◆此法可产生精确的基因突变，也可正确纠正机体的基因突变。
① 研究基因功能
◆细菌和一些低等真 核生物在进行基因 取代时，克隆的基 因能精确地插入到 染色体的同源部位， 所以他们是研究基 因取代的理想材料。
◆基因取代法除成功用于细菌和酵母菌的基因分析外，还成功 地应用到老鼠和鸡的基因功能分析中。
② 转基因动物的制备
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11、人生的某些障碍，你是逃不掉的。与其费尽周折绕过去，不如勇敢地攀登，或许这会铸就你人生的高点。
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12、有些压力总是得自己扛过去，说出来就成了充满负能量的抱怨。寻求安慰也无济于事，还徒增了别人的烦恼。
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13、认识到我们的所见所闻都是假象，认识到此生都是虚幻，我们才能真正认识到佛法的真相。钱多了会压死你，你承受得了吗?带，带不走，放，放不下。时时刻刻发
小鼠基因敲除实验
◆基因敲出实际操作简要 步骤：
1、克隆目的基因及其两侧 的DNA序列。
2、通过插入抗性基因或者 DNA缺失，对克隆的目 的基因进行体外遗传改 造，使克隆的目的基因 失活。
3、将经体外改造失活的目 的基因引入受体细胞， 使之与野生型基因进行 同源重组。
◆这两种基因取代，都是是利用内源基因序列两侧或外面的断裂 点，用同源序列的目的基因整个置换内源基因。目前用于基因 敲除的技术有Cre/Lox P系统、FLPI系统等。
③ 用于药物筛选的动物模型
◆动物模型的意义和优越性 ： （一）避免了在人身上进行实验所带来的风险 。 （二）临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来。 （三）可以克服人类某些疾病潜伏期长，病程长和发病率低的缺
点。 （四）可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性 。 （五）可以简化实验操作和样品收集 。 （六）有助于更全面地认识疾病的本质。
但不能虚伪;可以平凡，但不能平庸;可以浪漫，但不能浪荡;可以生气，但不能生事。
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17、人生没有笔直路，当你感到迷茫、失落时，找几部这种充满正能量的电影，坐下来静静欣赏，去发现生命中真正重要的东西。
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18、在人生的舞台上，当有人愿意在台下陪你度过无数个没有未来的夜时，你就更想展现精彩绝伦的自己。但愿每个被努力支撑的灵魂能吸引更多的人同行。
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7、生命的美丽，永远展现在她的进取之中;就像大树的美丽，是展现在它负势向上高耸入云的蓬勃生机中;像雄鹰的美丽，是展现在它搏风击雨如苍天之魂的翱翔中;像江
河的美丽，是展现在它波涛汹涌一泻千里的奔流中。
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8、有些事，不可避免地发生，阴晴圆缺皆有规律，我们只能坦然地接受;有些事，只要你愿意努力，矢志不渝地付出，就能慢慢改变它的轨迹。
◆ 基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物 学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的 技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA同源重组原理 ，用设计的同源片段替代靶基因片段，从而达到基因敲除的 目的。随着基因敲除技术的发展，除了同源重组外，新的原 理和技术也逐渐被应用，比较成功的有基因的插入突变和 iRNA，它们同样可以达到基因敲除的目的。
◆转基因动物生产药物的优点：
1、品种多、产量高、质量好。 2、设备简单、不耗能、无环镜污染。 3、生产周期短。 4、生产成本低。
◆2006年报道：我国目前已有乳铁蛋白、白蛋白、凝血因子等进 入临床试验阶段，首个转基因动物生产的药物有望在5年内上市。 “究竟是哪种转基因药物率先上市，还得由临床疗效说了算。”
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9、与其埋怨世界，不如改变自己。管好自己的心，做好自己的事，比什么都强。人生无完美，曲折亦风景。别把失去看得过重，放弃是另一种拥有;不要经常艳羡他人，
人做到了，心悟到了，相信属于你的风景就在下一个拐弯处。
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10、有些事想开了，你就会明白，在世上，你就是你，你痛痛你自己，你累累你自己，就算有人同情你，那又怎样，最后收拾残局的还是要靠你自己。
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1、不是井里没有水，而是你挖的不够深。不是成功来得慢，而是你努力的不够多。
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2、孤单一人的时间使自己变得优秀，给来的人一个惊喜，也给自己一个好的交代。
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3、命运给你一个比别人低的起点是想告诉你，让你用你的一生去奋斗出一个绝地反击的故事，所以有什么理由不努力!
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4、心中没有过分的贪求，自然苦就少。口里不说多余的话，自然祸就少。腹内的食物能减少，自然病就少。思绪中没有过分欲，自然忧就少。大悲是无泪的，同样大悟
◆◆转转基基因因动动物物的的应应用用领领域域
1、生物反应器：药用或食品蛋白的大量生产，即转基因 动物制药；
2、疾病的动物模型：用于研究、药物筛选、药物治疗、 毒物测试；
3、通过增加或删除基因来研究基因的功能、调控和发育， 如癌基因、免疫系统等；
4、异种器官的移植； 5、家畜品种的改良。
③ 用于药物筛选的动物模型
④ 转基因动物可作为“生物反应器”生产药 物。
◆转基因动物生产药物不仅开辟了制药业的新纪元，而且它也是 转基因动物研究最活跃的领域。
◆基因工程药物3 个阶段: 1、细菌基因工程，即把目的基因通过适当的改建导入大肠杆 菌中，再通过细菌等原核微生物表达的目的蛋白作为药物; 2、是细胞基因工程药物，这是把人或哺乳动物的基因直接导 入哺乳动物的细胞中，生产有生物活性的产品; 3、其三是利用转基因动物生产低成本、高活性的药物。
◆基因敲除和敲进的原理都是同源重组，即同源双交换，用 克隆的外源基因取代基因组中野生型等位基因。
◆两者不同点在于，基因敲除导入的外源基因是失活的、无 功能的基因，基因敲进导入的是有活性和功能的基因。因 而两者的具体用途有所不同。
◆基因敲除和敲进都可用于基因功能的研究，基因敲进则也 可用于突变基因的修复。
◆基因敲除（knock out of gene）:是基因打靶技术的一种，指外 源DNA与受体细胞基因组中序列相同或相近的基因发生同源重 组，从而代替受体细胞基因组中的相同或相似的基因序列，整 合入受体细胞的基因组中。
◆基因敲进（knock in of gene）：利用基因同源重组，将外源有 功能的基因转入基因组中不存在或已失活的细胞中与其基因组 中同源序列进行同源重组，在细胞内获得表达，这一技术称为 基因敲进。
③ 用于药物筛选的动物模型
◆用于药物筛选的动物模型例如： 帕金森病动物模型，用于药物筛选。 建立抗丙型肝炎病毒药物筛选的动物模型。 精神分裂症动物模型及其药物筛选。 高尿酸血症动物模型的建立及抗痛风中药的筛选。 ◆要求： （一）相似性 （二）重复性 （三）可靠性 （四）适用性和可控性 （五）易行性和经济性。
一、转基因动物
◆转基因动物是把外源基因导入 动物的生殖细胞中，并整合该 细胞后发育成为个体整合的外 源基因，整合的外源基因又能 影响其后代遗传的动物。
转基因动物动物
供体动物→受精卵→无核受精卵→组装的核细胞→多细胞胚胎→假孕 动物→动物幼崽→雌性转基因动物→乳汁→药用蛋白
悲心，饶益众生为他人。
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14、梦想总是跑在我的前面。努力追寻它们，为了那一瞬间的同步，这就是动人的生命奇迹。
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15、懒惰不会让你一下子跌倒，但会在不知不觉中减少你的收获;勤奋也不会让你一夜成功，但会在不知不觉中积累你的成果。人生需要挑战，更需要坚持和勤奋!
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16、人生在世：可以缺钱，但不能缺德;可以失言，但不能失信;可以倒下，但不能跪下;可以求名，但不能盗名;可以低落，但不能堕落;可以放松，但不能放纵;可以虚荣，
无言。缘来尽量要惜，缘尽就放。人生本来就空，对人家笑笑，对自己笑笑，笑着看天下，看日出日落，花谢花开，岂不自在，哪里来的尘埃!
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5、心情就像衣服，脏了就拿去洗洗，晒晒，阳光自然就会蔓延开来。阳光那么好，何必自寻烦恼，过好每一个当下，一万个美丽的未来抵不过一个温暖的现在。
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6、无论你正遭遇着什么，你都要从落魄中站起来重振旗鼓，要继续保持热忱，要继续保持微笑，就像从未受伤过一样。
同源重组的应用
09生工夏章传
同源重组概述
同源重组（homologous recombination） ◆即一般重组，是染色体之间进行遗传信息的方式之一，几乎所
有生物都发生同源重组。
◆如真核生物减数分裂中染色体的交换，细菌结合、转化、普遍 性转导的遗传重组都属于同源重组。
◆同源重组要求两个DNA分子的序列同源，同源区越长越有利于 重组；同源区太短，则难于发生重组。因为它依赖于大范围 DNA同源顺序的联会，负责DNA配对和重组的蛋白质因子无碱 基序列特异性，只要两条DNA序列相同或相近，重组便可以在 联会部分的任何位置发生。当然，也存在重组热点，即某些序 列发生重组的概率高于其它序列。
◆诱发性或实验性动物模型（ExperimentalAnimalModels） 用同源重组的方法，将致病因素作用于动物，造成动物组织、
器官或全身一定的损害，出现某些类似人类疾病时的功能、代 谢或毒使动物患相应的传染病，又如用化学致癌剂、放射线、 致癌病毒诱发动物的肿瘤等。诱发性疾病动物模型具有能在短 时间内复制出大量疾病模型，并能严格控制各种条件使复制出 的疾病模型适合研究目的需要等特点，因而为近代医学研究所 常用，特别是药物筛选研究工作所首选。但诱发模型和自然产 生的疾病模型在某些方面毕竟存在一定差异。因此在设计诱发 性动物模型要尽量克服其不足，发挥其特点。
◆同源重组也是对损伤DNA修复的一种重要途径，即重组修复。
同源重组的应用 ◆同源重组的应用价值
主要是用于基因敲除（knock-out）和基因敲进(knock-in) • ① 研究基因功能 • ② 转基因动物的制备 • ③ 用于药物筛选的动物模型 • ④ 转基因动物可作为“生物反应器”生产药物
基因敲进和敲进
◆此前，我国科学家曾在上海成功研制出5头有目的基因整合的 转基因羊，其中一头羊产下小羊进入泌乳期后，其乳汁中有活 性的人凝血因子IX显示，这种凝血因子恰是治疗血友病乙的珍 贵药物。上海医学遗传研究所成功培育出含有人血清白蛋白的 转基因试管牛。目前，科学家们正在进一步研究如何提高成功 率。