三、过氧化物酶活性的测定
过氧化物酶通过催化酚类物质与H2O2反应生成醌类来清除植物体内的H2O2.过氧化物酶还与生长素、NADH、NADPH的氧化有关，在植物代谢中起着重要作用。

实验前思考
1、POD和CAT清除H2O2的反应有何不同
2、植物体内有哪些主要的过氧化物酶？
原理
愈创木酚（邻甲基苯酚）可作为过氧化物酶的底物，与H2O2反应生成茶褐色产物。

该物质在470nm处有最大吸收峰，故可以分光光度计测定过氧化物酶的活性。

材料、仪器与试剂
1、材料
马铃薯块茎或其他植物组织材料
2、仪器及用具
紫外分光光度计；离心机；研钵；5ml量筒；25ml容量瓶；微量进样器；秒表。

3、试剂
（1）50mmol·l-1ph值为5.5的磷酸缓冲液。

（2）50mmol·l-1愈创木酚溶液；称取6.207g愈创木酚，用少许酒精溶解，然后定容至1000ml。

（3）2% H2O2；取30% H2O267ml，加水至100ml。

方法与步骤
1、酶液的提取
取5.0g洗净去皮的马铃薯块茎，切碎至于研钵中，加适量的磷酸缓冲液研磨成匀浆，将匀浆全部转入离心管中，以3000g离心10min，上清液转入25ml容量瓶。

沉淀用5ml磷酸缓冲液再提取两次，上清液并入容量瓶，定容至25min，低温下保存备用。

2、过氧化物酶活性测定
酶活性测定的反应体系包括：2.9ml50 mmol·l-1磷酸缓冲溶液，1ml2%HO，1ml50mmol·l-1愈创木酚溶液和0.1ml酶液。

取2支试管分别加入上述各溶液，1支于沸水中5min作为对照，另1支于37℃水浴中保温15min。

反应结束后立即利用分光光度计检测其在470nm 波长下的吸光度，测定3～5min的吸光度变化。

结果与计算
以每分钟内的△A470变化0.01为1个过氧化物酶活性单位。

过氧化物酶活性（u·g-1·min-1）=△A470V÷0.01W t Vt
式中：△A470：反应时间内吸光度的变化；
W为材料鲜重（g）
V为酶提取液总量（ml）；
V t为反应系统中加入的酶液量（ml）；
t为反应时间（min）。

试验后思考题
1、在此实验中△A470反应时间如何掌握？
2、使用愈创木酚溶液时要注意什么？为什么？
母亲的眼神是那么的慈爱，自打儿女呱呱坠地起，那一抹温柔的眼眸，就有如一道无形的细线，系在儿女的身上，儿女走到哪里，母亲的牵挂就延伸到哪里。

冬天怕儿女冻着了，夏天怕儿女热着了；晴天怕儿女晒着了，雨天怕儿女淋着了……
担忧似乎就是母亲的专利，操心好像就是母亲的代名词。

俗话说得好“儿行千里母担忧”,若想让母亲不为儿女担忧，不为儿女操心，那似乎是毫不可能的事。

所以，母亲就习惯性地用她那无言的牵挂，默默地守护着自己的儿女，寸步不离。

无论什么时候，母亲都不会嫌弃自己的儿女，不会置自己的儿女于不顾。

母亲像蜡烛，燃烧自己，只为照亮儿女的人生路；母亲像雨伞，挡住狂风暴雨的吹打，只为给儿女一份温暖；母亲像孺子牛，用自己的血汗，哺育儿女茁壮成长。

母亲是山，总能包容儿女的过错；母亲是水，总能涤尽儿女心灵的污垢；母亲是树，总想为儿女洒下一片阴凉；母亲是路，总是尽力为儿女铺就一条阳光大道。

儿女的生日唯有母亲不会忘记，儿女打个喷嚏唯有母亲会在意，儿女的喜好唯有母亲能铭记在心，儿女的点点滴滴就是母亲的整个世界。

母亲的一辈子好像就是为儿女而生，为儿女而活。

一天天、一月月、一年年、一辈子，母亲不停歇地为儿女操劳，用她那无声的母爱，缔结母子情缘，生生不息。

母亲如和煦的春风，不仅孕育了我们，还用她的爱滋润着我们成长；母亲如坚实的路，默默无闻地为我们构建人生；母亲如奔腾不息的长江，用她的青春铸成绵绵不绝的爱来哺育我们；母亲如沉稳的高山，用她的血与肉来维护我们的幸福。

世界上任何的语言都无法来歌颂母爱的伟大，因为母爱的力量，总是在无形中，“大音希声，大象无形”.母爱，是一首不需歌颂，却静静流淌在每个人内心深处的不老赞歌。