（二）紫外线与射线灭菌法
{紫外线：紫外线的杀菌作用与其波长有关，通常紫外线 波长为240～280nm时具有杀菌作用，其中 以260nm最 强，这与细菌DNA吸收光谱范围相一致。紫外线杀菌机 理主要是作用于细菌DNA，干扰细菌DNA的复制与 转录， 导致细菌的死亡或变异。紫外线穿透力差，故只适用于空 气及不耐热物品的表面消毒。 {电离辐射：高速电子、X 射线和γ射线等在足够剂量时， 对各种细菌均有致死作用。其机制在于产生游离基，破坏 细菌DNA。电离辐射常用于大量一次性医用塑料制品的 消毒。
条件致病菌致病的特定条件
①机体免疫机能低下：如大面积烧伤，过度疲劳，受 凉，长期患消耗性疾病。
②正常菌群寄居部位发生变迁：如外伤，手术，留置 导尿管等使大肠杆菌进入腹腔、泌尿道或血液等。
③不适当的抗菌素药物治疗导致菌群失调：如长期或 滥用抗菌素治疗。
菌群失调及菌群失调症
菌群失调：指机体、菌群、环境三者之间的动态平衡发
第二节 消毒灭菌
{ 消毒（disinfection）：杀死物体上病原微生物的方法，
但不一定杀死细菌芽胞。 { 灭菌（sterilization）：杀死物体上包括芽胞在内的所 有病原性和非病原性微生物的方法。 { 防腐（antisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖的方法， 细菌一般不死亡。 { 无菌（asepsis）：不含活菌的意思。防止微生物进入机 体或物体的操作方法，称为无菌操作或无菌技术。进行微生 物实验、外科手术及医疗技术操作等过程，均需进行严格的 无菌操作。
三、细菌生长繁殖的规律
（一）细菌个体的生长繁殖 Ø 方式：无性二分裂 Ø 速度：20～30分钟/代
（二）细菌群体的生长繁殖
细 菌 数 目 的 对 数
小时
细菌生长曲线
细菌生长曲线特点
Ø迟缓期(lag phase)
最初培养1-4小时，菌体不分裂，但菌体增大、代谢活跃
Ø对数期(logarithmic phase)
染等具有重要意义。
抹布和砧板上的 细菌模式图
针头上的细菌模式图
第一节 细菌的分布
一、细菌在自然界中的分布
1.土壤中的细菌
Ø 土壤是细菌生存的天然场所（因为土壤中有水分、营养物 质、空气、一定的PH环境和温度）。
Ø 自然界中，以土壤的含菌量（种类）最多，土壤素有“天 然培养基”之称。
Ø 土壤中的细菌多数为非病原菌，它们在自然界的物质循环 中起着重要的作用，是动植物与人类生存的必要条件之一。
（三）滤过除菌
Ø滤过除菌：用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌 除去，以达到无菌的目的。所用的器具是滤菌器。
Ø主要用于一些不耐高温灭菌的血清、细菌毒素、抗生 素，以及空气等的除菌。 Ø滤菌器的种类很多，目前常用的有滤膜滤菌器、石棉 滤菌器（亦称Seitz滤菌 器）、玻璃滤菌器等。
刘潇
学习目标
掌握正常菌群、条件致病菌及菌群失 调、消毒、灭菌、无菌操作的概念；
掌握常见的消毒、灭菌、无菌操作的 方法；
了解细菌的分布及防护原则。
前言
细菌种类多， 繁殖快，适应环境 的能力强，是自然 界中分布最广泛的
一群微小生物。
了解细菌的分 布对医学生加强无 菌观念，严格无菌 操作，预防医院感
第二节 细菌的人工培养
一、培养基(culture medium)
人工配制适合于细菌
“ 灭
生长繁殖的营养基质 菌
”
按照物理状态分类：
液体培养基 2-3%琼脂 固体培养基
0.3-0. 5%琼脂
半固体培养基
二、细菌在培养基中的生长现象
（一）细菌在液体培养基中的生长现象（重点）
沉 淀 生 长
混 浊 生 长
土壤中的病原菌从哪里来？
Ø 土壤中仅有少数病原菌，它们来自人和动物体（粪、 尿、痰、尸体等），多数病菌在土壤中很能容易死亡。
➢ 使人致病的主要为球菌和芽胞杆菌，如炭疽杆菌、 破伤风杆菌、气性坏疽可长期存活。所以，当人体创 伤处污染泥土时，要严防破伤风和气性坏疽感染。
一、细菌在自然界中的分布
2.水中的细菌
第一节 细菌的生长繁殖
一、细菌的化学组成
水：占细胞总重量80%
固体成分： 蛋白质、糖类、脂类、无机盐等； 15-
20%
特有成分： 肽聚糖、胞壁酸、磷壁酸、D型氨基酸、脂多糖
二氨基庚二酸、吡啶二羧酸、2-酮基-3-脱氧辛酸
二、细菌生长繁殖的条件
（一）营养物质
Ø 水:参与营养的吸收与代谢。
Ø 碳源: co2、碳酸盐、糖、脂肪
你知道吗？
Ø 常见的病原菌如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、链 球菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌及脑膜炎奈瑟菌等， 可引起伤口或呼吸道感染。空气中的非致病菌，常可造成 生物制品、药物制剂及培养基的污染。 Ø 因此，医院的手术室、病房、制剂室、实验室等要经 常进行空气消毒，并严格按照有关制度和无菌技术进行医 疗操作，以防止疾病的传播及医院感染。
标本
增菌培养
分离培养
诊断
染色 显微镜观察 初步诊断
纯培养 生化鉴定
确定诊断
标本
治疗
最敏感药物
青
链
庆
红
培养 药浸纸片
青
链
庆
红
2. 细菌的鉴定与研究 例如：嗜肺军团菌
3. 生物制品的制备
结核杆菌 接种 （有毒）
培养基
13年230代
（胆汁、甘油、马铃薯）
卡介苗 （BCG）
第十章 细菌的分布与消毒灭菌
{煮沸法：水温100℃经5分钟可杀死细菌繁殖体，常用 于食具、刀剪、注射器等的消毒，细菌芽胞需煮沸1～ 2小时才被杀灭。水中加入2%碳酸氢钠，可使沸点达 105℃，既可促进杀灭芽胞，又能防止金属器械生锈。
（一）热力灭菌法
1、湿热灭菌法
{流通蒸气法：利用蒸笼或阿诺蒸锅进行消毒。流通蒸 汽法温度不超过100℃，经15～30分钟可杀死细菌繁殖 体；把流通蒸汽加热的物品放置37℃温箱过夜，促使 芽胞发育成繁殖体，次日再经流通蒸汽加热，如此重复 3次，可达到灭菌的目的，称为间歇灭菌法，常用于不 耐高温的材料如培养基的灭菌。 {巴氏消毒法：用较低温度杀灭液体中病原菌或特定微 生物，而不影响其营养成分及香味的消毒法，常用于牛 奶、酒类的消毒。
二、人体正常菌群及分布
（一）正常菌群
正常人体的体表以及与外界相通的腔道 （如口腔、鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道等黏膜） 表面存在着一定数量和不同种类的细菌，这些 通常对人体无害甚至有益的细菌，称为正常菌 群（normal flora）。
正常菌群的生理意义
➢ 生物拮抗作用：即对病原菌的拮抗作用，如大
肠菌素可抑制痢疾杆菌生长；唾液链球菌产生的H2O2 抑制脑膜炎球菌生长。
第九章 细菌的生长繁殖与培养
刘潇
学习目标
l 掌握细菌生长繁殖的条件、繁殖方式及速度； l 熟悉细菌在培养基中的生长现象及意义； l 熟悉细菌的代谢产物及意义。
2020/4/27
前言
细菌是一大类具有独立生命活动的单细胞微生 物，能从外界环境中摄取营养物质，合成自身 细胞成分并获得能量，同时不断排出废物，完 成新陈代谢，得以生长繁殖。细菌的生长繁殖 与环境条件密切相关，条件适宜时，细菌的生 长繁殖及代谢旺盛，改变条件时可使细菌生命 活动受到抑制或使细菌死亡。
菌 膜 生 长
（大多数）
（链状菌）
（专性需氧菌）
（二）细菌在固体培养基中的生长现象
菌落(colony)：细菌在固体培养基上出现由单个细菌 生长繁殖形成的肉眼可见的细菌集团
意义：鉴别细菌、分离细菌 菌苔(mossy)：多个菌落融合形成的细菌集团
三、人工培养细菌的实际意义
1. 感染性疾病的诊断和防治
➢ 营养作用：大肠杆菌及乳链球菌能合成VitB1、
B12、泛酸、叶酸及VitC、K等，供机体利用；双岐杆 菌产酸造成酸性环境可促进对VitD、Ca、Fe的吸收。
➢ 免疫作用：微生物具有免疫原性、促分裂和佐剂
的作用，可剌激机体免疫系统发育和成熟。
二、人体正常菌群及分布
（二）条件致病菌
正常菌群与人体间的平衡状态，在某种特 定条件下被打破，使原来不致病的正常菌群也 能引起疾病，这些能引起疾病的微生物称为条 件致病菌或机会致病菌。
（一）根据细菌具有不同的酶， 对糖、蛋白质分 解能力及分解后产生的产物不同用生化方法来鉴 定细菌
称：细菌的生化反应
甲基红试验（methyl red test，MR）
甲基红试 验阴性
机理：
产气杆菌
甲基红指示 剂呈桔黄色
葡萄糖 乳糖
Байду номын сангаас
丙酮酸 脱羧 中性产物 丙酮酸
PH＞5.4 PH＜4.5
大肠杆菌
甲基红指示 剂呈红色
一、物理消毒灭菌法（重点）
（一）热力灭菌法
热力灭菌法分干热灭菌和湿热灭菌两大类。在同 一温度下， 后者效力比前者为大，这是因为：
（1）湿热的穿透力比干热大； （2）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固； （3）湿热的蒸汽有潜热存在。水由气态变为液态时 释放出的潜热，可迅速提高被灭菌物体的温度。
（一）热力灭菌法
Ø土壤、空气、动植物尸体、人和动物的排泻物、工 业及生活污水。 Ø 通过水体传播的病原微生物主要有沙门氏菌属、 志贺氏菌属、霍乱弧菌等。可引起消化系统传染病， 甚至爆发流行。 Ø因此，做好水的卫生学检查对预防疾病至关重要。
一、细菌在自然界中的分布
3.空气中的细菌
Ø空气中缺乏营养物质与水分，且受日光照射，细菌 不易繁殖。 但由于人群和各种动物的呼吸道及口腔中 的细菌可随唾液、飞沫散布到空气中，极易造成疾病 的传播。 Ø细菌可随尘埃漂浮在空气中，尤其在人口密集的公 共场所或医院，空气中细菌种类和数量显著增多。
生改变，导至体内正常菌群中各种细菌的数量和比例发生 大幅度的变化，生态体系表现出的不平衡状态。