某保健酒抗疲劳功能实验报告发表时间：2012-11-23T17:03:44.577Z 来源：《医药前沿》2012年第24期供稿作者：付晖[导读] 目的研究某品牌保健酒（长寿酒）对小鼠的疲劳作用。
方法雄性清洁级成年昆明种小鼠，试验设三个剂量组：10倍人体摄入量组、20倍人体摄入量组、30倍人体摄入量组，以及阴性对照组、溶剂对照组和糖对照组。
付晖 (广东医学院药学院广东东莞 523808)【摘要】目的研究某品牌保健酒（长寿酒）对小鼠的疲劳作用。
方法雄性清洁级成年昆明种小鼠，试验设三个剂量组：10倍人体摄入量组、20倍人体摄入量组、30倍人体摄入量组，以及阴性对照组、溶剂对照组和糖对照组。
分别进行负重游泳试验、血清尿素氮、乳酸、肝糖原测定。
结果该保健酒对小鼠体重无明显影响，实验组负重游泳时间较3个对照组均有延长，其中高剂量组与空白组、酒基对照组和糖对照组之间存在统计学差异，低、中剂量组与酒基对照组之间存在统计学差异。
保健酒3个剂量组血清尿素氮水平与3个对照组相比明显降低（P＜0.05）。
高剂量组与糖对照组相比，小鼠血乳酸曲线下面积明显减小 (P<0.05)。
3个剂量组小鼠与各对照组相比其肝糖原增加（P ＜0.05）。
结论该保健酒能够明显延长小鼠负重游泳时间，降低血清尿素氮含量及血乳酸曲线下面积，增加小鼠糖原贮备，具有抗疲劳作用。
【关键词】保健酒抗疲劳肝糖原尿素氮乳酸游泳【中图分类号】R965 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）24-0118-02 据调查，仍有半数以上消费者认为，现在的保健酒大多粗制滥造。
前些年一些企业为追求高额利润，在原料中做假，故意夸大功效，欺骗消费者，造成产品质量良莠不齐，严重影响了消费者对保健酒的信心[1]。
这些负面影响至今还没有彻底消除。
本研究对某保健酒进行小鼠动物实验，通过对负重游泳时间、肝糖原、血尿素氮和血乳酸的检测，研究该保健酒对机体的抗疲劳作用。
1.材料和方法1.1 受试物：某保健酒，棕褐色液体，成人推荐量100ml/d。
按成人60kg体重计，即1.67ml/kg.bw。
实验时将10倍浓缩液与厂家提供的50度基酒混合配制成不同剂量的应用液灌胃，各应用液中酒精终浓度均为15度（15%，V/V，20℃）。
1.2 试验动物：雄性清洁级成年昆明种小鼠，90只，体重18～22g，均购自广东省广东医学院实验动物中心，证书编号2008-0008。
1.3 剂量选择和配制：试验设三个剂量组：10倍，20倍，30倍人体摄入量组，剂量分别为16.7，33.4，50.0ml/Kg.bw。
以及阴性对照组（蒸馏水）、溶剂对照组（厂家提供的50度酒基30.0 ml以蒸馏水定容至100 ml，酒精终浓度均为15度）和糖对照组（白砂糖20g/100ml）。
各剂量组不同浓度溶液的配制：10倍剂量组取8.3ml10倍浓缩液样品，20倍剂量组取16.7ml10倍浓缩液样品，30倍剂量组取25.0ml10倍浓缩液样品，各组均加30ml厂家提供的50度酒基，用蒸馏水定容至100ml。
小鼠灌胃体积为0.2ml/10g.bw，每天灌胃一次，连续30天，分别测定各项指标。
1.4 主要仪器与试剂：离心机、振荡器、沸水浴、游泳箱（大小约50cm×50cm×40cm）、铅丝、电子天平、白砂糖。
血清尿素氮测定试剂盒，血清乳酸测定试剂盒，肝糖原测定试剂盒均购自南京建成生物试剂公司。
1.5 实验方法：1.5.1 负重游泳试验雄性清洁级成年昆明种小鼠90只，按体重随机分为以上6组，以不同溶液连续灌胃30d。
末次给予受试物30min 后，将尾根部负荷5%（g/g）铅丝的小鼠置于游泳箱中游泳。
游泳箱中水深不少于30cm，水温25±1℃，记录小鼠自游泳开始至死亡的时间（s）。
1.5.2 血清尿素氮测定分组情况同前。
末次给予受试物30min后，将小鼠放入30℃的水中不负重游泳90min后取出，休息60min后摘眼球采血，离心取血清，按试剂盒说明书测定小鼠血清尿素氮。
1.5.3 血清乳酸测定分组情况同前。
末次给予受试物30min后采血20μl，然后不负重在30℃的水中游泳10min后停止，游泳后立即采血20μl，休息20min后再各采血20μl。
小鼠用毛细管从内眦采血。
按试剂盒说明书测定小鼠血清乳酸。
根据公式计算血乳酸曲线下面积：血乳酸曲线下面积=5×(游泳前血乳酸值+3×游泳后10min的血乳酸值+2×游泳后休息20min的血乳酸值)。
以3个时间点血乳酸曲线下面积进行判断，任一试验组的面积小于糖对照组，且差异有显著性，可判定该实验结果阳性。
1.5.4 肝糖原测定分组情况同前。
末次给予受试物30min后立即处死，精确称取肝脏组织100mg，按试剂盒说明书测定小鼠肝糖原。
1.6 实验数据统计所用软件为SPSS V13.0,采用各实验组与对照组均数比较的方差分析对数据进行处理。
2.结果2.1 某保健酒（长寿酒）对小鼠体重的影响（负重游泳实验小鼠）雄性清洁级成年昆明种小鼠90只，按体重随机分为以上6组，以不同溶液连续灌胃30d。
每周测体重一次，灌胃30d后做负重游泳实验。
从表1可以看出，某保健酒（长寿酒）6组小鼠的初始体重及实验结束时体重均无显著性差异，说明本检品对小鼠体重无明显影响。
表1 某保健酒（长寿酒）对小鼠体重的影响（x-±s）组别剂量（ml/kg•bw) 动物数（只）初始体重（g） 2周末体重（g） 3周末体重（g）结束体重（g） A空白对照组 0 14 28.98±1.44 32.94±3.33 37.86±2.91 38.9±3.53 B酒基对照组 0 12 28.61±1.64 35.2±3.27 38.35±3.23 39.53±2.6 C糖对照组 0 15 27.45±2.20 34.62±3.42 36.59±3.64 39.71±3.5 D低剂量组 16.7 14 28.87±1.21 32.77±2.94 36.65±1.96 37.04±2.71 E中剂量组 33.3 11 26.24±3.29 30.67±4.77 35.59±3.49 35.13±3.71 F高剂量组 50.0 14 25.86±2.75 31.93±3.14 35.21±3.52 36.45±3.38 2.2 某保健酒（长寿酒）对小鼠负重游泳时间的影响结果见表2，某保健酒（长寿酒）低、中、高剂量组小鼠负重游泳时间较3个对照组均有延长，其中高剂量组与空白组、酒基对照组和糖对照组之间存在统计学差异（P＜0.05），低、中剂量组与酒基对照组之间存在统计学差异（P＜0.05）。
表2 某保健酒（长寿酒）对小鼠负重游泳时间的影响（x-±SEM）组别剂量（ml/kg•bw）动物数（只）负重游泳时间（s）A空白对照组 0 14 292.56±55.43B酒基对照组 0 14 131.42±28.37C糖对照组 0 15 302.29±88.56D低剂量组 16.7 14 406.29±79.64＊E中剂量组 33.3 14 454.22±78.11＊F高剂量组 50.0 14 508.36±96.48＊，#注：＊与酒基对照组相比，P＜0.05，#与空白对照组、糖对照组相比，P＜0.05。
2.3 某保健酒（长寿酒）对小鼠血清尿素氮的影响结果见表3，与空白、基酒和糖对照组相比，不负重游泳90min后，保健酒（长寿酒）3个剂量组均可显著降低小鼠血清尿素氮含量（P ＜0.05）。
表3 某保健酒（长寿酒）对小鼠血清尿素氮的影响（x-±SD）组别剂量（ml/kg•bw）动物数（只）血清尿素氮（mg/L）A空白对照组 0 11 8.72±1.32B酒基对照组 0 10 8.29±1.07C糖对照组 0 11 9.04±2.31D低剂量组 16.7 9 7.25±0.81＊E中剂量组 33.3 10 6.79±2.76＊F高剂量组 50.0 9 6.65±2.37＊注：＊与空白、酒基、糖对照组相比，P＜0.05。
2.4 某保健酒（长寿酒）对小鼠血乳酸的影响运动前各组血乳酸值无明显差异(P>0.05)。
游泳10min后各组小鼠血乳酸值与运动前相比都有不同程度的升高，高剂量组与空白对照组比较有显著性差异 (P<0.05)。
休息20min后各组血乳酸值均下降，保健酒各剂量组的血乳酸值与空白对照组比较，差异有显著性(P<0.05)。
3个剂量组和空白对照组相比，小鼠血乳酸曲线下面积明显减小，高剂量组与糖对照组相比，小鼠血乳酸曲线下面积明显减小，有显著性差异 (P<0.05)。
结果见表4。
表4 某保健酒（长寿酒）对小鼠血乳酸的影响（x-±SD）组别剂量(ml/kg•bw）动物数（只）游泳前（mmol/L）游泳0min后（mmol/L）休息20min后（mmol/L）血乳酸曲线下面积A空白对照组 0 10 1.32±0.36 1.47±0.21 1.4±0.24 213.53±42.53B酒基对照组 0 11 1.14±0.33 1.26±0.31 1.27±0.28 186.56±36.88C糖对照组 0 10 1.12±0.33 1.31±0.35 1.17±0.21 184.75±31.71D低剂量组 16.7 8 1.27±0.37 1.35±0.36 1.11±0.17＊ 188.5±26.09＊E中剂量组 33.3 9 1.27±0.2 1.37±0.42 1.14±0.2＊ 189±38.38＊F高剂量组 50.0 8 1.30±0.4 1.22±0.28＊ 1.04±0.28＊ 171±28.24＊＊，#注：＊与空白对照组相比，P＜0.05；＊＊与空白对照组相比，P＜0.01；#与糖对照组相比，P＜0.05。
2.5 某保健酒（长寿酒）对小鼠肝糖原的影响结果见表5，某保健酒（长寿酒）3个剂量组与个对照组相比其肝糖原的值明显升高且存在统计学差异（P＜0.05）。