血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳
【目的】
➢ 掌握脂蛋白的分类及其代谢特点。 ➢ 掌握脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳检测的原理，熟
悉其方法 。
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【原理】
血清脂蛋白经饱和苏丹黑B预染后，以 琼脂糖凝胶为支持介质，在pH8.6巴比 妥缓冲液中电泳，根据各脂蛋白的组成、 大小、形状分离成不同区带。
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血清脂蛋白(lipoprotein)的组成
易外溢。 (5) 样品点于电泳槽负极。 (6) 吸取预染血清时，应吸取上层，下层或管底可能有
染料颗粒沉渣。
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临床应用：高脂蛋白血症的分型 CM β 前β
正常 Ⅰ型 Ⅱa型 Ⅱb型 Ⅲ型 Ⅳ型 Ⅴ型
α
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思考题
1. 影响电泳迁移率的因素有哪些？ 2.试述琼脂糖凝胶电泳分离脂蛋白的原理。
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血清预染
制胶 倒上缓冲 液，使其 恰好没过 点样孔。
点样
3
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血清预染
制胶 倒上缓冲 液，使其 恰好没过 点样孔。
点样
3
预染色的标本 （15μL）
小心！！！ 点样孔不要
戳破
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血清预染 制胶
点样
电泳
80－100V， 20－30min,
负极向正极
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操作注意事项：
(1) 制胶时，要注意梳子的低部要距制胶板1mm以上。 (2) 凝胶冷却时要水平放置，完全凝固后才能使用。 (3) 点样时要小心，不要戳穿点样孔。 (4) 点加样品时，要缓缓加入，不能太快，否则样品容
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分类 1. 按电泳法分
按其移动的快慢，可将脂蛋白依次分为：α-脂 蛋白、 前β-脂蛋白、β-脂蛋白，乳糜微粒在原点 不动。
乳糜微粒 β 前β α
+
血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳图谱
6
2. 按超速离心法分 乳糜微粒(CM) 极低密度脂蛋白 (VLDL) 低密度脂蛋白(LDL) 高密度脂蛋白(HDL)
颗 粒
CM
LDL VLDL HDL
—
+
加样槽
β
前β α
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【试剂与器材】
• 1.人血清（预染） • 2.微量加样器 • 3.电泳仪、电泳槽 • 4.琼脂糖 • 5.巴比妥缓冲液（pH8.6）
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【操作】
血清预染
制胶
适量琼
适量缓
Δ
脂糖
冲液
琼脂糖 胶溶液
11
1
2
40mL
去封口
+
胶布
–
3
4
点样孔 朝负极
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密 度
7
（三）结 构 特 征
CM
甘油三脂
多
胆固醇
多
蛋白质
少
带电量（Q）
少
pH8.6为例
颗粒大小（mm） 大
密度
低
电泳速度
慢
形态
VLDL LDL HDL (前β) (β） （α）
少 少 多 多
规则 不规则
小 高 快
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• pH 8.6 > pI ，各种脂蛋白均带负电，电泳时由 负极到正极；VLDL为圆形，受阻力小，LDL形态 不规则，受阻力大，所以VLDL跑在前。