华达专栏囝小肽善冢技或论坛黄芪多糖提取方法的研究董文阳周岩民南京农业大学动物医学院摘要黄芪多糖（ＡＰＳ）为黄芪主要活性成分之一，具有促生长、抗氧化、抗应激和提高免疫力等多种功效。
介绍对ＡＰＳ的６种提取方法，包括水提取法、碱醇提取法、超声波提取法、微波提取法、超高压提取法扣超滤法，及每种方法的提取效果，并就ＡＰＳ提取方丢的研究进展做一综述。
关键词黄芪黄芪多糖提取中图分类号：Ｓ８１６．７文献标志码：Ｂ文章编号：１００２—２８１３（２０１２）０７—００３２—０３黄芪是历代常用的补益中药，为豆科植物膜荚黄芪或蒙古黄芪的干燥根，具有补中益气、拔毒排脓、敛疮生肌和利水退肿之功效。
黄芪多糖（ＡＰＳ）是黄芪中最重要的天然有效成分，包括葡聚糖和杂多糖：葡聚糖有水溶性的１／，一（１—４）（１＿＋６）葡聚糖和水不溶性的ｉｆ，一（１＿４）葡聚糖；杂多糖多为水溶性酸Ｊ睦杂多糖，主要由葡聚糖、鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖组成，少量含有葡醛酸，有些杂多糖仅由葡萄糖和阿拉伯糖组成。
药理研究表明：ＡＰＳ具有抗肿瘤、抗衰老、抗辐射及调节血糖等作用；还能促进免疫器官功能和抗体生成，增加机体的非特异性抵抗能力。
因其抗菌和抗病毒效果良好，临床常用作免疫增强荆。
自２０世纪８０年代以来，为了进一步开发利用ＡＰＳ，许多学者对ＡＰＳ的提取工艺进行了大量研究，以期找出一种更合理和更可行的提取方法。
在此就目前已有的多种提取方法进行综述。
１一般工艺流程ＡＰＳ是溶于水，不溶于醇的大分子化合物，现行的工艺都是用水煮后将ＡＰＳ提取出来，再用乙收稿日期：２０１２—０２—０８通信作者：周岩民３２饲料研究ＦＥＥＤＲＥＳＥＡＲＣＨＮＯ．０７．２０１２醇将多糖从提取液中沉淀、分离并精制出来。
一般工艺条件是用８～１２倍量水，煎煮２－３次，每次１－２ｈ。
其工艺流程图如下：２前处理工艺提取ＡＰＳ前一般需对原料黄芪进行物理处理，如：切成黄芪饮片或黄芪粉末。
许多学者对其前处理工艺进行研究后发现，通过对原料黄芪进行化学处理或生物学处理可显著提高ＡＰＳ的收率。
２．１醇处理法该方法又称醇除水提取法，在提取ＡＰＳ时，先以乙醇为溶剂对黄芪原料进行回流。
张昀等先将药材加人５倍量的９５％乙醇回流，除去黄芪中黄芪总皂苷；提取ＡＰＳ时，以１０倍量蒸馏水１００ｏＣ回流３ｈ，过滤，处理，获得ＡＰＳ（收率６．２１％）。
吴永平等先用６倍量的９０％乙醇水浴回流提取３次，每次１ｈ；待乙醇挥干后，加５倍量的水，隔水加热提取３次，每次２ｈ；合并水提液，处理获得ＡＰＳ（收率２８．５４％）ｏ以上２种研究方法相似，但收率相差较大，可能与所用乙醇的质量浓度、量、加水量、提取时间和次数有关，具体原因尚待研究。
万方数据２．２酶处理法酶技术近年来广泛用于天然植物有效成分提取，其优势在于酶可以比较温和地分解植物组织，提高有效成分的释放速度，从而提高其提取率。
郑立颖等研究表明：加入不同质量浓度的纤维素酶能显著提高ＡＰＳ的收率，将黄芪用０．３％、０．４％和０．５％纤维素酶预处理后，用传统水提法，ＡＰＳ的收率较对照组分别增加了３１４．８％、３９２．６％和３４２．６％。
陈学伟等通过试验得到酶解的最佳条件：酶解时间１２０ｍｉｎ，酶用量０．８％，酶解温度为７５℃。
所获提取液中多糖含量为９．７８％，比传统水溶醇沉法收率提高了３倍。
成玲等研究认为：纤维素酶对细胞壁有很高的穿透性，它可以进入细胞壁内部并将其溶解膨胀，并且这种作用具有高度选择性，它可以在不破坏多糖成分的条件下将其充分释放出来。
纤维素酶在中药材的前处理中发挥了很大的作用，发展前景十分广阔，在生产应用上具有现实意义。
３萃取工艺３．１水提取法水提取法一般是用水煎煮过滤得提取液，合并滤液，经浓缩和醇沉等处理得ＡＰＳ。
该方法的优势在于操作简便，但多糖收率和含量都较低，加之提取过程要耗费大量的有机溶剂，增加了提取成本，制约了ＡＰＳ的进一步开发利用。
３．１．１水溶醇沉法水溶醇沉法又称水煎煮法，目前Ａｌａｓ的提取多采用水溶醇沉法。
葛朝亮等研究得出的最佳工艺为加水量１２：１，提取时间０．５ｈ，提取次数２次，提取液浓缩后加无水乙醇沉淀，得ＡＰＳ（收率２．７％）。
倪艳等进行优化试验，确定了最佳工艺：以１２倍量水，提取３次，每次１．５ｈ。
罗毅等研究得出的最佳工艺为水煎３次，每次１ｈ，每次加８倍量水。
水溶醇沉法简便易行，但其收率和多糖纯度均较低。
３．１．２温水提取法孙瑞敏等改进了传统的水溶醇沉提取ＡＰＳ的方法：称取黄芪根短杆或黄芪粉末，加入到５。
８倍量蒸馏水中，在６２～６８℃下浸取ｌ～３ｈ；过滤后９５％乙醇沉淀，分离提纯，得ＡＰＳ（收率８。
２％）。
该研究还提出乙醇与提取液最好的体积比应为２：１，减少了能源消耗，节约了资源，降低了成本也提高华达专栏了质量。
温水提取法简便、环保、成本低且适合生产。
３．１．３水回流提取法聂小华等采用水回流提取法提取ＡＰＳ：先称取黄芪粉末，加入１０倍量水，回流ｌｈ，离心；药渣再用８倍量水回流４０ｍｉｎ，离心；合并提取液，浓缩，醇沉并除杂质得ＡＰＳ。
赵强强等采用田口试验设计法对水回流提取法进行了优化，考察了加水量、提取时间和提取次数对提取的影响，得出最佳条件：加６倍量的水，提取１．５ｈ，提取３次，得ＡＰＳ（平均收率为３．４９％）。
３．１．４碱水提取法刘永录等采用Ｎａ０Ｈ溶液提取法：取黄芪药材４００ｇ，分别加１２和１０倍量ｐＨ为１２的Ｎａ０Ｈ水溶液煎煮２次，抽滤；调ｐＨ为中性，合并提取液，浓缩，醇沉并除杂质得ＡＰＳ。
Ｎａ０Ｈ溶液提醇沉法的多糖收率为７。
７３％，略高于以Ｃａ（ＯＨ）ｚ溶液同法提取的多糖收率（７．１２％），显著高于以蒸馏水同法提取的多糖收率（３．６４％）。
李红民等采用ｐＨ为９—１０的Ｃａ（ｏＨ）２溶液煮沸提取Ａｌａｓ，提取液浓缩时调ｐＨ约为６．５，浓缩得到ＡＰＳ粗提物，其提取率为１１．７％，是以蒸馏水同法提取所获收率（３．６％）的３．２５倍，是以Ｎａ２Ｃ０３水溶液同法提取所获收率（５．７％）的２．０５倍，可推得碱性条件对提取ＡＰＳ更为有利。
３．２碱醇提取法田洛等首先提出碱醇提取ＡＰｓ的方法：准确称取黄芪饮片，用５％乙醇与黄芪药材按１０：１的量，在ｐｉｌｌ２的Ｎａ２Ｃ０３溶液中９０℃下提取２次，每次１．５ｈ，过滤，合并滤液，浓缩沉糖，得ＡＰＳ（收率１９．１５％）；利用红外光谱对３种方法提取的残渣进行分析证明，碱醇法残渣中多糖成分的残留量最低，提取效果较好。
刘富岗等采用Ｎａ０Ｈ醇提取ＡＰＳ：取黄芪药材饮片５０ｇ，分次加Ｎａ０Ｈ调ｐＨ至１２的５％醇液５００和６００ｍＬ，加热回流２次，分别为３和２．５ｈ，处理后得ＡｌａＳ；该提取法收率为１３．０４％，高予以Ｃａ（ＯＨ）２同法提取的收率（７．９６％），显著高于以蒸馏水同法提取的收率（３．６７％）。
碱醇提醇沉的提取率要明显高于直接水提法的原因目前尚无定论。
刘永录等认为这是因为碱对植物细胞壁起到破壁作用，且在碱性条件下纤维间的饲料研究ＦＥＥＤＲＥＳＥＡＲＣＨＮＯ０７．２０１２３３万方数据华达专栏酯键易断裂而发生剥皮反应，使更多的多糖得以游离而被提取出来；刘富岗等认为可能是水提法溶出了大量亲水性黏液质，降低了多糖含量，黏液质附着在黄芪饮片表面，使多糖较难溶出。
３．３超声波提取法超声波提取法是一种有效的新型提取方法，其空化作用可破坏植物细胞壁和细胞膜结构，有助于细胞内容物的渗出，从而提高多糖提取率。
吕帮玉等通过正交试验优化了提取ＡＰＳ的工艺条件，考察了提取时间、提取次数、料液比、温度和ｐＨ对提取的影响，得出超声波法提取ＡＰＳ的最佳条件为２０ｍｉｒｄ次，提取次数２次，料液比１：１２，ｐＨ９，温度８０℃，以滤液中多糖含量测算，ＡＰＳ的收率达９６．６％，是水煎煮法多糖提取率（３８．７％）的２．５倍。
宋清焕等采用了超声波辅助法提取，确定了最佳工艺条件为３０倍量水，超声提取ｌｈ，提取率可达到９２．１％。
徐艳等采用超声细胞粉碎仪提取ＡＰＳ。
用８０％乙醇回流提取３ｈ作为药材的前处理，然后加８倍量蒸馏水，连接超声细胞粉碎仪，超声处理１ｈ，过滤，滤渣再用６倍量蒸馏水超声处理４０ｍｉｎ，过滤，合并滤液并浓缩。
该试验取等质量的样品分别用碱提法、水煎煮法和超声细胞破碎法获得的ＡＰＳ总量分别为１．２０４、１．０１１和０．６３９ｇ，测定ＡＰＳ含量分别为４．７０％、５．９０％和７．６０％。
碱提法虽然获得的多糖总量最多但含量最低；超声细胞粉碎法多糖含量最高最纯。
超声波法具有省溶剂、省时、节能及高提取率等优点，有利于降低提取材料的成本。
３．４微波提取法王莉等首次采用微波技术提取ＡＰＳ。
将黄芪放入ＭＣＬ一３型连续微波反应器中，调整功率为５６０、５００、４００和３５０Ｗ，依次以２．５倍量的石油醚（６０．９０℃）、乙醚和８０％乙醇回流提取。
反应２０ｍｉｎ；待药渣挥干溶剂后，调整反应器功率为６３０、６００、５６０和４５０Ｗ，以水回流提取２０ｍｉｎ，所得ＡＰＳ收率为６．５５％。
张佳兰等通过正交试验设计的方法得到了微波提取ＡＰＳ的最佳工艺参数：微波功率为４００Ｗ，提取时间８ｒａｉｎ，固液比ｌ：４０（ｇ：ｍＬ），提取液ｐＨ为８．５。
微波加热是将微波电磁波转化成分子的动能而发热，具有安全高效的特３４饲料研究ＦＥＥＤＲＥＳＥＡＲＣＨＮＯ０７．２０１２点，能提高多糖提取率。
３．５超高压提取法王再幸等采用高压脉冲电场快速提取ＡＰＳ，确定最佳条件：电场强度为２０ｋＶ／ｅｍ，脉冲数为６，料液比为１：１４，得到ＡＰＳ（收率２４．３６％）。
刘春娟等运用超高压技术提取ＡＰＳ，在压力３５０ＭＰａ，料液比１：６０，浸泡时间５ｈ，保压时间２ｍｉｎ的条件下得到最大收率为２４．２８％。
超高压提取法与其他方法相比较，具有提取液杂质少、收率高、易分离纯化、提取时间短和耗能低等特点。
４后处理工艺各提取法均使用乙醇处理萃取液，提取或除去其他成分，沉淀ＡＰＳ。
这有利于ＡＰＳ提取液的分离和提纯等后处理，亦可获得较高的多糖收率。
有研究者将超滤膜技术应用于萃取液的后处理环节，进一步优化了ＡＰＳ的提取工艺。
超滤法较水溶醇沉法提取的多糖粗提物收率低，但多糖含量高。
李树珍等用超滤法提取ＡＰＳ，黄芪粉水煮后的上清液用中空纤维超滤，选用相对分子质量为６０００的超滤膜，截留下相对分子质量超过６０００的大分子，经２次醇沉后即得多糖的粗提物。
相对多糖含量超过７０％。
焦光联等用超滤法提取ＡＰＳ，以截留相对分子一质量为２００和１０的超滤膜对ＡＰＳ进行超滤分离，考察了压力、温度、流速和初始料液质量浓度等对超滤提取的影响，确定最佳超滤提取条件为初始料液质量浓度２０ｇ／Ｌ、压力０．３５ＭＰａ、温度３０℃和进料流速０．４６７Ｌ／ｓ。
此条件下滤液中多糖含量由３６．０％提高到８６．８％。
有效实现了ＡＰＳ提取液中活性多糖与大分子蛋白多酚等物质的分离。