高效液相色谱仪验证方案
LC-10A型高效液相色谱仪为苏州岛津分析仪器有限公司生产的产品，我司在购买前对该产品的性能、价格、外观和售后服务进行了广泛地调查研究，在同类产品中价格便宜、性能稳定、美观且售后服务好。
购买该产品的目的是为今后新产品研制、开发、生产。
为了确保使用该仪器检测数据真实可靠，也为了确认该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标，计划对该仪器进行必要的验证。
仪器名称：高效液相色谱仪仪器负责人：
仪器型号：LC-10A 仪器系列号：
生产厂家：苏州岛津分析仪器有限公司
仪器所在部门和房间：质量检验室的精密仪器室
1、预确认
1.1、概述
用于样品的鉴别、含量测定。
1.2、资料档案
设备预确认资料及归档情况?。
2、安装确认
2.1、仪器随机资料归档或准备情况是否符合要求?
备件清单如下
2.2、安装确认
设备开箱验收是否符合要求?
确认人：复核人：时间：
仪器的安装是否符合要求：环境温度10-30℃，且要稳定；相对湿度≤80%，无腐蚀性气体；远离振源。
电源功率：220±10V，50HZ ，供电电源：应有良好的接地，线路连接：各接口连接正确，管线连接：各接口连接正确。
3、运行确认
目的：确认该仪器达到技术要求。
3.1、校正
3.1.1、计量部门的校正(见有关检定证书)
检定单位：
检定证书编号：
检定日期：年月日
复核者：日期：年月日
3.2、LC-10A型溶剂输液泵流量精度
可执行标准：＜±5%
测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以重蒸馏水为流动相，将流速稳定后，分别设定0.5、1.0、1.5ml/min三段，每个流速测定三次,在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得。
结论：
试验者：日期：年月日
复核者：日期：年月日
3.3、LC-10A型溶剂输液泵流量稳定度
可执行标准：＜±5%（0.95ml/min～1.05ml/min）
测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以重蒸馏水为流动相，将流速稳定后，设定流量为1.0ml/min，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得，共收集5次。
结论：
试验者：日期：年月日
复核者：日期：年月日
3.4、LC-10A型溶剂输液泵压力范围
可执行标准：0.0MPa～40.0Mpa
测试方法：在进样阀的出口接一个两通，再将两通的另外一端用OD1.6的盲管封住。
启动泵，使压力升至所设定的压力，观察仪器是否自动停泵。
设定值分别为：10.0Mpa、20.0Mpa、30.0Mpa
结论：
试验者：日期：年月日
复核者：日期：年月日
3.5、SPD-10A型紫外-可见检测器波长准确度
可执行标准：波长准确度为±2.0nm
测试方法：
A、重铬酸钾的硫酸溶液的配制：取120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg，精密称定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000ml摇匀，即得。
B、测定法：将检测器连接好，接通电源，用注射器注入重铬酸钾的硫酸溶液将吸收池充满，在200～400nm处进行扫描,测定其吸收值，以吸收值为纵座标，波长为横座标，作图，观察最大、最小吸收时的波长值。
(标准吸收波长为：235、257、313、350，偏差不得超过±2.0nm)
结论：
试验者：日期：年月日
复核者：日期：年月日
3.6、SPD-10A型紫外-可见检测器噪声与漂移
可执行标准：噪声＜±2.0×10-4AU(254nm)，漂移＜±5.0×10-4AU/hr 测试方法：
将仪器各部连接好，紫外检测器调至254nm，流动相为甲醇，流速为1.0ml/min，待柱平衡稳定后，进行基线的测试，测试时间半小时，观察并记录测试结果。
测试图谱见基线漂移测试。
见图谱(1)
结论：
试验者：日期：年月日
复核者：日期：年月日
3.7、SPD-10A型紫外-可见检测器重复性(定性重复性及定量重复性)
目的：考核仪器整体稳定性能。
可执行标准：定性重复性RSD≤1%，定量重复性RSD≤2.0%
测试方法：精密量取二甲苯和苯适量，置棕色量瓶中，加甲醇使溶解并稀释成每1ml含上述两种物质都为0.002ml的溶液，摇匀；以甲醇为流动相，精密量取上述溶液20μl 注入色谱仪中，连续进样5次，记录色谱图，计算，即得。
见图谱(2)-(6)
A、定性重复性
取两组分保留时间差进行计算。
B、定量重复性
取两组分峰面积比进行计算。
结论：
试验者：日期：年月日
复核者：日期：年月日
3.8、SPD-10A型紫外-可见检测器最小检出量
可执行标准：检出量为4.0×10-8g,以萘为样品。
测试方法：精密称定萘适量用甲醇溶解并稀释成4.0×10-6g/ml，以甲醇为流
动相，调节最小峰面积适量，不进样进行流动相的噪音峰高的测试；然后分别精
密量取1μl和5μl注入色谱仪中，记录色谱图，测量峰高并与噪音峰高之比，
如其中一个进样量的结果大于2则以其中一个进样量的体积进行最小检出量的计
算，测试结果见图谱(7)。
结论：
试验者：日期：年月日
复核者：日期：年月日
4、性能确认(适用性预试验)
目的：系统适用性试验，确定系统能够满足分析测试需求。
可执行标准：含量测定的相对偏差应不得过3.0%。
采用仪器：苏州岛津分析仪器有限公司LC-10A高效液相色谱仪。
检验依据：********
色谱条件：C
柱流动相：0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺调节PH值至3.0）18
－甲醇－乙腈（80：10：10）流速 1.0ml/min 波长 269nm
系统适用性试验项目：色谱柱的理论板数、分离度、拖尾因子的测试：
对照品溶液的制备取依诺沙星对照品约25mg，精密称定，置100ml量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液约20ml使溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得。
［对照品色谱图可参照图谱(8)］
系统适用性试验：
以0.025mol/L磷酸溶液（用三乙胺调节PH值至3.0）－甲醇－乙腈（80：10：10）为流动相，波长为269nm，样品为依诺沙星对照品，要求理论板数不少于2000，分离度应符合要求。
结果见图谱(8)
理论塔板数n=5.54×(t R/W h/2)2
=
=
分离度R（R应大于1.5）=2（t R1-t R2）/w1+w2
=
=
拖尾因子T（T应在0.95～1.05之间）=W h/20/2d
=
=
相对标准偏差（相对标准偏差应≤2.0%）
测定过程：连续进样5针，得5次峰面积数据：
试验者: 日期: 年月日
复核者：日期：年月日
5、再确认
5.1、线路连接：检查线路，接地等情况。
5.2、附件：检查工作日记和操作手册。
5.3、仪器维护：清洁仪器内部和外部。
5.4、检查：色谱柱参数是否降低，润滑是否良好。
5.5、流量
用比重瓶收集一定时间的流动相比较流量是否和设定值一致，如不一致则调整。
5.6、紫外-可见检测器性能
5.6.1、将检测器连接好，接通电源，用注射器注入重铬酸钾的硫酸溶液将吸收池充满，在240、245、250、257、260、265、270及275nm的波长处分别测定其吸收度，以吸收度为纵座标，波长为横座标，作图，观察最大吸收度时的波长值。
波长准确度应为±2nm。
5.6.2、将仪器各部联好，紫外-可见检测器波长调到254nm，流动相为甲醇，流速为1.0ml/min，稳定后记录基线30～40分钟，基线飘移≤±5×10-4AU/hr，噪声≤±2.0×10-4AU。
5.6.3、重复性
精密量取二甲苯和苯适量，置棕色量瓶中，加甲醇使溶解并稀释成每1ml含上述两种物质都为0.002ml的溶液，摇匀；以甲醇为流动相，精密量取上述溶液20μl 注入色谱仪中，连续进样5次，记录色谱图，计算，即得。
以此检查仪器的定性重复性和定量重复性，定性重复性RSD≤1%，定量重复性RSD≤2.0%。
5.6.4、最小检出量
精密称定萘适量，用甲醇溶解并稀释成4.0×10-6g/ml，以甲醇为流动相，调节最小峰面积适量，不进样进行流动相的噪音峰高的测试；然后精密量取一定量的供试液注入色谱仪中，记录色谱图，测量峰高并与噪音峰高之比，最小检出量应为4.0×10-8g。
再确认周期：一年。