方法一
细菌沉淀加入567μlTE溶液(10mmol/L Tris- HCl , 1mmol/L EDTA, pH810) 重悬,
加入10%SDS30μl 和20mg/ml 蛋白酶K3μl , 于37 ℃温育1h,
加入5mol/LNaCL100μl , CTAB/NaCl 80μl 溶液, 于65 ℃温育10min,
加入等体积的氯仿/异戊醇, 混匀, 4 ℃12000g/min离心5min。

将上清液转入另1个离心管中加等体积的酚/氯仿/异戊醇, 混匀, 4 ℃12000g/min 离心5min,
提取上清置于另一管中, 加入0.6体积异丙醇, 轻柔混合, 4℃12000g/min离心5min, 弃上清加入70%乙醇洗涤1min, 离心, 弃上清, 将沉淀的DNA溶于100μl 的无菌去离子水中, - 20℃保存备用
方法二
取 1.5 mL 培养至对数生长期的菌液于 2.0 mL 的离心管中，8 000 r/min 离心5 min，弃上清；
加入600 μL 消化液（10 mmol/L Tris-HCl，0.1 mol/L EDTA，1% SDS，200μg/mL蛋白酶K，20μg/mL RNase A），37℃消化30 min ；
加入等体积的酚/氯仿/异戊醇（25 /24/ 1）混合液，轻摇10 min，12 000 r/min 离心 5 min，取上清，重复抽提1次；加入等体积的氯仿/异戊醇（24 /1）混合液抽提 1 次；
加入1/10 体积的 3 mol/L 的醋酸钠和 2 倍体积的冰乙醇混匀，静置10 min，12 000 r/min 离心10 min，弃上清；
沉淀加入 1 mL 70%乙醇洗涤2次，每次8 000 r/min 离心 5 min，弃乙醇，待沉淀中残余乙醇
挥发后，加入50μL 超纯水溶解DNA。

4℃保存备用。

方法三
将预处理后所得沉淀加入300μL细胞裂解液（主要成分：10mmol/L Tris-HCl 缓冲液、1mol /L 氢氧化钠、10mmol/L乙二胺四乙酸、生理盐水、0.2%十二烷基硫酸钠），振荡混匀，于100℃加热15min。

用酚/氯仿法纯化DNA，即加入等体积的氯仿/异戊醇（24:1），振荡混匀，10000r /min离心5min，
上清液移至加等体积苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1）的试管中，振荡混匀，10000r/min离心5min，
将上清液再移至新管中，加入等体积异丙醇，颠倒混合，10000r/min离心5min，弃上清液，加入无水乙醇1000μL 洗涤一次，10000r/min离心1min，离心后弃上清液，
将沉淀的DNA溶于60μL 的双蒸水中，－30℃保存备用。

将营养琼脂斜面活化的细菌接种乳糖肉汤(LB),37e培养18h后取菌液1.0mL10,000rmni离心smni,弃上清"沉淀中加入56知L兀缓冲液,3单L10%SDS和知L
20m留mL的蛋白酶K溶液,混匀后37e温育h1"加入等体积的氯仿/异戊醇(2:41) 溶液,混匀后1,4000/rmin离心smni"取上清加等体积的酚/氯仿/异戊醇(25:2:41)
溶液,混匀后14侧X州min离心smni"取上清加.06倍体积的异丙醇,12赵刃州min 离心smni,沉淀加lmL75%乙醇洗涤305,离心弃上清,自然风干后加5咖L兀溶
解,4e保存备用"。