脲酶试验标准操作规程
1 .目的
规范脲酶试验标准操作规程
2. 原理
某些细菌具有脲酶,能分解尿素生成氨,使培养基
变碱,酚红指示剂随之变红色。
3. 试剂
3.1尿素氮培养基成分
2.0g
2.0g
18 〜20g
1000ml
7.0
3.2制备 将上述成分(除酚红、尿素外 中,加热溶解,校正 PH ,加入酚红溶液,分装每瓶
100ml , 置120 C 灭菌15分钟备用。
临用时,加热溶解,冷却至55 C 左
右,加入无菌的尿素溶液 10ml ,摇匀,无菌分装于灭菌试 管,每支2ml ,并置成斜面备用。
蛋白胨
1.0g 氯化钠
葡萄糖
1.0g 磷酸二氢钾
0.4 %酚红溶液
3.0ml 琼脂
20 %尿素溶液
100 ml 蒸馏水
PH )混合于蒸馏水
4. 质控
大肠埃希菌ACTT 25922为阴性,奇异变形杆菌ACTT 49005为阳性。
5. 操作步骤
将待检菌接种至含尿素培养基中,35 C孵育1〜4日。
6. 结果判断
红色者为阳性。
7. 注意事项
所有尿素培养基均依靠出现碱性来证实,故对脲酶不是
特异性的。
某些细菌如铜绿假单胞菌利用培养基的蛋白胨可
分解为多量氨基酸,使PH升高呈碱性,造成假阳性。
因此必须用无尿素的相同培养基作为对照。
8. 临床意义
主要应用于肠杆菌科中的变形杆菌属细菌的鉴别。
奇异变形
杆菌和普通变形杆菌脲酶阳性。