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细胞培养污染图片及甲醛熏蒸(精编课件).ppt
细胞培养污染图片
2010.12.6
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中间长梭形是正在分裂的念珠菌
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真菌污染
真菌污染后,细胞生长变慢,但最后由于营养耗尽及毒 性作用而使细胞脱落死亡。
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鸡舍消毒:每立方米空间用甲醛溶液15毫升、高锰酸钾 7.5g,加7.5毫升水,密闭熏蒸消毒4-10h。
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用量计算: 细胞房空间=35m3 甲醛用量=10ml×35=350ml=0.35L 高锰酸钾用量=350/2=175g 温水用量=175ml
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细菌污染
培养细胞受细菌污染后,会出现培养液变混浊,pH改变。污染后 细胞发生病理改变,胞内颗粒增多、增粗,最后变圆脱落死亡。
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支原体污染电镜照片(x30K),煎蛋形状
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培养液中可见一类黑色 小虫,生长迅速,镜下 快速运动,单个不成串
支原体污染
阳性
阴性
培养细胞受支原体污染后,部分敏感细胞可见细胞生长增殖变 慢,部分细胞变圆,从瓶壁脱落。但多数细胞污染后无明显变 化,或略有变化,若不及时处理,还会产生交叉污染。
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疑似黑胶虫?霉菌污染
Excellen熏蒸灭菌
高锰酸钾具有强氧化性,但和福尔马林常温下反应较 慢,但是反应放热,反应加快促进甲醛的挥发,产生甲醛 气体,甲醛能使菌体蛋白质变性凝固和溶解菌体类脂,可 以杀灭物体表面和空气中的细菌繁殖体、芽胞下真菌和病 毒,所以经一定时间后可杀死病原微生物.
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甲醛加高锰酸钾熏蒸操作法:
1.准备、计算、称取甲醛与高锰酸钾量:10ml甲醛溶液中加入高锰酸钾 3-5g;
2.取一不锈钢容器,容积大小应为甲醛量的3-4倍; 3.在容器内加入全量的高锰酸钾,用纱布或滤布将容器口蒙住; 4.将容器放入空调送风口,快速倒入全量的甲醛溶液,关上空调机组门; 5.启动空调,关闭新风口,循环运行1-2小时,(视甲醛的反应速度); 6.关闭空调,取出容器,空调及房间密闭8小时以上; 7.生产前4小时,打开空调,关闭回风阀进行空调全排风运行,直至空 调无甲醛气味后,空调按常规操作运行。(除甲醛时,可在空调送风口加 入适量的氨水,以快速中和残留甲醛) 操作中注意事项:甲醛加入高锰酸钾中,会迅速产生高温至溶液沸腾, 因此容器应大并应做好防护工作,以免混合的棕红色溶液溅出而污染机组。
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高锰酸钾、甲醛熏蒸消毒
①按照甲醛(40%)10毫升/立方米、高锰酸钾5克/立方米计算用量。不同 情况下,用量有所不同,但比例为2:1。 ②盛药容器要大、耐热、耐腐蚀:一般用陶瓷或玻璃容器,因为高锰酸钾和 甲醛都具有腐蚀性,且混合后反应剧烈,释放热量。 ③房间要密闭:这样熏蒸效果才会好。 ④容器应尽量靠近门,以便操作人员迅速撤离;先将温水倒入容器内,后加 入高锰酸钾,搅拌均匀;再加入甲醛;加入甲醛后人立即离开,密闭房间。 注意顺序:是将甲醛倒入高锰酸钾溶液内。 ⑤消毒时间一般为20-30分钟。 ⑥消毒后要打开门窗通风换气。 这里说的甲醛就是40%的甲醛溶液,也就是 福尔马林,一般包装上写的是37%。