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动物微生物细菌病的实验室诊断方法
? PCR技术、核酸分子杂交技术等。
大肠杆菌病实验室诊断方案
病料
病料中细菌的形态学检查
病料中细菌的分离培养 18小时后
涂片革兰氏染色 糖发酵试验
纯培养 生化试验
动物致病性试验
10日龄小鸡,皮 下注射0.2ml/只
H2S试验 MR试验
大肠杆菌病实验室诊断结果
? 剖检(采集病料) ? 纤维素渗出物的涂片染色 ? 分离培养 (麦康凯或伊红美
细菌的生化试验
? 进行生化试验的细菌必须是纯培养物。 ? 检验时,根据可疑细菌的生化特性选择特定
的一组生化试验,将结果与标准进行对比, 以确定病原菌的种类。
? 例:不同种沙门氏菌的生化鉴定
动物接种
? 意义
? 将待检细菌液接种到动物体内,观察动物 发病情况,进一步确认可疑细菌的致病作 用和类型。
? 接种对象
细菌病的实验室诊断方法
学习目标
? 知识目标
? 掌握细菌病实验室诊断的方法 ? 理解利用各种诊断方法的进行鉴定的意义
? 能力目标
? 具备结合临床病例设计实验室诊断方案的能力
主要内容
? 病料的采集、保存和运送 ? 细菌的形态学检查 ? 细菌的分离培养 ? 生化试验 ? 动物接种 ? 血清学试验 ? 分子生物学技术
蓝琼脂平板) ? 培养物涂片革兰氏染色 ? 生化试验 ? 动物接种试验
谢 谢!
? 本动物 ? 试验动物
? 接种途径
血清学试验
? 临床诊断中,可用于细菌的血清分型、快速诊 断或大群检疫。
? 用已知抗体检测动物体内的病原菌 ? 用已知的病原菌抗原检测动物血清中的抗体
? 例:鸡白痢的检疫
分子生物学方法
? 分子生物学技术对病原菌的快速诊断和不能人 工培养的细菌的探索发挥巨大的作用。
病料的采集、保存和运送
? 病料采集遵循的原则
? 防止污染 无菌采样 适时采样 适当部位
? 病料采集方法(不同病料不同方法)
? 实质脏器 液体材料 其他病料
? 病料的保存和送检
细菌性病料的保存和送检
? 低温保存 ? 尽快送检 ? 做好记录
? 畜主姓名、动物种类、地 址、发病情况、欲检部位 及检验项目、采集时间等
细菌的形态学检查
? 方法
? 光学显微镜检查 ? 电子显微镜检查
? 意义
? 观察病料中初步判断
细菌的分离培养
? 方法:用分区划线法在合适培养基上培养 ? 意义
? 看培养基中有无细菌生长推断是否为细菌病 ? 依据菌落的特征判断细菌种类 ? 用菌落中的细菌进一步作形态学鉴定 ? 可进一步作生化鉴定、血清学鉴定及动物试验 ? 可进一步作药敏试验
重点与难点
? 重点
? 细菌病实验室诊断的方法
? 难点
? 设计实验方案
细菌病的实验室诊断
实验室诊断是在临床诊断的基础上进行的
初诊:根据流行病 学、症状、病变等 方面的疾病特征, 做出初步诊断
通过实验室诊断, 确定病原是否是 细菌以及病原菌 的类型
细菌病实验室诊断方法
? 病料的采集、保存和运送 ? 细菌的形态学检查 ? 细菌的分离培养 ? 生化试验 ? 动物接种 ? 血清学试验 ? 分子生物学技术