一、外植体灭菌技术
二、不同组织培养基
1、种子培养
A方法
胚培养:MS+BA0.5mg/L+IAA1mg/L +蔗糖3%
小苗转移:MS+BA1mg/L+NAA0-0.01mg/L +蔗糖2%-3%
B方法
胚初代谢培养:MS+BA0.25mg/L+NAA 0.05mg/L +BR 0.00001mg/L 芽增殖培养基:MS+BA1.0mg/L+NAA 0.2mg/L +TDZ 0.001mg/L 生根培养基:1/2MS+IBA0.8-1.2mg/L
2、腋芽茎尖培养
A方法
1/2MS+BA0.5-1.0mg/L +GA30.1-0.5mg/L +KT0.2-1.0mg/L愈伤组织MS+BA0.2-2.0mg/L+GA3 0.2-0.5mg/L +TDZ 0.001mg/L芽生长
1/2MS+IBA0.1-2.0mg/L+蔗糖2%+0.5%的活性炭
B方法
MS+BA2.0mg/L+NAA 0.2mg/L +LH500mg/L+蔗糖5%
C方法
MS+BA1.5mg/L + KT0.5mg/L
D方法
1/2MS+BA1.0mg/L+GA3 0.5mg/L
3、芽培养
A方法
1/2MS+IBA1.0mg/L +IAA1.0mg/L +蔗糖20.0mg/L(根诱导)
WPM+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L +蔗糖40.0mg/L(根生长)
1/4MS+IBA3.0mg/L+IAA3.0mg/L +蔗糖30.0mg/L(增根数)
B方法
1/2MS+IBA1.0mg/L +IAA1.0mg/L +蔗糖20.0mg/L(根诱导)
WPM+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L +蔗糖40.0mg/L(根生长)
1/2MS+Ca2+(WPM)+IAA3.0mg/L(增根数)
4、叶及叶柄培养
A方法
1/2MS+2,4-D4mg/L + KT0.2mg/L+NAA0.4mg/L+酪蛋白200mg/L (愈伤诱导)WPM+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L +蔗糖40.0mg/L(根生长)
1/4MS+IBA3.0mg/L+IAA3.0mg/L +蔗糖30.0mg/L(增根数)
B方法
MS+BA15.0mg/L +NAA2.0mg/L(愈伤诱导)
WPM+IBA1.0mg/L+IAA1.0mg/L +蔗糖40.0mg/L(根生长)
1/2MS+Ca2+(WPM)+IAA3.0mg/L(增根数)
5、根培养
A方法
MS+2,4-D1mg/L(愈伤诱导)
MS+2,4-D1mg/L +TDZ5.0mg/L(29℃黑暗继代培养)
B方法
MS+NAA1.5mg/L(愈伤诱导)
MS+NAA1.5mg/L +TDZ5.0mg/L(继代培养)
三、组培进展
第一阶段:培养物的建立,选着适合的外植株
第二阶段:茎芽的增殖方法,诱导不定芽,实强腋芽生枝能力的方法第三阶段:立体植株的生根,生根培养基中培养
第四阶段:生根苗的移栽。