–经支气管镜直接吸引 –支气管肺泡灌洗 –防污染样本毛刷
下呼吸道标本采集方法
3
胃内采痰法：无自觉症状的肺结核病人尤 其婴幼儿不会咳嗽，有时将痰误咽入胃中， 可采集胃内容物做结核分支杆菌培养。 4 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭 子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽，可喷出 肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还 可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。
血培养标本的运送
采集后的血培养瓶应在1小时之内送往
实验室。 血培养瓶在采血接种后在室温不超过 数小时。 血培养瓶在接种前和接种后均不得冷 藏或冷冻。
血培养假阳性的危害
1、增加患者抗生素用量，破坏其微生态环境 2、延长了住院天数 3、延误病情诊断 4、增加经济负担
防止皮肤寄生菌或环境微生物污染
但由于标本的采集和运送常有护士或医
生或病人自己完成，所以也是最不容易 做好的事情，而且不知道问题所在之处 ，造成的后果是: 临床医生最不能接受的问题:阳性率低
微生物样本采样基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查 2.在抗菌药物使用前采集标本 3.采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低。 4.采样后立即送检，最好在2h内。甚至床旁接种尤其是 厌氧培养，棉拭子标本宜用运送培养基，尽量不要以 棉花拭子收集样本。 5. 标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂。 6.送检标本应注明来源和检验目的 7.混有正常菌群的标本如痰、尿、伤口拭子，不可置肉 汤培养。 8.安全：标本收集时，注意安全防护；标本收集后，须 避免他人被感染。

咳痰标本不合格，退检吗？
如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，
白细胞小于10个，应不做或仅在特殊要求 时做培养。
如做培养，报告中注明“镜检结果表明标
本口咽分泌物污染明显”。
下呼吸道标本采集方法
1
自然咳痰法：晨痰、漱口，深咳呼吸道 深部痰（非后鼻部分泌物、非唾液）留于 无菌容器内。对于痰量少或无痰的患者可 采用雾化吸入45℃10％NaCL 水溶液，使痰 液易于排出。 2 支气管镜采集法：
临床标本的分类
带菌标本
痰 咽拭子 尿液 粪便 其他类别
无菌标本
血液 脑脊液 关节腔积液 胸腹水 其他类别
一、血培养操作规范
临床常见的采血指征
发热（38C）或低温（36C） 寒战 白细胞增多（计数大于 10109/L，特别有“核左
移” 未成熟的或杆状核的白细胞） 粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1000109/L） 血小板减少 皮肤粘膜出血 昏迷 ，休克 多器官衰竭 CRP/PCT升高
特别注意

尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内 或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致 错误的培养结果。 诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标 本就已足够，治疗48 ～ 72小时后再采集第二份标本。 对于症状不明显的病人，需采集2 ～ 3份标本。怀疑肾 结核时，应连续3天采集晨尿。
皮肤消毒程序，严格执行三步法:
1、用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上 2、用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s，从穿刺点 向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上，涂擦穿
刺皮肤2遍，待干燥。
3、75%酒精脱碘：用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒 液 ，待酒精挥发干燥后采血。
徐英春，倪语星等。血培养操作规范，上海科学技术出版社，2002,1-31
二、泌尿标本采集的规范
尿液培养标本送检指征
1
有典型的尿路感染症状； 2 肉眼脓尿或血尿； 3 尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸 盐阳性； 4 不明原因的发热，无其他局部症状； 5 留置导尿管的病人出现发热； 6 膀胱排空功能受损； 7 泌尿系统疾病手术前。
您知道吗？

泌尿标本采集的规范
1、采集后的标本应立即送检。标本采集
后应立即送检，否则可暂存于4℃冰箱。 2、采集时间：多数药物从尿道排泄，所 以不管用哪种方法都应在用药前采集。 应采集早晨第一次的尿。 3、标本管不应含防腐剂和消毒剂。
泌尿标本采集的规范
4、采集中段尿时要先用肥皂清洗女性的
外阴和男性的外生殖器包括包皮内，然 后用清水冲洗。 5、长期留置导尿管的患者应在更换新管 时留取尿标本。 6、 做厌氧培养时应膀胱穿刺采集尿。
临床微生物样本采集规范
正确的采取、处理与运送本是临床微生物检 验成功与直接关系检验结果的基本关键。 如果标本采集不当，即使有经验的实 验室工作者及最好的仪器设备也难以弥补 在采集标本时引入的误差和错误。 标本采取与处理不符合要求，则微生 物培养的结果毫无意义。
标本采集和运送是 细菌培养成功的最最重要的关键
三、下呼吸道分泌物（痰培养） 标本采取规范
下呼吸道标本标本送检指征
1 咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、铁锈色或 红棕色胶胨样痰。 2 咯血：肺结核病人常痰中带血。 3 呼吸困难 4 发热 5 胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸 痛。 肺部感染的患者有25 ～ 50％可能发生菌血症， 应同时作血培养。
尿培养样本采集方法
标本采集应力争在未使用抗生素之前．注意 避免消毒剂污染标本
1 清洁中段尿中段尿（晨尿最佳）约10 ～ 20ml直 接排入专用的无菌容器中，立即送检，2h内接种。 2 耻骨上膀胱穿刺：评估膀胱内细菌感染的“金标 准”方法。 3 直接导尿：可减污染，准确反映膀胱感染情况。 4 留置导尿管收集尿液：穿刺导尿管吸取尿液，不 能从收集袋中采集尿液。长期留置导尿患者，应在 更换新尿管时留取尿标本。
我国痰细菌培养现状
结果重复性差 感染菌与污染菌不易区分 药敏结果与治疗反应存在差距
咳痰标本的采集
标本采集方法
– 医师或护士直视下采集标本 – 病人先漱口，去除表面的菌群 – 教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液
临床上约半数咳痰标本不合格！
关于咳痰标本
在抗生素应用前采集痰标本; 标本采集后1 ～ 2h内必须立即进行实验室处理； 咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本 ; 取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口 ; 深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导 ; 无痰可用3％ ～ 5％NaCl 5ml雾吸约5min导痰； 也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰；
分类中1 ～ 3类不做培养，要求重新留取标本：4、5 类为合格标本：6类为气管穿刺液，如未见到白细胞， 而扁平上皮细胞>10/低倍镜视野，亦应重新留取标本。
痰培养的送检次数
对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，
连续2 ～ 3天。不建议24h内多次采集，除非 痰液外观性状出现改变； ห้องสมุดไป่ตู้怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰 液送检； 怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送 检次数尚无定论。
标本的质量检查
于显微镜低倍镜下检查（10x10），观察WBC及扁平上 皮细胞存在情况，作为参考： 痰标本显微镜检查的分类
分类 (级 ) 6 5 4 3 2 1 细胞数/低倍镜视野 白细胞 扁平上皮细胞 <25 <25 >25 <10 >25 10-25 >25 >25 10-25 >25 <10 >25
正常人尿液是无菌的，而尿液细菌培养 最大的问题是杂菌污染。正常人外尿道有 大肠杆菌、葡萄球菌等存在。而这些细菌 又是尿路感染中常见的病源菌。因此要作 好尿液细菌学检查，首先应注意标本收集 问题。
您知道吗？
尿液经尿道排出时会受到尿道内正常
菌群的污染,但定量培养时计数不会超 过103 CFU /m l, 泌尿系感染时定量 培养在104 ～ 105 CFU /m l 。 另外,由于绝大多数的泌尿系感染是由 肠杆菌科细菌引起,而此类细菌的硝酸 盐还原实验为阳性,故可参考尿十项检 查中的硝酸盐还原实验来推断是否有 细菌感染。
培养瓶消毒程序
打开血培养瓶塑料盖用75%酒精消毒血 培养瓶橡皮塞并擦干表面残余酒精→消 毒皮肤后用无菌注射器抽取血液从橡皮 塞处注入血培养瓶内→用75%酒精重新消 毒血培养瓶橡皮塞并盖好塑料盖→立即 送检。
血培养的采血量
血培养中采集血液的量，是影响细菌或真菌血 症检测最重要的因素，特别是成年患者。 成人采集量5-10ml（推荐最好8-10ml），儿童 采血量1-3ml。婴幼儿患者，采血量不超过患 者总血量的1％。 Why?成人血液中每毫升的菌落形成单位(CFU) 很低，是检出率的相关因素, 因此增加送检血 液量可以提升检出率;而儿童的血液中每毫升的 菌落形成单位(CFU)是成人10-100倍，因此采 集血量少于成人。

特别注意

多次收集或24小时尿不能用作培养。 申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于 定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标 本。

室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因 此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏， 但也不能超过24小时。
特别注意
多数药物从尿道排泄,所以标本采集应 力争在未使用抗生素之前或停用抗菌药 5d之后留取尿液标本;尿液在膀胱内应停 留6 ～ 8h以上，使细菌有足够的时间繁 殖,故应尽量采集早晨第一次的尿,同时 注意避免消毒剂污染标本。

菌血症病人血中细菌浓度


成年病人: 链球菌心内膜炎 葡萄球菌心内膜炎 革兰氏阴性菌血症 organisms/ml 革兰氏阳性菌血症 幼儿病人: 革兰氏阴性菌血症 organisms/ml 75%幼儿菌血症病人血液有
1 to 30 organisms/ml 1 to 20 organisms/ml 少于 1 to 10
痰培养的运送和保存
所有病人的下呼吸道标本应在采集后立即送至
微生物室，并于1小时内接种 如不能及时送达，应将标本暂存于4℃，但放 置时间不可超过24h。运输时勿置于冰块中 被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌 氧菌培养。 室温下放置>1h会降低肺炎链球菌、流感嗜血 杆菌的分离率而定植于上呼吸道的非致病菌则 会过度生长