推翻与验证
（2）细菌细胞没有接合，只是交换DNA，可能是转 化的结果。 将含A菌株的培养液灭菌， 加入含B菌株的培养液中培养， 结果没有发现原养型菌落， 说明原实验并非转化的结果，推翻假设（2）。
假设与猜测
（1）亲本发生回复突变。×
（2）细菌细胞没有接合，只是交换DNA，可能 是转化的结果。× （3）混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互 相补充，即交换养料得以在基本培养基中生长。 （4）细菌接合后发生基因重组。
概率为10-14；B菌株需要三个基因同时发生回复
突变，概率为10-21。
与实际的原养型菌株出现概率10-7不符，推翻
假设（1）。
假设与猜测
（1）亲本发生回复突变。×
。 （3）混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互 相补充，即交换养料得以在基本培养基中生长。 （4）细菌接合后发生基因重组。
F因子的整合和环出
Lfr菌株：F因子转移的频率很高，但细菌DNA间的
重组率很低，故称F+为低频重组菌株
（Lfr菌株）。
Hfr菌株：F因子整合到宿主染色体上并与宿主染色
体同步复制，该菌株就成为高频重组菌株
（Hfr菌株）。
F’因子：F因子从Hfr菌株的染色体中不规则分离后
形成的带有插入细菌基因的环状F因子。
遗传物质的单方向转移
(Hages, 1952)通过实验证明：
结合过程中，遗传物质的转移是单向的（异宗配合）， A菌株
遗传物质
B菌株，从供体（即雄性） 到受体（即雌性）。
研究发现决定细菌性别的是致育因子——F因子。
F+菌株：细胞质中具有F因子的细菌，作为供体（雄性）， 提供遗传物质。 F-菌株：细胞质中没有F因子的细菌，作为受体（雌性） ，
细菌的遗传重组
-----细菌的接合
接合（conjugation）
细菌通过性菌毛相互连接沟通，将遗传物质（主要是
质粒DNA）从供体菌转移给受体菌的过程。
接合现象的证据

1946 J. Lederberg和E. L. Tatum
不同营养缺陷型的E. coli：
A菌株：
Met- bio- thr+ leu+ thi+ 甲硫氨酸、生物素缺陷
接受遗传物质。
大肠杆菌 DNA
F+ F-
F因子
F因子的特征
环状双链 DNA质粒，约为大肠杆菌染色体的 2％。 是细菌的一种附加因子，它的存在使宿主具有供体 的能力。它由原点、致育基因、配对区三个部分组
成。
F因子各部位功能
原点：是转移的起点和2个复制起点。 配对区：此处与大肠杆菌DNA多处核苷酸序列相对应（即同源 序列），故可通过交换而使F因子整合到大肠杆菌DNA上。 致育基因：其上一些基因编码生成F纤毛的蛋白质，即F+细胞 （雄性）表面的管状结构，F纤毛与F-细胞（雌性）表面的受 体相结合，在两个细胞间形成细胞质桥。
推翻与验证
压或吸
（3）混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互相补充， 即交换养料 得以在基本培养基中生长。 任何一臂的培养基上
均未长出原养型细菌。 推翻假设（3）；
证实：直接接触(接合)
是原养型细胞出现的
必要条件。
假设与猜测
（1）亲本发生回复突变。×
（2）细菌细胞没有接合，只是交换DNA，可能是 转化的结果。× （3）混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互相 补充，即交换养料得以在基本培养基中生长。× （4）细菌接合后发生基因重组。√
B菌株：
Met+ bio+ thr- leu- thi苏氨酸、亮氨酸、硫胺素缺陷

A、B菌株分别接种基本培养基
中，均不能生长。

A、B菌株混合于完全培养基中
培养几小时，离心除去培养基，再
涂布于基本培养基中，出现原养型 菌株（Met- bio- thr+ leu+ thi+ ）， 且概率为10-7 。
F- 、F＋ 、F’ 和Hfr的关系
假设与猜测
（1）亲本发生回复突变。
（2）细菌细胞没有接合，只是交换DNA，可能
是转化的结果。
（3）混合后通过培养基A、B某些代谢产物的互
相补充，即交换养料得以在基本培养基中生长。
（4）细菌接合后发生基因重组。
推翻与验证
（1）亲本发生回复突变。
选用细菌为多重营养缺陷型，A菌株要回复
突变为原养型，必须两个基因同时发生回复突变，