动物实验设计
拟解决的关键问题 控制去甲肾上腺素及多巴胺的量,注意心率及心律的变化
(二) 实验设计 1. 实验专业设计
去甲肾上腺素能激动 1 受体,使血管收缩,滴注时间过长或剂量过大,可是肾 脏血管剧烈收缩,引起肾有效循环血量减少,导致肾血液灌流量和 GFR 显著降低, 出现尿量减少和氮质血症等
多巴胺在低浓度时作用于 D1 受体,是通过激活腺苷酸环化酶,是使细胞内 cAMP 水平提高而导致血管舒张。使肾血管舒张,肾血流量增加,肾小球率过滤也增加 2. 实验动物设计(遗传背景,微生物质量控制,育种繁殖,饲养管理,动物模型,
书名:病理生理学(第7版)人民卫生出版
社.251至257页
2. 主编.杨宝峰 书名.药理学( 第7版).人民卫生出版社.87至92页
3. 主编.杨芳炬 书名.机能实验学.高等教育出版社.194至196页
二. 实验设计方案(实验设计目标,拟解决的主要问题, 实验动物设计,实验专业
设计,实验统计设计,实验方法设计,可行性分析,预期结果,实验设计工作时 间安排)。 (一) 实验设计目标 利用去甲肾上腺素复制急性肾功能衰竭,观察是否有肾实质性病变 用多巴胺解救肾衰,看其效果如何
此时尿液肌酐浓度 5.实验结果:检测实验组于对照组的血肌酐,尿素氮等,比较,看急性肾衰
是否复制成功,输入多巴胺溶液后,实验组家兔的血肌酐和尿素氮等于输入多巴胺 前的对比,看多巴胺对急性肾衰的治疗效果 (三) 实验设计工作时间安排 实验前 24h 制造模型,实验可能用 150 分钟
三. 完成实验的条件
实验设计大纲
实验名称:肾前性急性肾功能衰竭模型复制及解救
课题来源:自选
设计班级:检验医学院医学 2018 级检验一班
设计人员:**
设计日期:2010 年 11 月 10 日
指导老师:**
一. 实验设计的目的意义:实验设计的目的意义,国内外研究现状,存在的问题, 解决问题的思路。
1. 目的与意义。 学习用去甲肾上腺素复制肾前性急性肾功能衰竭模型, 观察该模型一般状态下、尿蛋白及尿沉渣尿素氮、肌酐水平、内生肌酐清除率等变 化 测出用多巴胺解救的浓度及用量
实验动物学技术) 2.1 实验动物的选择:家兔 2.1.1 遗传背景 :近交系 2.1.2 微生物质量控制:清洁动物 2.1.2 饲养管理:全价饲料喂养 2.2 动物模型:肾前性急性肾功能衰竭
3.2 实验方法设计 实验技术路线:复制急性肾衰模型
检验该模型的尿常规及肌酐清除率等指标,与对照组比较
输注低浓度多巴胺后测其尿常规及肌酐清除率等指标
(一) 仪器设备:哺乳动物手术器械,分光光度计,离心机,水浴锅,显微镜, 中试管,塑料输尿管,酚红标准管
(二) 药品试剂:去甲肾上腺素,多巴胺,1.5%戊巴比妥钠,血肌酐测定试剂,, 血液尿素测定试剂,5%葡萄糖溶液,生理盐水,0.6%酚红溶液,3%NaOH 溶液,20% 葡萄糖溶液,10%NaOH 溶液,5%醋酸溶液,0.1mol/L HCL 溶液,蒸馏水
4.2 实验技术方法 4.2.1 实验分组 :实验组(去甲肾上腺素导致的急性肾衰的家兔)、对照组(注射生
理盐水的家兔) 4.2.2 模型复制:
一、实验前 24h,取健康家兔两只,称重后进行一下处理: 实验组:静脉滴注去甲肾上腺素 50ug 溶于于 100ml 生理盐水中(40 滴/分钟) 对照组:静脉滴注 0.9%生理盐水(30 滴/分钟)100ml 二、24h 后,捉拿家兔,称重病麻醉(耳缘静脉注射 1.5%戊巴比妥钠 2ml/kg。 麻醉后将家兔固定于兔台,导尿管导尿,收集尿液,留作尿蛋白、尿液肌酐浓度测 定 三、颈部剪毛,作颈部切口,分离一侧总动脉,作颈动脉插管以备取血用,分 离另一侧颈静脉,作颈静脉插管后,输入 5%葡萄糖(100ml/kg 速度为 50 滴/min), 以保证有足够尿量,自输液开始记录一小时尿量。 四、颈总动脉放血 5ml,离心(2500r/min,10min),取血清待测定尿素氮、肌 酐含量。实验组和对照组对比 五、从耳缘静脉输注多巴胺(每分 10ug/kg),直到出现心率加快,停止。测
2. 国内外研究现状 未知
3. 存在的问题 不知道多巴胺的最佳用量是多少,大剂量多巴胺可使肾血管明显收缩
4. 解决问题的思路 剂量过大或滴注过快可出现心动过速、心律失常和肾血管收缩导致肾功能下降,一 旦出现以上反应,就应减慢滴注速度或停药。可根据心率及心律来判断是否停药
5. 参考文献
1. 主编.金惠铭 王建枝