中药材基础知识实验指导 (2)《中药制剂生产技术与调剂应用》-中药材基础知识实验指导二零零九年十月实验室守则1.实验课是培养学生独立思考和理论联系实际、灵活应用能为的重要手段,也是进行科研工作的基础,必须严肃认真。
2.准时上实验课,不得无故缺席,不得迟到早退,按指定座位就坐,使用相应的显微镜。
3.实验前必须通过预习本次实验,明确实验的目的要求、内容、方法和步骤。
实验时要认真观察,独立思考,做好记录,实验完毕后要按时交实验报告。
4.当老师讲解实验时,要专心听讲,并作必要的记录.在实验中如有疑问请举手,不准大声喧哗。
5.爱护实验室一切仪器设备,按操作规程使用显微镜,尽量节约水、电及擦镜纸、试剂等一切消耗物质.损坏仪器须登记,按规定赔偿。
6.每次实验必须带备指导书,绘图用具(HB、2H铅笔各一支,橡皮、尺子等)和实验报告纸。
7.保持实验室清洁整齐,一切实验用具用完盾要擦洗干净,放回原处.每次实验完毕,要搞好室内清洁卫生.离开实验室时要关好水、电、门、窗。
实验一植物细胞基本结构及后含物一、目的要求1.掌握光学显微镜下植物细胞的构造;2.识别植物细胞的各种后含物;3.学习临时制片法;4.学习植物细胞图的绘制方法。
二、仪器用品及实验材料(一)仪器用品显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、擦镜纸,稀碘液(二)实验材料:新鲜洋葱鳞茎,马铃薯块茎,西芹茎,大黄横切片三、内容与步骤:(一)植物细胞的基本构造1、制作洋葱表皮的临时装片从洋葱鳞茎上剥下一片肉质鳞叶,用镊子撕取其内表皮少许,用刀片切取3-5mm大小的一块,按临时装片法,置于载玻片上预先加好的水淌中,用镊子将其展乎,然后将盖玻片沿水滴一侧慢慢盖下,防止产生气泡,用吸水纸沿盖玻片一侧吸掉多余酌水。
2、观察植物细胞的构造将临时装片放在低倍镜下观察,可看到许多五色透明的稍长形的细胞,彼此紧密相连,没有细胞间隙。
在细胞中,可见到浸埋在细胞质中的圆形的细胞核,如不清晰,可由盖玻片一侧加稀碘液一滴,用吸水纸在另一侧稍吸;使碘液布满整个标本而染色,几分钟后观察,可见细胞质被染成浅黄色,细胞核被染成较深的黄色,细胞各部分显得较为清晰.移动装片,选择几个较清楚的细胞置于视野中央,换用高倍镜头再仔细观察;注意识别下列各部分:(1)细胞壁c植物细胞所特有。
为细胞的最外层,比较透明。
调节细调焦螺旋和彩虹光圈、可见两细胞间实际上为三层;,两侧为相邻两个细胞的细胞壁;中间是两个细胞共有的胞间层。
(2)细胞质:为无色透明的胶状物,紧贴在细胞壁以内,被中央大液泡挤成一薄层,仅细胞两端较明显.(3)细胞核:埋在细胞质内;贴近细胞侧壁的只见其窄蔺,呈扁圆形,贴在上、下整的可见其宽面,呈球形。
仔细观察,可见包在细胞核外面的核膜,细胞核内有1—3个发亮的颗粒,即核仁。
(有的细胞看不见细胞核是因为该细胞被撕破,只剩一半了)(4)液泡:位于细胞中央,占细胞体积的大部分,由于澈泡内充满细胞液;所以比细胞质更透明。
(二)植物细胞的后含物1.淀粉粒切取一小块马铃薯块茎,用刀片刮取少许液汁,置载玻片上,加水一滴,搅匀,盖上盖玻片.先在低倍镜下观察淀粉粒,注意其形状。
转换高倍镜继续观察,仔细、准确地分辨单粒,复粒和半复粒,识别淀粉粒中的脐点和层纹。
绘图记录。
然后取下制片,加一滴稀碘液。
观察有何变化,记录观察结果。
2.结晶体簇晶:取大黄根茎横切装片,观察,可见。
(三)用西芹练习作临时切片四、作业l.绘洋葱鳞叶的内表皮细胞,注明细胞各部分。
2.绘马铃薯块茎中淀粉粒的构造和类型图。
实验二、三植物组织、器官解剖构造观察(4学时)一、目的要求:1.熟悉单双子叶植物根的初生和次生构造特点。
2.熟悉单双子叶植物茎的初生和次生构造特点。
3. 熟悉植物叶的解剖构造特点。
4. 了解花粉粒的形态。
5.掌握植物组织的形态特征、分布位置及其在中药鉴定上的意义。
二、仪器用品和实验材料(一)仪器用品显微镜、解剖用具、擦镜纸、蒸馏水、水合氯醛液、稀甘油、酒精灯(二)实验材料菜心叶、新鲜姜、棉花次生根横切片、椴树茎横切片、薄荷叶横切片、花粉粒装片、黄柏粉末三、内容与步骤(一)保护组织1.表皮:撕取菜心叶下表皮一小块,制成临时水装片,镜检,可见表皮由一层扁平薄壁细胞组成,细胞排列紧密。
注意在表皮上能否见到角质层和毛茸、气孔?2.毛茸:薄荷叶横切片3.气孔植物体的表皮(除根表皮外)均有气孔,气孔由两个半月形的保卫细胞对合而成。
在保卫细胞周围常有2一多个与表皮细胞形状不同的·细胞,为副卫细胞;由于保卫细胞和副卫细胞之间不同的排列关系,双子叶植物的气孔有下列几种类型(撕取菜心叶下表皮制成临时水装片观察):注意是什么类型?(二)机械组织——厚壁组织(1)纤维:取黄柏粉末少许,用水合氯醛透化2~3次,制成临时甘油装片,置显微镜下观察.可见纤维及晶鞘纤维大多成束;多碎断。
纤维甚长,有的边缘凹凸,壁极厚;胞腔线形。
晶鞘纤维含草酸钙方晶.(2)石细胞;取已制好的黄柏粉末透化装片,在显微镜下观察,可见石细胞呈类圆形或多角形,或不规则分枝状,壁极厚,孔沟多不明显。
(三)分泌组织油细胞:取鲜姜作徒手切片,制成临时水装片,镜检,可见在薄壁细胞之间,杂有许多类圆形的油细胞,胞腔内含淡绿黄色挥发油滴(一)根的初生构造1.双子叶植物根的初生构造;取棉花根初生构造横切制片;在祗倍镜下区分出表皮,皮层,维管柱三大部分,然后转换高倍镜由外向里仔细观察:①表皮:为最外一层细胞,排列紧密整齐,没有细胞间隙.能否见到气孔和角质层?能否见到根毛?为什么?②皮层;在表皮以内,被固绿染成绿色的部分即皮层,占根的大部分,由多层排列疏松的薄壁细胞组成,可以区分为三层:a.外皮层:为紧靠表皮下方的一层细胞,略呈切向延长。
b.皮层薄壁组织:位于外皮层之间,为多层排列疏松的薄壁细胞。
c.内皮层c为皮层最内一层细胞,排列比较紧密.花生根的内皮层较特射,其凯由点不明显。
⑧维管柱,为内皮层以内的全部组织,它包括中柱鞘,初生维管束和髓。
a.中柱鞘:为紧贴内皮层的一层薄壁缅胞。
细胞体积较内皮层小,排列略整齐。
b.初生维管束:由初生韧皮部,初生本质部和它们之间的少量薄壁组织组成。
初生木质部:被染成红色的部分,为四原型,先分化的原生木质部导管较小,后分化的后生木质部导管较大,由外向内渐次成熟,谓之外始式》是根初生构造特征之一。
初生韧皮部:位于两初生木质部之间,与初生木质部相间排列呈辐射状,构成辐射维管束,这也是根的初生构造的重要特征。
初生韧皮部被固绿染成绿色,细胞多龟形,由筛管、伴胞和韧皮薄壁细胞、韧皮纤维组成,但不易分辨。
薄壁组织:位于初生木质部和韧皮部之间,当根进行次生生长前,它将分化成维管形成层的一部分。
注意:实验材料中已可见有形成层片段出现。
(一)根的次生构造取棉花根次生构造的横切制片,从外向里逐层观察:(1)周皮:为最外方的数层细胞,由木栓层、木栓形成层和栓内层组成.(2)①木栓层:在最外面,由几层排列整齐的扁平细胞组成,细胞壁栓质化,常呈浅棕色。
②木栓形成层:为木栓层内方的一层扁平细胞,不甚明显.⑧栓内层:木栓形成层的内方,是多层椭圆形至卵形的薄壁细胞,排列比较疏松,也叫“次生皮层”。
其中有断续的纤维束环以及草酸钙结晶。
(2)次生维管组织:为形成层活动产生的组织。
①次生韧皮部:位于栓内层的内方,形成层的外侧,被固绿染成绿色的部分.其组成分子有筛管、伴胞、韧皮薄壁组织、韧皮纤维、韧皮射线。
②形成层;在次生韧皮部和次生木质部之间,由数列排列紧密,整齐的扁长方形薄壁细胞组成。
⑧次生木质部;在形成层以内,包括导管,管胞和木薄壁细胞和木纤维组成。
横切面上,导管最容易辨认,是一些被番红染成红色的,口径,大小不一的类周形或多边形细死细胞,作放射状排列。
④维管射线:是贯穿整个次生木质部和次生韧皮部中,由径向排列的1-几列薄壁细胞组成·在次生韧皮部内的叫韧皮射线,在次生本质部的叫木射线。
射线细胞也是形成层细胞分裂产生的。
(四)茎的次生构造取椴树横切片观察,其次生构造由外至内包括:1.周皮c很明显,由木栓层、木栓形成层及栓内层组成.①木栓层,位于最外面,由2~3层排列整齐的扁平细胞组成,壁栓质加厚,染成深棕色。
可见皮孔否?②木栓形成层:位于木栓层之内,为一层扁平状的薄壁细胞。
⑨栓内层,在木栓形成层的内方,由多层排列疏松的薄壁细胞组成,又称“次生皮层”。
在薄壁细胞中,有零散或成束的纤维排列成环带状,2.次生维管组织①次生韧皮部:位于栓内层的内方,占整个茎部的比例小,染成绿色。
其组成分子有:筛管、伴胞、韧皮薄壁组织、韧皮射线、韧皮纤维。
②形成层:成一圆环状.由数层排列整齐的细胞所组成,其中一层为形成层。
位于次生木质部和次生韧皮部之间.⑧次生木质部:位于形成层的内方,占整个茎部的大部分,染成红色。
;其姐成分子有导管、木薄壁组织、木射线、木纤维。
④维管射线;是一群横向排列的薄壁细胞,位于次生韧皮部的叫韧皮射线,位于次生木质部的叫木射线。
⑤髓:仍保留在茎的中央,由薄壁细胞组成。
四、作业与思考1.绘气孔的简图。
2.绘花粉粒图。
实验四大黄、黄连的鉴定一、实验目的1、掌握显微描绘方法以及大黄、黄连粉末的显微特征2、熟悉大黄、黄连的理化鉴别方法。
二、实验器材仪器:显微镜试剂:水合氯醛、稀甘油、氢氧化钠、乙醇、稀盐酸、漂白粉、30%硝酸药材:大黄、黄连粉末:大黄、黄连三、实验内容1、观察并描绘大黄粉末显微观察中的草酸钙簇晶、导管;黄连粉末显微观察中的石细胞、纤维、磷叶表皮细胞。
2、观察大黄、黄连的理化特征。
四、实验方法1、大黄的理化鉴别取少许大黄粉末置滤纸上,加氢氧化钾(钠)试液,滤纸染成红色(检查蒽醌类衍生物)。
2、味连的理化鉴别①取黄连粗粉1g,加乙醇10ml,加热至沸腾,放冷、滤过。
取滤液5滴,加稀盐酸1ml与漂白粉少量,振摇后,溶液显樱红色。
(小檗碱)。
②取黄连粉末置载玻片上,加95%乙醇1-2滴及30%硝酸1滴,盖上盖玻片,放置片刻,镜检,有黄色针状或针簇状结晶析出。
(硝酸小檗碱)③. 黄连根茎折断面在紫外光灯下观察显金黄色荧光,木质部尤为显著。
3、大黄、黄连粉末的显微鉴定与描绘(1)大黄、黄连粉末,分别以水合氯醛透化装片。
(2)描绘大黄粉末显微观察中的草酸钙簇晶、导管;黄连粉末显微观察中的石细胞、纤维、磷叶表皮细胞。
五、观察要点1、大黄粉末显微观察中的草酸钙簇晶、导管、淀粉粒的描绘(见图一)2、黄连粉末显微观察中的石细胞、纤维、磷叶表皮细胞(见图二)。
六、作业描绘大黄、黄连粉末显微特征图。
写出大黄、黄连的理化实验现象。
图一大黄粉末显微观察描绘图1、草酸钙簇晶2、导管3、淀粉粒图二、味连粉末显微观察图1、石细胞2、韧皮纤维3、木纤维4、鳞叶表皮细胞5、导管6、棕色分泌物实验五甘草、黄柏的鉴定一、实验目的1、掌握甘草、黄柏药材性状鉴别特征。