滤，直接进样（10ul） • 2、标准样的制备
将无水乙醇用去离子水稀释至50%vol待用 按一定浓度配置酸的混合酸标样 用50%vol的乙醇溶液定溶到100ml容量瓶中
各有机酸标准溶液浓度
样品编号 单位
1
2
3
4
5
乳酸
mg/100m 15
20
25
30
35
l
乙酸
mg/100m 25
30
35
40
45
l
丁酸
25~45
5~25
30~50
回归方程
RSD/%
Y=0.019x+0.027 1.37 Y=0.023x+0.107 2.54 Y=0.013x+0.074 0.53 Y=0.010x+0.020 3.63
r
99.9755 99.9257 99.9211 99.9734
注：y-测定峰面积 x-浓度
结果表明乳酸、乙酸、丁酸、己酸的线性关系良好
白酒中酸的测定方法
•
李建兵
•
生工10级4班
•
学号 ： 100604012
白酒中酸的测定方法
• 白酒中的酸：乙酸、乳酸、丁酸、己酸和高级
脂肪酸等有机酸类
• 存在形式:大部分以游离状态存在，小部分以盐
类形式存在
• 总酸计算形式：计算白酒总酸时，以有机酸为
主，折算为乙酸的含量 • 酸类影响白酒的口感和后味，是影响口味的主要
因素，酸不足是造成后味寡淡的主要原因。
酸的分类
• 根据有机酸的物理化 学性质：
易挥发性酸
• 举例 C1一C6的小分子酸
不挥发性酸 热不稳定性酸
C7 ～C12 的饱和脂肪酸不 饱和脂肪酸、苯环酸等
琥珀酸、草酸、柠檬酸、 苹果酸等多元酸
测定方法： 1.1、直接进样法
一、易挥 发性酸的 测定方法
1.2、酯化处理间接进样法 以上为气相色谱法
易挥发性酸的测定以 气相色谱居多。由于 它们挥发性较强，为 保证定量的准确性， 一般不进行前处理。
1.3、顶空一固相微萃取 (HS—SPME)法
测定方法
二、不挥 发性酸的
测定
2.1旋蒸浓缩一直接进样法 2.2固相萃取(SPE)法 2.3衍生法
由于它们沸点较高不 2.4比色法
易挥发，可以通过前 处理浓缩富集测定
测定方法 3.1酶法
三、热不稳 定酸的测定
3.2高效液相色谱法(HPLC) 3.3毛细管电泳法
3.4气相色谱-质谱联用
离子色谱法
优点：离子色谱法同时测定蒸馏白酒中七 种有机酸，具有简便快捷、灵敏度高、干扰少 等优点。目前气相色谱法通过运用白酒专用大 口径毛细管柱能定量测定的白酒中的主要酸有 乙酸，已酸和丁酸，而含量较多的乳酸却测不 出来。在阴离子交换为主要分离机理的色谱柱 AS11-HC上醇类可以与有机酸较好实现分离
• 平衡
• -7.0 0
80 20 0 0 5mMNaOH平衡7分钟
80 20
0
• 分析
•0
80 20 0 0
进样
• 8.0
80 20 0 0
• 18.0
85 0 15 0
等度梯度
• 28.0
70
0
30 0
• 29.0
40 0
60 0
• 45
40
0
60 0 CD_1.AcqOff
操作步骤
• 1、样品预处理 白酒溶液清洁后用0.22um水相过滤头过
mg/100m 5 l
10
15
20
25
己酸
mg/100m 30
35
40
45
Hale Waihona Puke 50l3、标准曲线
分别吸取上述标准溶液，进样分析。以 峰面积为横坐标，质量浓度为纵坐标分别 绘制个有机酸的标准曲线，所测得有机酸 回归方程
四种有机酸的线性方程、相关系数 和相对标准偏差
项目名称
乳酸 乙酸 丁酸 己酸
浓度范围 Mg/100ml 15~35
机理：白酒样品经超纯水稀释后可直接进样检测， 待测的甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸、己酸 和乳酸在阴离子交换机理为主的分析柱上分离， 再经抑制型电导检测器直接检测。
阴离子色谱法
主要仪器
ICS3000型高效离子色谱仪（美国Dionex公司），配 有：AS11-HC+AG11-HC（4mm）阴离子分析柱和 保护柱、CD3000-ASRS（4mm）阴离子抑制器、电 导检测器；MILLIPORE超纯水系统， Chromeleon6.8色谱工作站
• 4 样品测定 有机酸定性根据保留时间对照标准样品
丁酸、己酸。 定量采用标准曲线法 根据样品的峰面
积，通过标准曲线得出各种有机酸的浓度。
试剂和样品
• 标准试剂：色谱纯的己酸、乙酸、丁酸、 乳酸试剂
• 溶剂：优级纯的无水乙醇
测定条件
分析柱：AS11-HC+AG11-HC（4mm）阴离子 分析柱和保护柱
进样体积：10ul
• 淋洗液流速：1.5ml/min
• 检测器温度：30℃
洗淋液
• 压力：2200psi （15.15Mpa）
E1
去离子水
E2
5mM NaOH
E3
10mM NaOH
E4
100% 甲醇
淋洗液配制
称50g优级醇NaOH加50ml去离子水定溶100ml； 吸取0.26ml饱和NaOH定溶至1000ml，配制成
5mMNaOH。 吸取5.23 ml饱和NaOH定溶至1000ml，配制成
100mMNaOH。
淋洗液梯度
• 时间（min） %E1 %E2 %E3 %E4 备注