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实验动物质量监测报告


3、实验结果准确性、规律性、重复 性的保证
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实验动物质量监测主要包括以下几个方面: 遗传质量 微生物与寄生虫质量 饲料质量 环境质量监测。
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实验动物的遗传背景与反应特性,是影响实验
结果的重要因素。
不同遗传背景与反应特性的实验动物,对同一 刺激有时可引起不同质和量的反应。
感性存在显著差异
❖SHR为自发性高血压大鼠,心血管疾病发 生率高
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一、群体管理
管理上人为的粗心最易引起遗传上的混杂,所以
对育种群进行恰当的管理是保证遗传质量的最有 效方法。
每一个实验动物育种机构都应当认真执行良好的 育种制度,完善地保持育种记录,基础群应有系 谱记录。要做到以上要求,最重要的因素就是要 有训练有素、经验丰富的技术人员。
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2.简单序列长度多态(SSLP)技术
简单序列长度多态位点是动物基因内广泛存
在的由l~4个核苷酸组成的成串的重复序列,
又称为微卫星(micro satellite)。估计这样
的DNA结构在哺乳动物基因组内的数目多达5
万~10万个。在每个特定的位点上,重复序列
的长度在不同品系中存在着差异。采用夹在这
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四、骨骼形态特征监测
常采用“下颌骨分析法”来鉴别和检测大小鼠
的亚系变异。
将年龄、性别、体重相当的大鼠或小鼠处死后, 分辨右下颌骨,加以标记,在直角坐标系上测 量出多个形态特征参考点距离。
将所有测量的平均数作统计分析,利用判别函
数确定下颌骨形状。如果测量值集中,则表明
被测亚系间无显著的遗传变异。
化标记即同工酶或蛋白质,常用的电泳介
质有乙酸纤维素膜、淀粉凝胶、聚丙烯酰
胺凝胶。每一种标记系统做特异性染色,
最后将得到的带型与公布的生化遗传图式
进行比较。如中华人民共和国国家标准GB;
T14923-2001公布9种常用近交系大鼠生化
位点标记基因(表5-2)。
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表5-2 常用近交系大鼠生化位点标记基因
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(二)混合淋巴细胞反应
混合淋巴细胞反应的原理为:异源动物 或遗传上有差异个体的淋巴细胞混合培 养一定时间后,这些细胞会增殖,甚至 进一步裂解。此反应结果可在7~9天获 得,定期地从群体中抽取足够量的动物 进行监测能够维护实验动物的品质。
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(三)淋巴组织移植
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六、现代分子生物学技术
传统的遗传监测方法来源于过去研究者对
哺乳动物进行遗传分析时采用的研究手段。
随着分子生物学技术的发展,分子生物学
技术有可能取代传统的遗传监测方法,其
优点是多态性高,位点丰富,实验技术成
熟,直接涉及生物的遗传基础,DNA样品容
易保存和运输等等。
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五、染色体带型监测
可以利用染色体分带技术,鉴别C带和Q带作 为染色体标记,用来区分大、小鼠的近交系, 在多数大、小鼠的近交系中,所有中期染色 体都存在C带材料,同源染色体的C带区域大 小相同;不同的近交系,C带材料大小不同, 是品系特异的,是一种很有价值的检测亚系 变异和混杂来源的方法。
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例 如 : 位 于 小 鼠 第 2 号 染 色 体 补 体 -5 (complement-5)位点(He)的pC5探针,当 用HindⅢ消化小鼠DNA时,C3H品系将产生 一条2.7kb的带型,而AKP品系将产生6.0kb 和4.6kb两条带型。从而可以在He位点上区 别这两个品系。目前所报道的RFLP位点已 多达1098个,给遗传学研究带来许多便利 条件。
些序列两端的引物,通过聚合酶链式反应(PCR)
和电泳,就能观察到这些位点的差异,从而区
1、实验工作人员的健康和生命的保证
常见的人畜共患病: 流行性出血热、狂犬 病、猴B病毒、淋巴 细胞脉络丛脑膜炎病 毒、利什曼原虫等
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动物一旦染上传染 病,则种群难以净 化,一些烈性传染 病如鼠痘、兔病毒 性出血症等可致动 物全军覆没,造成 巨大经济损失。
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用供体的均质淋巴器官,如骨髓、脾、淋 巴结、胸腺或胚胎肝脏制备出单细胞悬液。 然后将适量活细胞通过静脉或腹腔注射到 受体动物体内,组织相容性由受体中存活 者及脾增大者来确定,也可以用放射学方 法。根据移植细胞的存活数测定。
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三、生化标记监测
通过多种形式的电泳和电聚集。可检定生
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1.限制性片断长度多态(RFLP)技术
当 动 物 基 因 组 DNA 被 限 制 性 内 切 酶 消 化 时,酶能够识别双链DNA链上的特定核苷 酸序列,并在每条DNA链上切割产生一个 切口,使DNA裂解为片断。这些片断的长 度在动物群体中存在变异,造成多态现 象。通过DNA电泳和DNA探针分子杂交技 术,即可观察到不同带型。
为了保存实验动物品种品系特性。使实验动物
使用者在动物实验中能得到正确的、可重复的
科学数据,实验动物生产者在严格遵守品系繁
育技术路线的以防止实验动物遗传上
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的污染和变异。
如:
❖BALB/c对放射线比其他品系更为敏感。 ❖C57BL/6肿瘤发生率低,A系高。 ❖BALB/c和C3H小鼠对鼠伤寒沙门氏菌的敏
实验动物质量监测的意义
生物学实验研究的四个基本条件
Animal,Equipment,Information,Reagent ,
简称AEIR四要素 这4个要素在整个实验研究中具有同等重
要的地位,不能忽略或偏废。事实上,实验 动物质量往往成为制约性要素,影响整个实 验的质量和水平
实验动物质量监测是实验动物科学的重要 07.0内5.202容0 ,是确保实验动物质量的必要手段。 1
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二、免疫学标记监测
(一)皮肤移植法
这是目前最常用和最灵敏的检测亚系内或亚
系间组织相容性基因差异的方法。在小鼠和
大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮肤移植法。
皮肤移植法灵敏度高。易掌握,经济。不需
昂贵设备,易对植皮成活情况进行观察和判
断。能有效地测出新发生的、造成亚系变异
的遗传混杂和突变。
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