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LC 参数(4) 泵事件
q
如果你想通过联系终端触发其它设备,或改变温度设 置,或将Wet Prime 作为一个编程事件来执行,则在此 处输入信息.
qNote:
Wet Prime只能在Inlet Prerun 或 Inlet Postrun 方法中作为一个编程事件来用(参见Sample List 项).
q有关电学和通讯的指标 KFour
contact closures K图表输出: 流速, 系统压力,流动相组成, 样品温度及柱温 K进样开始 KIEEE-488 接口: 通过 MassLynx 软件控制 KRS-232接口 K软盘驱动器: 传递和存档方法文件和可报告的GLP日志 K柱温控制: 20 (高于环境温度5oC)到60oC,增量为1oC
冲洗进样器
q
进行 injector purge的操作步骤如下 的操作步骤如下
K 输入需要冲洗的样品环体积的数值(从6起)
,按 OK。 。
q
purge 过程可能包括一个Compression check选项(压 缩检验)。其目的是检测样品环和注射器中是否有气泡和 渗漏以及核查密封件的完整性。若选中Compression check 选项,就将进行压缩试验。
q注意 注意:
q选择
Wet Prime, 然后按 OK键。
Wet prime(湿灌注)
q
进行 wet prime操作的步骤如下 操作的步骤如下 K 1. 轻轻振摇溶剂瓶中的过滤头以除去可能留存的气泡。 K 2.输入用于 prime的流速和持续时间(所用的溶剂组成是在 Status 屏幕中输入的), 然后按 OK。 溶剂管理系统开始 运行。Prime的持续时间取决于安装在2695上的选件。 选件 真空脱气机 氦气脱气 流速 (mL/min) 7.5 7.5 持续时间 (min) 6 2
Autosampler 参数(1) 自动进样器初始化条件
Sample Heater Temperature(样品室温度 样品室温度): 样品室温度 如果安装了此选项,可输入样品室所需的温度(加热或冷却) q Sample Heater Temperature Limit (样品室温度限 样品室温度限): 样品室温度限 这是一个允许样品室温度偏离的最大值.若超出此值,则会终止采样, MassLynx 屏幕上的LC 状态灯变成红色. q Injection Volume(进样体积 进样体积): 进样体积 q 此项输入进样体积(μl).假如是从样品表运行采样,则样品表中的进样体积会覆盖此处的设定值 . qNeedle Depth (针深度 针深度): 针深度 调整进样针的插入深度以适应有沉淀物的样品或非标准样品瓶.此值为零表示针将插 到瓶底. q Draw Speed(抽样速度 抽样速度): 抽样速度 此值决定针吸取样品的速率( uL/sec),可根据样品的粘度来确定. q Optional Sample Loop(定量环选件 定量环选件): 定量环选件 若需进样量大于100 uL,可安装另外一个定量环.若已安装了另外一个定量环,可选中此对话框 q Vial number(瓶号 瓶号): 瓶号 所要进样的瓶号. 假如你是由样品表运行采样,则样品表中的瓶号将取代此处的输入值 q Pre-column Volume(柱前体积 柱前体积): 柱前体积 控制相对于进样点的梯度前沿.系统将在开始梯度和抽提样品后,等流动相流过所设定的体积后 再进样.
溶剂管理系统
柱塞腔横截面示意图
出口 在柱塞腔内完成流动 相的混合, -First In, First Out(先进先出 先进先出) 先进先出
来自比例阀
柱塞杆速率图
222
2695主画面(Main） 2695主画面(Main） 主画面
2695状态画面(Status) 2695状态画面( 状态画面
K灌注洗针泵
按 Start 键. 启动 30秒洗针程序. 若30秒内没有溶液从 废液管中流出,再按 Start 键.
访问 Inlet编辑器
q
LC 编辑器常用于下列情况
K 观察系统的现时状况 K 编辑确定
LC, 自动进样器和 PDA 或 UV检测器方法
K 改变仪器配置
系统状态 (参见指示器)
位于此屏幕左边的 Running, Pump On and Injector Cycle 指示灯给你提 供LC系统现时状态的信息.如果LC系统出现错误时,则OK和Ready指示 灯变成红灯.此时你可以点击此红灯,则会得到有关造成故障的原因的进 一步信息.
1—4 K溶剂脱气: 真空脱气或氦气脱气 K流速范围: 0.000 和 0.010 到 10.000 mL/min,增量为 0.001 mL/min K典型流速: 0.050 到5.000 mL/min ,增量 0.001 mL/min K柱塞杆密封垫清洗 K梯度方案: 包括线性,台阶,凹线和凸线共11条曲线方式 K流速坡度: 0.01 到30.00 min, 增量0.01 min K最大工作压力: 5000 psi (345 bar) K溶剂配比范围: 0.0 到 100.0%, 增量为0.1%
q
注意: 注意 对于dry prime,切不可输入流速值,仪器会自动缓慢地将流速升 至预设值。 注意: 梯度比例阀和脱气机 注意 当溶剂正在流动时,这是检验梯度比例阀 脱气机 梯度比例阀 脱气机的流路连接 是否漏液的好时机。
Wet prime(湿灌注)
qWet
prime(湿灌注 ： 湿灌注)： 湿灌注 在做完干灌注之后进行.这对于除去在真空脱气机腔 内或氦气喷射管中产生的气泡极为重要。 当你更换溶剂 瓶或流动相时,也必须要做 湿灌注。 wet prime将流路改为从溶剂瓶到V1阀,然后通向废 液瓶。 为了避免损害柱塞杆密封垫, wet prime只能在溶 只能在溶 剂管理系统的流路通道中已充有溶剂的情况下进 行。
正常阀的配置Purge 来自1Purge #2Purge #3 -压缩过程
主屏幕(按 Diag 键)
诊断屏幕 (按 Prime SealWsh 键)
诊断屏幕
q密封垫清洗剂起润滑柱塞杆作用,并冲洗掉由柱塞腔高压侧带过来的流动
相或缓冲盐沉淀. 这一循环清洗步骤将延长密封垫的寿命.对于反相 HPLC 应用来说, 采用水作为密封垫清洗液,加入一定量的有机溶剂以抑 制细菌生长. 例如, 用 80:20 水:甲醇 或 80:20 水:乙腈, 取决于你的应用. 将密封垫清洗溶液瓶放在可见的位置,需要时可随时补充清洗液.
Waters 2695分离单元
概述
q
硬件描述
K 2695的特点 K 进入并运行直接功能
q
MassLynx 控制
Waters 2695 分离单元
溶剂瓶盘 检测器接液盘
前面板显示屏 和键盘 软盘驱动器
注射器箱门 柱温箱
样品室门 溶剂输送单元 进入门
溶剂配比单元 进入门
q溶剂管理系统指标 K溶剂数目:
q
q
LC 参数(2) 柱温和压力
q
Column Heater Temperature(柱温箱温度 柱温箱温度): 柱温箱温度 若要使用柱温箱,则输入温度值. Column Heater Temperature Limit (柱温箱温度限 柱温箱温度限): 柱温箱温度限 此值是柱温偏差的最大允许值.若在采样期间超过此值, 则会停止采样,且MassLynx屏幕上的LC状态指示灯会 变成红色.假若不使用柱温箱,则须输入一个接近环境温 度的温度值,并输入一个较大的温度限.此点务必得到保 证才不至于由于温度错误而终止采样. Low Pressure and High Pressure limits(压力限): 若压力超出此限定值,则采样会停止,且MassLynx屏幕 上的LC状态指示灯会变成红色
q
q
到达指定时间后流速停止,2695回到 Idle 状态。
冲洗进样器
qPurge(冲洗 冲洗) 冲洗
进样器是为了
K1.除去前一次运行残留的流动相； K2.清除来自流路或注射器的气泡； K3.在做完wet q选择
prime 后,改变到一个新的可混溶的溶剂。
Purge Injector, 然后按 OK。
q
q
LC 参数(3) 泵梯度
qNote:若要等度洗脱,梯度表必须是空的. q对每一行,输入时间,溶剂组成,流速和梯度曲线各项.
注意:第一行的时间必须是零. 注意 q左击 add/insert 按钮以增加梯度表的行数 q重复上述操作直至完成梯度表.
qGradient
curves(梯度曲线 梯度曲线) 梯度曲线 K 曲线 6 是线性梯度. K曲线2 - 5 是凸线. K曲线7 - 10 是凹线. K曲线1 是立即达到设定的条件 K曲线11 是维持起始条件直至下一步梯度
由 Diagnostics屏幕, 按 Prime NdlWsh键.得此屏
q洗针泵将进样针放在样品管理系统的清洗位置,防止带
出样品.洗针可除去进样针上沾污的缓冲盐流动相和样品, 从而延长进样器密封垫的寿命. 一些推荐使用的 洗针溶剂 开列如下. 高浓度的样品可能需要另外的针洗剂.将洗针溶 液瓶放在可见的位置,需要时可随时补充清洗液. q 色谱条件 洗针液 水溶性缓冲盐, 反相 90:10水:甲醇 非水反相 100% 甲醇 正相 流动相
q样品管理系统指标 K样品瓶数目:
120, 分装于5个样品盘(24瓶/盘) K进样次数: 每瓶可进1 到99次 K标准样品瓶: 2 mL K样品温控: 4 到40oC ,增量 1oC K进样体积: 标准配置:0.1 到100 uL 定量环选件:0.1到2000 uL K最小样品量: 10 uL, 用低体积的内插式小瓶
LC 参数(1) 溶剂和流速
q
Solvent Percentages(溶剂百分数 溶剂百分数): 溶剂百分数 指定用于等度洗脱的溶剂百分比. 泵 A不必填写,它总是 等于100%减去其它各溶剂百分数的差 Run Time(运行时间 分钟 运行时间,分钟 运行时间 分钟): 此参数表明从进样开始所要运行的时间.此参数必须设定 Flow Ramp(流速坡度 流速坡度): 流速坡度 此参数(分钟)表示溶剂输送系统到达其最大流速的时间. 例如,对于2695系统的最大流速是10 mL/min.则flow ramp 设为2分钟的含义为:流速将以5 mL/min/min 的速 率于2分钟内达到10 mL/min.这一限制流速变化的参数 将保护色谱柱免受压力突然变化带来的潜在危险.这一 参数在梯度情况下将不起作用.