实验报告葡萄糖的杂志检验名字：学号：1145039 2014年3月28日检品名称：葡萄糖批号：规格：__一、目的要求1. 掌握药物的一般杂质检查原理与实验方法。

2. 掌握杂质限度试验的概念及计算方法。

3. 熟悉一般杂质检查项目与意义。

二、主要仪器与药品50mL纳氏比色管、坩埚、鼓风干燥箱、马弗炉、药物天平、葡萄糖、氯化钠原料药等。

三、原理：葡萄糖是用淀粉以无机酸水解或在酶催化下经过水解得稀葡萄糖液，再经脱色、浓结晶制得。

1 •国内生产方法有以下几种：⑴酸水解法：以无机酸将淀粉水解为葡萄糖。

⑵双酶水解法：以生物酶为催化剂将淀粉水解为葡萄糖。

⑶酸酶水解法：以盐酸为液化剂，糖化酶为催化剂，将淀粉水解为葡萄糖。

根据葡萄糖生产工艺特点，应进行氯化物、重金属、砷盐等一般杂质检查，进行蛋白质、可溶性淀粉等特殊杂质检查。

四、实验方法1. 酸度取本品2.0g，加水20mL溶解后，加酚酞指示液3滴与氢氧化钠滴定液（0.02mol/L ）0.20mL，应显粉红色。

2. 氯化物取本品0.6g，加水溶解使成25mL ,再加稀硝酸10mL ;溶液如不澄清，应滤过；置50mL纳氏比色管中，加水使成约40mL,摇匀，即得供试溶液。

另取标准氯化钠溶液6.0mL , 置50mL 纳氏比色管中，加稀硝酸10mL，加水使成40mL ,摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液 1.0mL，用水稀释，使成50mL，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较（附录A）。

供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。

3. 硫酸盐取本品2.0g,加水溶解使成约40mL ;溶液如不澄清，应滤过；置50mL纳氏比色管中，加稀盐酸2mL，摇匀，即得供试溶液。

另取标准硫酸钾溶液2.0mL，置50mL纳氏比色管中，加水使成约40mL，加稀盐酸2mL，摇匀，即得对照溶液。

于供试溶液与对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5mL，用水稀释至50mL，充分摇匀，放置10分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较（附录B）。

供试溶液所显浑浊度不得较对照液更浓（0.01%）。

4. 亚硫酸盐与可溶性淀粉取本品1.0g，加水10mL溶解后，加碘试液1滴，应即显黄色。

5. 干燥失重取本品，在105C干燥至恒重，减失重量不得过9.5% （附录C）。

6. 炽灼残渣不得过0.1% （附录D ）。

7. 蛋白质取本品1.0g,加水10mL溶解后，加磺基水杨酸溶液（1 ~5）3mL，不得发生沉淀。

8. 铁盐取本品2.0g，加水20mL溶解后，加硝酸3滴，缓缓煮沸5分钟，放冷，加水稀释使成45mL，加硫氰酸铵溶液（30~ 100）3mL ,摇匀，如显色，与标准铁溶液2.0mL用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.001% ）。

9. 重金属取25mL纳氏比色管两支，甲管中加标准铅溶液一定量与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后，加水稀释成25mL。

取本品4.0g，置乙管中，加水适量溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL ,加水使成25mL ;若供试液带颜色，可在甲管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与乙管颜色一致。

再在甲乙两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL ,摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，乙管中显出的颜色与甲管比较，不得更深（附录E）,含重金属不得过百万分之五。

五、实验结果1. 酸度原理：检品中酸性杂质被碱中和，过量的碱使酚酞显粉红色。

实验现象：显粉红色。

见图一。

结论：符合规定。

2. 氯化物检查原理：Cl + Ag HNO 3 AgCI J （白色）实验现象：样品管浑浊度浅于标准管。

见图二。

结论：符合规定（＜0.01% ）。

3. 硫酸盐原理：SO4 2-十Ba2+＞BaSO q J实验现象：样品管浑浊度浅于标准管。

见图三。

结论：符合规定（＜0.01% ）。

4. 亚硫酸盐与可溶性淀粉原理：黄色为碘试液本身的颜色，证明无亚硫酸盐与可溶性淀粉存在。

当有亚硫酸盐与可溶性淀粉存在时，淀粉遇碘遍蓝色，亚硫酸盐与碘发生氧化还原反应生成碘离子，变为无色。

实验现象：溶液显黄色。

见图四。

结论：符合规定。

5. 干燥失重原理：干燥失重是指药物在规定条件下经干燥后所减失的重量，根据所减失的重量和取样量计算供试品干燥失重的百分率。

实验现象：干燥失重8.0%结论：符合规定（＜9.5% ）。

6. 炽灼残渣实验现象：m o=2O.OO14g m i=22.7435g m2=22.7410g残渣重=（m1-m2）/（m1-m o）*1OO% =0.09%结论：符合规定（＜0.1%）7. 蛋白质实验现象：没有发生沉淀。

见图五。

结论：符合规定。

8. 铁盐原理：Fe3++6SCN-＞[Fe（SCN）6]3-红色实验现象：样品管颜色浅于标准管。

见图六。

结论：符合规定。

9. 重金属原理：硫代乙酰胺在弱酸性（pH约3.5）溶液中水解，产生硫化氢，可与重金属离子结合生成有色硫化物的均匀沉淀，可与对照标准液同法处理比较。

实验现象：样品管颜色浅于标准管。

见图七。

结论：符合规定。

六、结果分析图一葡萄糖酸度注：葡萄糖中酸性杂质被碱中和,碱使酚酞显粉红色图二葡萄糖氯化物注：左为供试管，右为标准管左管浊度浅于右管图三葡萄糖硫酸盐注：左管为标准管，右管为供试管左管浊度深于右管图四亚硫酸盐与可溶性淀粉注：溶液显黄色图七葡萄糖重金属实验注：左管为标准管，右管为供试管 左管颜色深于右管七、讨论1•观察实验结果时，比色方法一般是将两管同置于白色背景上，从侧面观察；比浊方法是将 两管同置于黑色或白色背景上，自上而下地观察。

图五葡萄糖蛋白质实验 注：葡糖糖水溶液与磺基水杨酸溶液不产生沉淀图六 葡萄糖铁盐实验注：上管为标准管，下管为供试管上管溶液颜色深于下管2•精密称定，选用的是精确度为千分之一的称量天平。

3•铁盐试验中，由于缓缓煮沸叫麻烦，可在温度80。

C 水中水浴约五分钟，实验结果也十分明显。

4.酸度实验中，氢氧化钠溶液可添加至 0.4mL ,若还不显粉色，可再滴加氢氧化钠溶液。

实验报告葡萄糖注射液分析 检品名称：葡萄糖注射液一、目的要求名字：开德美 学号：1145039 2014年3月28日批号：规格：1. 掌握pH 值测定原理和pH 计的正确操作。

2. 掌握比旋度的概念、求算方法和旋光法测定旋光性物质含量的原理与计算。

3. 熟悉紫外法检查杂质的原理与方法。

4. 了解注射液杂质检查的一般项目。

二、 主要仪器与药品WZZ-1自动指示旋光仪、pH 酸度计、PH 试纸、纳氏比色管、紫外分光光度仪、 10%葡萄糖注射液。

三、 原理本品为无水葡萄糖的灭菌水溶液。

含葡萄糖( C 6H 12O 6 H 2O )应为标示量的95.0%~105.0%。

［鉴别］取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

原理：5-羟甲基糠醛原理：葡萄糖注射液在高温加热灭菌时，易分解产生 5-羟甲基糠醛:H —C —OH1 coon1 HO —C —H+R — H —C —OH CHO ■ H —C —OHCOOKCHsOHFehling 试剖H —c —OH COONa|HO--C —HCIIOH+ ■H —C —OH|1 丨 + Cu-j(Oll)2 ICHOH f*、*H —C —OHCOOK198.17)H-C=O 8(0% —_* Cn 2O + II ;O(红色)CH.OH0H利用5-羟甲基糠醛在284nm的波长处有吸收，而葡萄糖无吸收，将样品配制成一定浓度的溶液，在284nm的波长处测定，规定吸收度不得大于0.32来控制5-羟甲基糠醛的量。

［含量测定］旋光法（原理：葡萄糖分子中含不对称碳原子，具有旋光性，在一定条件下，其水溶液的比旋度［a］t D为+ 52.5。

〜+ 53.0 °根据旋光度a与浓度C的比例关系可进行含量测定：a二［a Y D* L • C式中L为液层厚度（dm） , C为溶液的百分浓度（g/mL ,按干燥品或无水物计算）。

所以:C = a • 100/［a］D - L四、实验方法1•鉴别取本品，缓缓滴入温热的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉淀。

［检查］pH值应为3.2~5.5。

2•精密量取本品适量（约相当于葡萄糖 1.0g）,置100mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，在284nm的波长处测定，吸收度不得大于0.32。

3•重金属取本品30ml （约相当于葡萄糖3g），必要时，蒸发至约20mL，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL与水适量使成25mL，置25mL纳氏比色管中。

另取标准铅溶液1ml与醋酸盐缓冲液（pH3.5）2mL后，加水稀释成25mL ,置另一25mL纳氏比色管中。

若供试液带颜色，可在标准管中滴加少量的稀焦糖溶液或其他无干扰的有色溶液，使之与样品管颜色一致；再在两管中分别加硫代乙酰胺试液各2mL，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，样品管所显颜色与标准管比较，不得更深）。

按葡萄糖含量计算，含重金属不得过百万分之五。

4.含量测定精密量取本品100ml （约相当于葡萄糖10g）,置100mL量瓶中，加氨试液0.2mL （10%或10%以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置10分钟，测定旋光度。

用读数至0.01并经过检定的旋光计，将测定管（长度为1dm）用供试液体冲洗数次，缓缓注入供试液体适量（注意勿使发生气泡），置于旋光计内检测读数，记录旋光度，同法读取旋光度3次，取3次的平均值作为样品的旋光度。

与 2.0852相乘，即得100mL供试液中含有C6H12O6 H2O的重量（g）。

测定前用水校正零点，测定后再用水核对零点，若零点变动，应重测。

五、实验结果1.鉴别原理：实验现象：生成红色沉淀。

.见图一。

址心结论：符合规定。

2. 检查实验现象：pH为结论：符合规定。

（3.2~5.5）3. 吸光度实验现象：吸光度为0.142 结论：符合规定（＜0.32）4. 重金属实验现象：样品管颜色浅于标准管。

见图二。

结论：符合规定。

4.含量测定实验现象：旋光度为5.35, 100mL 供试液中含有C 6H 12O 6 H 2O 的重量（g ）为11.16g 。

结论：符合规定。

六、结果分析图一鉴别实验注：葡萄糖注射液与碱性酒石酸铜溶液反应 成红色，pH 约为4.8。

七、讨论1. pH 值测定时，每次更换标准缓冲液或供试液前，应用纯化水充分洗涤电极，然后将水吸尽，也可用所换的标准缓冲液或供试液洗涤。

配制标准缓冲液与溶解供试品的水，应是新沸过的冷蒸馏水，其pH 值应为5.5~7.0。

2. 旋光仪接通电源后需预热 5〜20分钟。

每次测定前后应用溶剂作空白校正。