实验三矮牵牛的分苗及移植
一．目的要求
1．掌握矮牵牛等花卉分苗及移植的基本操作;
2. 学习不同类型花卉栽培培养土的配制。
二、材料与试剂
1．实验材料：矮牵牛幼苗。
矮牵牛(Petunia hybrida Vilm)为茄科矮牵牛属多年生草本，常作一、二
年生栽培。
喜温暖和阳光充足的环境；不耐霜冻，怕雨涝，所以盆栽矮牵牛
宜用疏松肥沃和排水良好的砂壤土。
园艺品种极多，通常通过播种或扦插繁殖。
主要用于布置花坛或盆栽（悬挂观赏），大花品种可以用于切花。
2. 实验工具：营养钵、铁锹、撒壶、花铲。
三、方法步骤
1．营养土的配制：培养土分（体积比）：粘重培养土，中性培养土，疏松培养土三种。
矮牵牛营养土：壤土：蚯蚓粪=3：1 。
2．起苗及分苗：
（1）移植前1天给苗床浇透水，防止土壤板结；
（2）起苗时用花铲或解剖刀的刀柄轻轻将矮牵牛幼苗起出，分苗时尽量使每株幼苗带土。
3．装盆：先装入1/3培养土；再将花苗放在盆中央，舒展根系，四周再加土，用手自盆边向中心压实。
花苗不宜栽地过深，盆土也不宜装的太满，一般离盆口1.5厘米左右，以利浇水。
4．摆盆：将已移栽好的营养钵根据地形摆放整齐，利于管理。
5．浇定植水：上盆后即行浇水，水要浇足，一般连续浇2次透水。
四、作业
1. 将本次实验整理成实验报告。
2. 在矮牵牛的移植过程中应需要注意哪些问题？
实验四香水百合愈伤组织的诱导及分化
一．目的和要求：
1. 学会MS梯度培养基的制作方法;
2. 掌握高压灭菌的方法和基本操作;
3. 巩固无菌操作技术。
二、材料、仪器与试剂
1.材料：香水百合无菌苗
香水百合(Lilium spp.)属百合科(Liliaceae)百合属(Lilium)多年生鳞茎类球根
草本植物，集观赏、食用、药用于一体[1]，其花姿雅致、气味芳香、色泽鲜艳、叶青翠娟秀、茎干亭亭玉立，素有“百合女王”之美称，极受消费者的青睐，是世界著名的切花品种之一。
2.仪器：超净工作台、灭菌锅、弯头剪、枪状镊子、烧杯（1000ml）、培养皿等
3.试剂：MS的Macro-e、Micro-e、有机母液、Fe盐、肌醇蔗糖，琼脂粉，1N NaoH 和 1N HCl
三、方法步骤
（一）配方设计: 以MS为基本培养基
No. 6-BA NAA
CK 0 0
1 0.5 0.05
2 0.5 0.1
3 1.0 0.1
4 1.0 0.2
（二）配制培养基 (每种配方各1升)
1.制作基本培养基
(1)溶化琼脂：量取3L蒸馏水，加入4.8g×5琼脂粉，加热溶解直至完全融化；
(2) 各种母液的吸取：Macro-e 50ml×5
Micro-e 1ml×5
有机成分 1ml×5
Fe盐 5ml×5
肌醇 10ml×5
加在一起，倒入锅中；
（3）加入糖:称取 30g×5 蔗糖，溶于溶有琼脂的锅中；
（4）定容:补加2L蒸馏水（用量杯）；
（5）调节pH至5.8，用pH试纸进行测定，用1molHcl或1Mol NaoH调节。
2. 分装:将基本培养基平分到5个1000ml的量杯或烧杯中。
3. 根据实验设计，分别添加生长调节剂,并搅拌均匀。
4. 分装及标记: 40 ml/瓶，培养基勿碰三角瓶口;每种培养基须及时标记。
5. 用具清理和洗涤：各种母液按原位置摆整齐，用过的量筒，移液管、烧杯、铝锅等用水洗涤干净，然后按次序放回原处。
（三）灭菌：用高压蒸汽消毒器灭菌，其压力为0.12～0.15MPa,温度为120～126℃，保持15~20 min。
具体操作步骤：
1. 加水；
2. 把包扎好的培养基装入高压锅；
3. 盖上热压锅盖,上紧螺帽(注意对角拧紧螺帽)关上气阀和安全阀；
4. 加热；
5. 排除冷空气；
6. 排除冷空气后,关闭放气阀，待压力升到1Kg位置时，开始计算灭菌时间，一般在1Kg 压力(121℃)下灭菌15~20 分钟即可，但要注意保持稳定压力。
7. 灭菌时间达到20 分钟后，停止加热，待压力自动降到0磅时，打开放气阀，打开热压灭菌锅盖(注意对角扭松螺帽)稍待冷后再把培养基取出。
（四）接种
用剪刀或解剖刀将无菌苗的叶片剪成0.5×0.5 cm2的叶块、叶柄剪成长约0.5 cm的段。
将叶柄或叶块轻轻平置在培养基上，每瓶接3个。
对接种用具、超净台面、操作者手等进行适当灭菌处理，继续接种。
（五）培养：培养物置于25℃左右的培养室中，每天光照12 小时，光照度为850-1200lx。
（六）观察：定期观察培养物的生长情况，及时将污染材料取出。
四.作业
1. 总结配制梯度培养基的注意事项。
2、进行试验结果的观测、比较和记录，通过分析，筛选出香水百合愈伤组织诱
导及分化的最佳外植体类型和最佳培养基配方。
6-BA NAA 材料类型接种数/个愈伤化数/个愈伤化率/% 愈伤组织生长情况CK 0 0
1 0.5 0.05
2 0.5 0.1
3 1.0 0.1
4 1.0 0.2。