湛江安度斯生物有限公司 2009年3月
BET干扰的普遍性
一项对人用药品与鲎试验相容性的研究证实了干扰 的影响范围，在所研究的品种中仅30%的药品可以 不经任何处理直接进行BET；有97%的干扰问题可 以通过稀释供试品的方法去消除。
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解决方法
湛江安度斯公司的TAL可以抵抗一般水平的β-葡聚糖干扰。 用湛江安度斯公司的抗增液复溶鲎试剂可以消除（1-3）β-D葡聚糖
的干扰。
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E3.0
NC E0.03 E0.3
每个浓度的标准内毒素溶液分别与抗增液复溶的 鲎试剂及BET水复溶的鲎试剂反应
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2019/12/30抑制的来源 由内毒素激活的酶反应受抑制
pH值不适宜 二价阳离子不足 酶的改良及活性不足
内毒素损耗
吸附 损耗
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抑制的鲎解试验决的办正法常反应需要中性的pH值、一定浓度的钠离子及二
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增强 的来源来源和解决方法
β-葡聚糖是造成鲎试剂结果假阳性的一个已知来源。 美国药典BET法的要求： “除了内毒素，鲎试剂还与某些β-葡聚糖反应。一些经特殊制备的 鲎试剂不会与β-葡聚糖反应，应使用这种鲎试剂检测含β葡聚糖的样 品”
价阳离子； 用BET水稀释供试品可以解决绝大多数的抑制
pH值
鲎试验的反应混合液（TAL+供试品）的pH值应在6~8范围内 用BET水在容许范围对供试品进行稀释 用缓冲液制备样品稀释液 用酸、碱或缓冲液来调节pH
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＋ ＋
－ －
数1 2
＋ ＋
＋ ＋
＋ ＋
－ －
平行 3 4 管
＋ ＋
SE2λ
＋
＋
＋
＋
溶SE液λ B（EStE）½λ
－ －
SE¼λ
平行 3 4 管
＋ ＋
SE2λ
＋
＋
＋
＋
溶SE液λ B（EStE）½λ
－ －
SE¼λ
数1 2
＋ ＋
－ －
－ －
－ －
数1 2
＋ ＋
＋ ＋
＋ ＋
＋ －
3
＋
－
－
－
3
＋
＋
＋
－
4
＋
－
－
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0.1Mg/ml葡聚糖（抗增液）
0.1Mg/ml葡聚糖 +E0.3（抗增液）
0.1Mg/ml葡聚糖
0.1Mg/ml葡聚糖 +E0.3
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－
4
＋
＋
＋
－
出现表b或表c的极端情况均为不适宜的实验结果，需要检查实验条件。
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干扰的类型
抑制
供试品含有的内毒素浓度≥2倍检测试剂的灵敏度，但检测结 果仍为阴性，称之为假阴性
增强
供试品含有的内毒素浓度低于检测试剂灵敏度的1/2，但检 测结果仍为阳性，称之为假阳性
0.1Mg/ml葡聚糖出现明 显的增强
0.1Mg/ml葡聚糖（抗 增液）不存在干扰

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＋
0.5λ ≤ Es ≤ 2λ；0.5λ ≤ Et ≤ 2λ
光度法
CP、USP规定无干扰条件：
2 3 平4 行
＋ ＋
＋
50% ≤ R ≤ 200% FDA规定无干扰条件：
管数 1 2
SE2λ ＋ ＋
50% ≤ R ≤ 150%
3
＋
4
＋
溶λ液C（E½s）λ
＋
－
＋
－
＋
－
＋
－
S溶E液λ B（EStE）½λ
干扰凝的胶法表现
最理想的无干扰状 况
FDA的鲎试验指南中规定，同一标准内毒素的阳性对照与阳性样品对
照系列的反应终点存在显著差异时，即可确定为存在干扰。
CP2005规定无干扰条件： 表平a行
0.5λ≤Es ≤ 2λ；0.5Es ≤ Et ≤ 2Es 管数
2λ
USP27规定无干扰条件：
1
＋
－
＋
－
＋
－
＋
－
¼λ － － － －
SE¼λ － － － －
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表平b
不符合CP要求，但 符合USP要求
符合CP要求，但不 符合USP要求
表平c
行 管
2λ
溶λ液C（E½s）λ
¼λ
行 管
2λ
溶λ液C（E½s）λ
¼λ
数1 2
＋ ＋
＋ ＋
二价阳离子
在含有鳌合剂的样品制备中使用MgSO4或CaCl2缓冲剂可维 持Ca++、Mg++离子的浓度
蛋白和酶的改良
血浆和血清中的丝氨酸蛋白酶可经加热处理使其变性； 某些蛋白的变性或酶的抑制原料需要用超滤方法去除
内毒素损耗
在标准内毒素制备及使用过程，需要经常旋涡混合其溶液 避免使用对标准内毒素有吸附作用的实验器具