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《生物技术制药》

《生物技术制药》复习
一、名词解释
1、人-鼠嵌合抗体:在基因水平上将鼠源单抗的H 和L链可变区基因分离出来,分别与人Ig的H 和L链的稳定区(C)基因连接成人-鼠嵌合抗体的H 和L链基因,再共转染骨髓瘤细胞,就能表达完整人-鼠嵌合抗体
2、生物技术制药:采用DNA重组技术或其它生物新技术研制的蛋白质或核酸类药物,从而达到预防,治疗和诊断疾病的一种新型生物制药技术。

3、亚单位疫苗:是指不含病原体核酸,选用能诱发宿主产生中和抗体的微生物蛋白(提取或合成细菌、病毒外壳的特殊蛋白结构)或表面抗原,即抗原决定簇制成的疫苗,这类疫苗不是完整的病毒,是病毒的一部分物质,故称亚单位疫苗。

4、蛋白质药物化学修饰:在分子水平上对蛋白质药物进行化学改造,通过对主链的切割、剪接及化学基团的引入,实现对蛋白质药物理化性质和生物活性的改变,属蛋白质改性范畴。

5、固定化酶:是将具有一定生理功能的酶或生物细胞,用物理或者化学方法将其固定,作为固体生物催化剂而加以利用的一种技术。

二、单项选择题
1、现代生物技术的标志是:A
A、DNA互补双螺旋结构模型的提出
B、DNA测序技术的诞生
C、第一只克隆羊“多莉”的诞生
D、人类基因组草图的完成
2、获得目的基因最常用的方法是:B
A、化学合成法
B、PCR技术
C、逆转录法
D、DNA探针技术
3、所谓“第二代基因工程”是指A
A、蛋白质工程
B、细胞工程
C、酶工程
D、抗体工程
4、酶和细胞固定化最常用、最有效的方法是:C
A、载体结合法
B、交联法
C、包埋法
D、选择性热变性法
5、真核基因在大肠杆菌中以融合蛋白形式表达,下列错误的是:D
A、基因操作简便
B、只能作抗原用
C、容易实现高效表达
D、易被细菌酶类水解
6、目前应用最广泛的产酶菌是:A
A、大肠杆菌
B、枯草杆菌
C、青霉菌
D、链霉菌
7、大肠杆菌的基因表达系统为A
A、pBV220/pET
B、YEp/YRp
C、pUC/λgt11
D、pBR322/λgt10
8、用于生产α-干扰素的动物细胞是A
A、Namalum
B、Vero
C、WI-38
D、MIRC-5
9、外源基因在动物细胞与大肠杆菌中表达产物的主要区别是A
A、糖基化
B、产量高
C、性质稳定
D、疗效可靠
10、基因表达最常用的宿主菌是A
A、大肠杆菌
B、枯草芽孢杆菌
C、链霉菌
D、酵母
11、筛选杂交瘤细胞(脾-瘤融合细胞)选用的培养基是B
A、HT
B、HAT
C、RMP1640
D、BME
12、采用凝胶过滤法分离单克隆抗体,最高峰属于B
A、IgG
B、IgM
C、IgA
D、IgE
13、改造鼠源性单克隆抗体的首要目的是C
A、降低相对分子量
B、增加组织通透性
C、降低免疫源性
D、延长半衰期
14、鼠源性单克隆抗体改造后得到小分子抗体,常用的是B
A、单域抗体
B、单链抗体
C、Fab片段抗体
D、最小识别单位
15、酶的主要来源是C
A、生物体中分离纯化
B、化学合成
C、微生物生产
D、动/植物细胞与组织培养
三、配对选择题
题 [ 1—4 ]
A、基因工程
B、细胞工程
C、酶工程
D、发酵工程
E、生化工程
1、生物技术的核心与关键是A
2、生物技术的基础是B
3、生物技术的条件是C
4、生物技术获得最终产物的手段是D
题 [ 5—8 ] 菌种选育方式与所得到的菌种类型
A、自然选育
B、定向培育
C、诱变育种
5、抗性菌株B
6、野生型菌株A
7、突变株C
8、营养缺陷型菌株C
四、多项选择题
1、提高基因表达产物稳定性的方法有ABCD
A、组建融合基因产生融合蛋白
B、利用大肠杆菌信号肽将产物转移到胞浆周质中
C、采用位点特异突变方法改变真核蛋白S-S位置
D、采用蛋白酶缺陷型大肠杆菌
E、优化基因工程菌培养条件
2、影响外源基因在大肠杆菌中表达效率的因素有ABCD
A、启动子的强弱
B、核糖体结合位点的有效性
C、SD序列和起始密码的距离
D、密码子的组成
E、外源基因的拷贝数量
3、蛋白质药物化学修饰后的主要特点是:ABCE
A、循环半衰期延长
B、免疫原性降低或消失
C、毒副作用降低
D、理化稳定性降低
E、生物稳定性增强
4、菌种的选育方式包括ABCDE
A、自然选育
B、诱变育种
C、杂交育种
D、原生质体融合
E、基因重组
5、基因载体导入动物细胞常用的方法有BC
A、细胞融合法
B、磷酸钙沉淀法
C、电穿孔法
D、显微注射法
E、重组逆转录病毒介导法
五、问答题
1、简述单克隆抗体的制备过程?
答:①抗原与动物免疫:制备特定抗原的单克隆抗体,首先要制备用于免疫的适当抗原,再用抗原进行动物免疫。

②细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养:细胞融合的方法可以采用聚乙二醇诱导融合,选择性的培养基为HAT培养液(次黄嘌呤(H)氨甲喋呤(A)胸腺嘧啶(T)
③刷选阳性克隆与克隆化:可以用免疫酶技术,免疫荧光技术,放射免疫技术等进行阳性克隆。

克隆化是指单个细胞通过无性繁殖而获得细胞集团的整个培养过程。

④杂交瘤细胞与抗体性状的鉴定(杂色体分析)
⑤单克隆抗体的大量制备:可以进行体外或体内培养得到大量的单克隆抗体。

⑥单克隆抗体的纯化
2、简述疫苗与抗体的关系?
答:当机体通过注射或口服等途径接种疫苗后,疫苗中的抗原分子就会发挥免疫原性作用,刺激机体产生高价特异性的免疫保护物质,如特异性抗体,免疫细胞及细胞因子等,党机体再次接触相同病原抗原时,机体的免疫系统便会依循其免疫记忆,迅速制造更多的保护物质
来阻断病原菌的入侵,从而使机体获得针对病原体特异性的免疫力,使其免疫受侵害而得到保护。

3、如何控制基因工程药物的质量?
答:基因工程药物的质量控制主要从蛋白质含量,纯度分析,蛋白质性质测定,生物学效价,杂质的分析等方面着手。

①蛋白质含量的测定②蛋白质纯度检测③蛋白质Mr测定④蛋白质等电点测定⑤蛋白质序列分析⑥内毒素分析,宿主蛋白与核酸残留分析
4、论述生物技术制药在人类健康中的作用?
答:生物技术制药在人类健康中的积极作用:
①疾病预防,诊断及治疗,生物制药改变了传统制药的原料,工艺和生产方式,制造出由特殊疗效的药物,帮助医学战胜了许多威胁人类健康和生命的顽症,如抗生素药物,其中主要的是基因工程蛋白质药物用于治疗癌症,艾滋病等病症以及用基因工程生产的重组疫苗治疗霍乱,痢疾等。

②利用新型的生物技术制造出的保健品,可以大大提高人类的身体健康素质以及平衡营养结构。

③生物技术药物在农业中(如易于降解的杀从剂)的应用可以改善人类生存的环境,对人类身体健康具有间接重要的作用。

生物技术制药对人类健康可能也存在一些不利的影响,生产某些药物的技术尚不成熟,药物在人体内的药理代谢过程不清楚,对人体存在潜在的危害。

5、蛋白质药物修饰的目的?
答:蛋白质的化学修饰是指在分子水平上对蛋白质药物进行化学改造,通过对主链的切割,剪接及化学基团的引入,实现对蛋白质药物物理化学性质和生物活性的改变,是其循环半衰期延长,免疫原性降低或消失,毒副作用减少,物理化学和生物稳定性增强等,可以扩大蛋白质药物的应用范围。

同时可以应用到一下几个方面:①蛋白质纯度鉴定与分析②蛋白质结构与作用机制研究③蛋白质的固定化④蛋白质改性
6、生物药物与生物技术药物的含义?
答:生物药物的含义是指运用微生物学,生物学,医学,化学,生物化学,生物技术,药学等科学的原理和方法,从生物体,生物组织,细胞,体液等制造的一类用于预防,治疗和诊断疾病的制品。

生物技术药物的含义是指采用DNA重组技术或其他生物技术生产的用于预防,治疗和诊断疾病的药物,主要是重组蛋白或核酸类药物,如细胞因子,纤溶酶原激活剂,血浆因子,生长因子,融合蛋白,疫苗,受体,单克隆抗体,反义核酸,小干扰RNA等。

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