g,水100ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液0.5ml,每管加5ml,共15管,内装倒置 小管,121℃灭菌20min。
第4-5组:普通浓度乳糖蛋白胨发酵培养基700ml:P244 蛋白胨7g,氯化钠3.5g,水700ml 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1.2ml, 每管加7ml,共45管,内装倒置小管 每管加10ml,共35管,内装倒置小管,121℃灭菌20min。