分子生物学
第五章分子生物学研究法（上）——DNA、RNA及蛋白质操作技术
第三节RNA操作技术
第四节SNP的理论与应用
第五节基因克隆技术
第六节蛋白质组与蛋白质组学技术
夏玉琼
2013-10-10
目录
RNA操作技术
cDNA文库的构建
基因文库的筛选
SNP的理论与应用
基因克隆技术
蛋白质与蛋白质组学技术
分子生物学 夏玉琼 西安电子科技大学
cDNA文库的构建
切割位点
用四碱基特异性的限制性内切酶部分消化
DNA 片段，有的仍有切割位点
质粒DNA
将DNA 克隆进质粒DNA
细菌克隆每个细菌都带有不同片段的DNA
细菌转化
分子生物学 夏玉琼 西安电子科技大学
cDNA文库的构建
cDNA的长度
0.5-8 kb
载体：质粒载体和噬菌体类载体
完整的cDNA文库包含大于5*105的独立克
隆
分子生物学 夏玉琼 西安电子科技大学
目录
RNA操作技术
cDNA文库的构建
基因文库的筛选
SNP的理论与应用
基因克隆技术
蛋白质与蛋白质组学技术
分子生物学 夏玉琼 西安电子科技大学
基因文库的筛选
含义
通过某种特殊方法从基因文库中鉴定出含有所
需重组DNA分子的特定克隆的过程
筛选方法
核酸杂交法
PCR筛选法免疫筛选法
分子生物学 夏玉琼 西安电子科技大学。