ysis us ing d iffer ent antigen s ources.J In vest Dermatol,1990,94∶327-331.
5Hash imoto T,Kon ohan a A,Nish ikawa T.Immunob lot ass ay as an aid to th e diagnosis of
unclassified cases of pemph igus.Arch Derma-
tol,1991,127∶843-847.
(收稿:1997-01-16 修回:1997-05-03)
常用中药对酪氨酸酶的激活作用许爱娥 王遂泉 周渭珩
白癜风是一种色素代谢障碍性皮肤病,目前尚无十分有效的治疗方法。
在黑素的生物合成过程中酪氨酸酶起了关键性的作用,提高酪氨酸酶活性,就能提高黑素的合成量[1]。
本实验旨在通过研究常用中药对酪氨酸酶的作用,筛选出其中具有激活作用的药物,用于临床治疗,以期能提高中药对白癜风的治疗效果。
一、材料和方法
(一)材料:实验用中药48种,包括北柴胡、炒白蒺藜、制首乌、炒僵蚕、炒乌梢蛇、炒白术、炒白芍、炒青皮、熟地黄、补骨脂、丹参、潼蒺藜、蛇床子、马齿苋、北沙参、独活、川芎、当归、桃仁、红花、三七片、菟丝子、虎杖、麦冬、旱莲草、甘草、佛手、前胡、白藓皮、紫草、乌梅、赤芍、无花果、丹皮、茯苓、党参、黄芪、枸杞、肉桂、荆芥、桂枝、地肤子、莶草、核桃、苦参、浮萍、决明子、防风。
以上中药采购自杭州中药材公司,除注明炮制方法外,其余中药均为生品。
(二)方法:
1.试剂:DL-多巴、酪氨酸酶购自Sig-ma公司,其它试剂均为分析纯。
2.中药提取物的制取和酪氨酸酶活性测定按文献[2,3]的方法进行:中药粉碎后用50%甲醇水溶液浸泡,3小时后回流、过滤,再将残渣提取2次,合并提取液,水浴上挥去溶媒后将提取物溶于0.05mo l/L、pH6.5磷酸缓冲液中,制成每毫升相当于1g原
作者单位:310009杭州市第三人民医院皮肤科生药的溶液;反应混和物2ml(pH6.5、
0.05m ol/L磷酸缓冲液,70L l酪氨酸酶,中
药提取物)在37℃保温10分钟,加入1ml
0.15%DL-多巴,2分钟后立即于475nm
处测定吸光度A475。
以磷酸缓冲液为空白,
以不加中药提取物的反应组为对照。
此外,
将硫酸铜配成浓度为10-4、10-5、10-6mo l/
L的溶液,分别测定其对酪氨酸酶活性的
影响。
3.酶激活率的计算方法是以加中药组
测得的A475为A2,对照组的A475为A1,酶
激活率%=(A2-A1)÷A1×100%。
同一
种中药取不同的浓度进行反应,以找出对
酪氨酸酶能达到的最大激活率。
二、结果
48种常用中药中,仅有13种对酪氨酸
酶具激活作用,其余35种无激活作用或呈
抑制作用。
13种具激活酪氨酸酶作用的中
药以每种中药所能达到的最大激活率相
比,按从大到小顺序排列依次为旱莲草
49%、无花果38%、丹皮34%、潼蒺藜
34%、蛇床子33%、补骨脂31%、地肤子
25%、桃仁24%、白藓皮23%、白术22%、
紫草22%、肉桂21%、白芍20%。
Cu6在浓
度为10-5mo l/L时对酪氨酸酶激活作用最
强,激活率为25%。
选取酶激活率较高的旱莲草、无花果、
潼蒺藜三种中药提取物先加入活性炭,沸
水浴30分钟,然后离心去沉淀,用上清液
重复酶活性测定。
结果显示脱色后三种中
药均不能再激活酪氨酸酶。
三、讨论
我们选取白癜风治疗中使用概率较高
的48种中药,测定其对酪氨酸酶的作用,
结果显示仅13种对酪氨酸酶有激活作用,
按作用强弱依次为旱莲草、无花果、丹皮、
潼蒺藜、蛇床子、补骨脂、地肤子、桃红、白
藓皮、白术、紫草、肉桂、白芍。
其中作用较
强的前6种是治疗白癜风的常用药。
莶
草、乌梅、三七等中药对酪氨酸酶无激活作
用。
13味具激活作用的中药,仅补骨脂、无
花果属呋喃香豆素类药,是传统的光化学
疗法的光敏剂,能激活酪氨酸酶活性,其余
11种中药,作用最强的旱莲草是补阴药,丹
皮、紫草清热凉血,潼蒺藜补阳,蛇床子燥
湿杀虫,地肤子清湿热,桃仁活血,白藓皮
清热解毒,白术补气,肉桂温里祛寒,白芍
补血。
结果提示除传统的呋喃香豆素中药
外,其它性能的中药亦有激活酪氨酸酶的
作用。
因此在治疗白癜风组方时,可优先考
虑选用上述有激活作用的中药。
参 考 文 献
1Iw ata M,Corn T,Iw ata S,et al.T he rela-
tions hip betw een tyrosinase activity and skin
color in h uman for esk ins.J Inves t Dermatol,
1990,95∶9-15.
2徐建国,尚靖.补骨脂对酪氨酸酶的激活作
用.中草药,1991,22∶168-169.
3Yukimits u M.中药生药对酪氨酸酶的抑制作
用.国外医学中医中药分册,1982,1∶42-44.
(收稿:1997-01-09 修回:1997-10-24)
48Chin J Dermatol,Feb1998,Vol31,No.1。