选修1 专题2(时间：45分钟分值：100分)一、选择题(每小题5分，共50分)1．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时( )①可以用相同的培养基②都需要使用接种针进行接种③都需要在火焰旁进行接种④都可以用来计数活菌A．①②B．③④C．①③ D．②④答案：C解析：平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基，故①正确；平板划线法采用接种针进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作，故②错误；纯化时，要进行无菌操作，需要在火焰旁接种，避免空气中的微生物混入培养基，故③正确；平板划线法一般用于分离而不是计数，故④错误。

2．下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是( )A．植物组织培养常用的是固体培养基B．可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C．利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D．在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌答案：D解析：在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。

3．下列有关微生物培养与应用的说法正确的是( )A．天然培养基是指直接取自自然界不需加工的培养基B．接种前需对培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手等进行严格的灭菌处理C．大肠杆菌的纯化培养过程包括培养基的配制和纯化大肠杆菌两个阶段D．分离分解尿素的细菌时，尿素是培养基中唯一的氮源和碳源答案：C解析：天然培养基是成分不明确的培养基，并不是不需加工配制的培养基；实验者的双手需进行消毒处理；分离分解尿素的细菌时，尿素是唯一氮源而不是唯一的碳源。

4．下列对灭菌和消毒的理解不正确的是( )A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是完全相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法答案：B解析：消毒是使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌则是使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。

5．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的选择培养基答案：C解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，用牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。

对照实验遵循的原则之一是单一变量，所以与选择培养基一样接种、培养。

6．下列关于微生物培养和利用的叙述不正确的是( )A．利用稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数B．接种时连续划线的目的是将聚集的菌种逐步稀释获得单个菌落C．以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可选择和鉴别尿素分解菌D．用大白菜腌制泡菜的过程中亚硝酸盐含量变化是先减少后增加答案：D解析：稀释涂布平板法可以用于分离微生物以及对微生物计数；接种时要连续划线，这样可以获得单个菌落；大白菜腌制过程中开始时细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，一般腌制10天后亚硝酸盐含量下降。

7．三个培养皿中分别加入10 mL不同的培养基，然后接种相同的大肠杆菌样液。

培养36 h后，计算菌落数，结果如下表。

下列选项正确的是( )A.B．该实验采用平板划线法接种C．Ⅰ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D．Ⅱ和Ⅲ对照，说明大肠杆菌的生长需要葡萄糖答案：D解析：该培养基加入了琼脂，故为固体培养基，对微生物进行计数，宜采用稀释涂布平板法(而不是平板划线法)接种；稀释涂布平板法是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，一个菌落代表一个单细胞；Ⅰ与Ⅲ对照，说明大肠杆菌生长需要葡萄糖，但不能证明是否需要生长因子；Ⅱ和Ⅲ对照，自变量是有无葡萄糖，说明大肠杆菌的生长需要碳源如葡萄糖。

8．下列关于微生物的分离和培养的有关叙述，错误的是 ( ) A．微生物培养前，需对培养基进行消毒B．分离土壤中不同的微生物，要采用不同的稀释度C．测定土壤样品中的细菌数目，常用菌落计数法D．分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源答案：A解析：微生物培养前，需对培养基进行灭菌处理，将所有的微生物杀死。

9．下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 ( ) A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL，分别涂布于各组平板上C．将实验组和对照组平板倒置，37℃恒温培养24～48小时D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数答案：D解析：在细菌计数时，为保证实验结果的准确性，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数；然后求出平均数，再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。

10．下列有关刚果红染色法的叙述，不正确的是 ( ) A．刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入B．刚果红可以在菌落形成后加入C．刚果红在菌落形成前倒平板时加入，加入的刚果红不需要灭菌D．在菌落形成后加入刚果红时，刚果红不需要灭菌答案：C解析：从对两种筛选纤维素分解菌的方法进行比较分析入手，结合微生物培养过程无菌条件的控制方法来解答该题。

刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。

刚果红可以在细菌菌落形成前倒平板时加入，也可以在菌落形成后加入。

若在细菌菌落形成前倒平板时加入刚果红，则所加刚果红要进行灭菌，以防杂菌的侵入，影响纤维素分解菌菌落的形成；若在菌落形成后加入刚果红，则不需要灭菌。

二、非选择题(共50分)11. [2012·吉林二模](10分)富集培养是微生物学中的最强有力的技术手段之一。

主要是利用不同微生物生命活动特点的不同，制定环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其数量大大增加。

下图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物——对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。

请分析回答下列问题。

(1)①→③重复培养的目的是_____________________________________________________________________________________________________________________。

(2)⑤的菌落中大部分是降解________微生物。

设置⑥的目的是___________________________________________________________________________________________。

(3)⑤→⑥采用单细胞挑取法，将所选菌种接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是：接种环要________灭菌，待其________后，再挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，操作完成后需将接种环在火焰上灼烧，目的是_________________________ ________________________________________________________________________。

(4)如果用这种方法分离土壤中的纤维素分解菌，经常用加入了________的鉴别培养基，在该培养基上，纤维素分解菌会因为产生纤维素酶使菌落周围出现________。

答案：(1)扩大培养(使分解对羟基苯甲酸微生物的比例增高) (2)对羟基苯甲酸对照作用 (3)在火焰上灼烧冷却杀灭残留物 (4)刚果红透明圈解析：(1)通过重复培养可获得更多的分解对羟基苯甲酸的微生物。

(2)通过培养分离获得的主要是分解对羟基苯甲酸的微生物。

(3)接种微生物时要对接种环进行灭菌，待接种环冷却后再接种，接种完毕后还需对接种环灼烧以杀灭残留的微生物。

(4)刚果红与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，该复合物就无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

12．(8分)下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。

请回答：试剂牛肉膏蛋白胨NaCl 琼脂水(1)培养基配方中能充当碳源的成分是________。

培养基配制完成以后，一般还要调节pH，并对培养基进行________处理。

该培养基从物理性质上分类属于________。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是________和________。

(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)________________________________________________________________________。

答案：(1)氮源牛肉膏和蛋白胨灭菌固体培养基(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌即接着划第二次；培养过程中灭菌不严格，受到了其他微生物的污染。

(任选两个)解析：培养基中都应含有水、无机盐、碳源、氮源。

配制培养基时加入了琼脂，因此该培养基属于固体培养基。

培养基配制完成后要调pH和灭菌。

牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作为有机碳源。

分离纯化微生物一般用平板划线法和稀释涂布平板法。

平板划线法中每次划线前都要将接种环灼烧灭菌，以杀死上次划线时接种环上残留的菌种；采用稀释涂布平板法时稀释度要足够高，否则会使微生物不能分散成单个细胞。

13．(12分)请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

(1)从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________；它的同化作用类型是________。

(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

________培养基(选择、鉴别)。

该培养基中的碳源是________。

(3)培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和________。

为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行______________________________________________。

(4)现有一升水样，用无菌吸管吸取1 mL水样至盛有9 mL无菌水的试管中，依次稀释103稀释度。

各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为________。

(5)以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________。

A．制作果酒B．由果酒制作果醋C．制作泡菜D．制作腐乳(6)利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。

与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入________。

答案：(1)分解者异养型(2)鉴别乳糖、蔗糖(蛋白胨) (3)稀释涂布平板法灭菌(4)5.6×108(5)B、C (6)植物激素(或生长素和细胞分裂素)解析：(1)大肠杆菌不能制造有机物，必须以现成的有机物来合成组成自身的物质，属于异养型微生物，在生态系统中主要分解有机物，属于分解者。