第一章总则1.1目的根据GB 18279-2000(《医疗器械环氧乙烷灭菌确认和常规控制》)的要求，对环氧乙烷灭菌器及灭菌工艺进行有效性确认(验证)，以保证满足一次性医疗器械无菌的要求。
1.2 范围本验证方案仅适用于环氧乙烷灭菌器及灭菌工艺的验证(确认)。
1.3 验证1.3.1 验证(确认)方案：验证(确认)方案制定后，经管理者代表确认后，方可实施。
1.3.2 验证(确认)实施：由职能部门的人员（人员资质见附件1）组成验证(确认)小组，并负责按照验证(确认)方案组织实施环氧乙烷灭菌器及灭菌工艺的验证(确认)；供方可派技术人员提供协助。
1.3.3 验证(确认)结论：应由双方人员共同对验证(确认)的过程和所取得的数据进行确认，形成验证结论并会签。
1.3.4 验证(确认)资料：所有有关验证(确认)的资料、所取得的数据、表单和验证(确认)报告应妥善保管、存档。
1.4 再验证(确认)1.4.1 再验证(确认)的条件当发生以下情况时，应进行再验证(确认)：(1)当引入新产品或产品的结构、材料发生变化时；(2)当产品的包装型式、包装材料发生变化时；(3)当灭菌室内负载的装载方式发生变化时；(4)当灭菌工艺发生变化时；(5)灭菌器大修后或连续出现灭菌质量事故(灭菌不合格)时；(6)正常情况下，应至少每年进行一次再验证(确认)；1.4.2 再验证(确认)的组织实施1.4.2.1 再验证(确认)申请当需要进行再验证(确认)时，由生产部提出申请，报请管理者代表批准。
1.4.2.2 再验证(确认)方案的制定管理者代表批准再验证(确认)申请后，应指定技术部制定再验证(确认)方案，经管理者代表确认后方可组织实施。
1.4.2.3再验证(确认)的组织实施由生产部、技术部、质管部、灭菌间等相关部门的人员组成验证(确认)小组，按照再验证(确认)方案组织实施验证。
1.4.3 再验证(确认)结论的确认验证(确认)小组负责对验证(确认)的过程和所取得的数据进行确认、形成验证(确认)结论并会签。
1.4.4 再验证(确认)资料所有有关再验证(确认)的资料、所取得的数据、表单和再验证报告应妥善保管、存档。
1.5验证(确认)项目：1.5.1以时间为变量，以加药量和温度为定量进行验证(确认)。
在加药量和温度不变的情况下，改变灭菌时间，进行逐步验证(确认)，直至找出最短灭菌时间（半周期法）。
第二章验证方案验证是由交付试验和性能确认两部分组成，其关系如下：2.1 试运行确认启动运行设备的各个辅助部件，确认其运行的有效性。
2.2 物理性能确认2.2.1 真空速率试验要求：预真空至-15Kpa的时间≤6min预真空至-50Kpa的时间≤30min条件：温度——恒定2.2.2 真空泄漏试验要求：预真空——-50Kpa泄漏速率——≤0.1Kpa/min条件：温度——恒定时间——60min2.2.3 正压泄漏试验要求：正压——+50Kpa泄漏速率——≤0.1Kpa/min条件：温度——恒定时间——60min2.2.4 加湿试验要求：湿度明显变化并在30~85%RH范围内条件：湿度——恒定预真空——-25~-50Kpa注意：加湿用水应使用蒸馏水、注射用水或去离子水，并提供相应的质量报告（质量报告见附件2），以保证使其不成为微生物污染源。
2.2.5 灭菌室空载箱壁温度均匀性试验要求：控制温度℃，最大温度±3℃条件：压力——常压8只留点温度计分布见附图2.2.6 灭菌室空载空间温度均匀性试验要求：控制温度℃，最大温度±3℃，并确定次序点位置。
条件：压力——常压10只留点温度计分布见附图2.2.7 满载温度均匀性试验控制温度℃，最大温度±10℃条件：压力——常压负载箱，负载分布见附图10只留点温度计分布见附图2.3 微生物性能确认(半周期法)要求：(1)通过半周期法，在保持其它灭菌工艺不变的条件下，将灭菌作用时间进行变化，并将不同灭菌作用时间的3M灭菌指示剂［枯草芽胞杆菌ATCC9372（质量报告见附件3）］。
在无菌环境下进行培养，检测试验微生物生长，找出细菌全部杀灭的时间临界值(最短有效灭菌时间)。
(2)应至少重复进行二次该时间临界值的有效性确认。
条件：(1)灭菌工艺灭菌温度℃保温时间分钟预真空Kpa保压时间分钟湿度——30~85%RH加药量g/L( Kg/ m3)灭菌时间；；；；分钟换气真空度Kpa通风时间分钟(2)试验微生物菌种：3M 灭菌指示剂枯草芽胞杆菌ATCC9372数量：10片位置：见附图(5×2)，菌片置于与产品相同的小包装内。
(3)负载负载箱，包/箱，支/包，负载分布见附图。
注意：如负载数量或分布模式发生改变，应进行再验证。
第三章验证实施3.1 验证(确认)小组经管理者代表批准，验证(确认)小组由以下成员组成；组长：；成员：；成员：；成员：；成员：；成员：；3.2 验证(确认)实施前的准备3.2.1设备3.2.1.1灭菌器安装应便于操作，安全措施应落实。
3.2.1.2各管道、阀门及密封件应安装可靠，无泄漏。
3.2.1.3电气装置应可靠接地。
3.2.1.4各记录装置应能够正常工作。
3.2.2 产品、包装及其他3.2.2.1初始污染菌应确定被灭菌产品从净化车间移出至进入灭菌器进行灭菌的最长滞留时间，并提供其初始污染菌化验报告（质量报告见附件4）；3.2.2.2产品应确定初灭菌产品经环氧乙烷灭菌后其物理、化学性能未发生变化，并提供检验报告（质量报告见附件5）；3.2.2.3包装应能证明被灭菌产品的包装是适合于环氧乙烷灭菌的(主要指包装的材料、厚度等既能够保证环氧乙烷气体的穿透、使被灭菌产品达到有效灭菌，又能够保证其经环氧乙烷灭菌后其物理、化学性能未发生变化)，并提供检验报告（质量报告见附件6）；3.2.2.4环氧乙烷应提供环氧乙烷气体成分的检验报告及供应商资料（见附件7）；3.2.2.5环氧乙烷灭菌生物指示剂应提供环氧乙烷灭菌生物指示剂的供应商资料（见附件8）；3.2.2.6加湿用蒸汽加湿用水使用注射用水，并提供相应的质量报告，以保证使其不成为微生物污染源（质量报告见附件9）。
3.3 验证(确认)实施验证(确认)的实施由验证小组按确定的验证(确认)方案进行，并做记录，对验证(确认)所取得的数据进行分析、处理，形成验证(确认)报告、存档。
第四章验证结论根据GB18279-2000(《医疗器械环氧乙烷灭菌确认和常规控制》)，验证(确认)小组对本套10m3环氧乙烷灭菌器按第二章所述的验证方案进行验证(确认)，现将验证(确认)结果(数据附后)证明如下：一、试运行确认经试运行，灭菌器各个辅助部件(真空系统、循环系统、加热系统、压缩空气系统、电器控制系统)均能够有效、可靠运行。
二、物理性能确认物理性能确认包括真空速率试验、真空(负压)泄漏试验、正压泄漏试验、加湿试验、箱壁温度均匀性试验、空载温度均匀性试验和满载温度均匀性试验，试验结果表明：本套设备真空度达到-15Kpa、-50 Kpa的时间为min 和min，符合说明书中规定的≤6min和≤30min的真空速率要求（见附件10）。
真空(负压)泄漏试验系在-50Kpa条件下，保压60min时间内，灭菌器内压力变化最大值为Kpa，符合泄漏速率0.1Kpa/min的要求（见附件11）。
正压泄漏试验系在+50Kpa条件下，保压60min时间内，灭菌器内压力变化最大值为Kpa，符合泄漏速率≤0.1Kpa/min 的要求（见附件12）。
加湿系统验证系在一定的真空度条件下，经加湿系统的加湿作用过程，灭菌器内的湿度产生明显的变化，证明加湿系统的工作是有效的。
在实际验证过程中，灭菌器内的初始湿度为%RH，当加湿装置内蒸气压力达到Mpa时，开始加湿，蒸气压力降到Mpa时停止加湿，经min均衡后，湿度达到%RH稳定，达到加湿作用，加湿有效（见附件13）。
根据GB18279-2000(《医疗器械环氧乙烷灭菌确认和常规控制》)标准，在进行温度均匀性试验时，采用均匀分布的10支留点温度计测量灭菌器内箱壁、空间和载体内部的温度分布，试验结果表明：箱壁温度均匀性测试——在控制温度为℃时，灭菌器内部8支留点温度计记录的最高温度为℃，最低温度为℃，符合最大温差±3℃的要求；（见附件14）。
空载温度均匀性测试——在控制温度为℃时，灭菌器内部10支留点温度计记录的最高温度为℃，最低温度为℃，符合最大温差±3℃的要求, （见附件15）。
满载温度均匀性测试—在控制温度为℃，灭菌室中负载内部10支留点温度计记录的最高温度为℃，最低温度为℃，最大温差为℃，符合最大温差≤10℃的要求,（见附件16）。
二、微生物性能确认微生物性能确认，系对环氧乙烷灭菌设备在灭菌周期中的灭菌工艺及灭菌过程的有效性进行确认。
根据GB18279-2000(《医疗器械环氧乙烷灭菌确认和常规控制》)标准，在进行微生物性能确认时，采用对环氧乙烷具有较强耐药性的3M灭菌指示剂枯草芽胞杆菌（ATCC9372）作为灭菌指示剂，其原始微生物含量为1.9×106cfu；在预热阶段开始前，按均匀分布原则，将15片灭菌指示剂安放在灭菌负载中，其分布方式如第二章图二所示。
根据灭菌负载的产品构造、包装形式及其在灭菌器内的分布方式，确定微生物性能确认时的相关灭菌工艺如下：灭菌温度℃保温时间分钟预真空Kpa保压时间分钟湿度——30~85%RH加药量g/L( Kg/ m3)灭菌时间；；；；分钟换气真空度Kpa换气次数——至少3次通风时间分钟为证明灭菌过程的有效性，采用半周期法，在保持上述灭菌工艺不变的条件下，将灭菌作用时间进行变化，并将不同灭菌作用时间的灭菌指示剂在无菌环境下进行培养，按培养后灭菌指示剂有无细菌生长的结果作为对灭菌过程及灭菌工艺有效性的评判。
详细数据如表一所示：从以上表一的结果可以说明：在上述灭菌工艺参数下，在灭菌负载的产品构造、包装形式及负载分布形式保持不变的条件下，灭菌过程是有效的；灭菌作用的临界时间(最短有效灭菌时间)为min。
综上所述，经过对本套6m3环氧乙烷灭菌器进行交付试验和性能确认后，全套设备的验证结果和验证过程符合GB18279-2000(《医疗器械环氧乙烷灭菌确认和常规控制》)标准。
另：采用表一微生物性能确认取得的数据，按照半时循环法，由此推荐灭菌作用时间为min，以确保灭菌有效性。
实施环氧乙烷灭菌器验证申请环氧乙烷灭菌器验证电器控制系统的运行验证记录验证人：日期：灭菌器辅助设备的运行验证记录表验证人：日期：灭菌器真空速率验证记录验证人：日期：灭菌器正压泄漏速率验证记录验证人：日期：灭菌器真空泄漏速率验证记录验证人：日期：灭菌器加湿系统验证记录验证人：日期：灭菌室箱壁的温度均匀性验证记录验证人：日期：灭菌室空间的温度均匀性验证记录验证人：日期：灭菌室负载的温度均匀性验证记录验证人：日期：生物指示物长菌时间记录记录人：日期：初始灭菌工艺制表人：日期：确认有效的灭菌工艺制表人：日期：灭菌室箱壁温度均匀性验证留点温度计布点图灭菌室空间温度均匀性验证留点温度计布点图灭菌室负载温度均匀性验证留点温度计布点图有限公司YZ 2012-002环氧乙烷灭菌器验证资料微生物性能验证生物指示物布点图及灭菌负载装载模式图第31 页共31 页31。