三.实验步骤

3．加样倒平板：
方法一：用不同的灭菌吸管分别吸取10-4、105、10-6稀释液1ml，分别注入3个灭菌培养皿 中。分别立即倾注约15ml已熔化并冷却到 45℃左右的牛肉膏蛋白胨培养基，并立即在 桌面上作平面旋摇，使水样与培养基充分混匀 （每稀释度做3个）。另取一空的灭菌培养皿， 倾注牛肉膏蛋白胨培养基15ml，做空白对照。 培养基凝固后，倒置于37℃温箱中培养。
三.实验步骤
方法二：取0.2ml一定稀释度的样品，加 至冷却的平板中，用涂布器涂匀后，于 37℃温箱中培养。取10-4、10-5、10-6稀 释液，每个稀释度作三个，培养24-48h后，取出培养平板，并按下列 公式进行计算： 方法一：每毫升中菌落形成单位（cfu）=同 一稀释度的平均菌落数x稀释倍数 方法二：每毫升中菌落形成单位（cfu）=同 一稀释度的平均菌落数x稀释倍数x5 注： 一般选择每个平板上长有30-300个菌落 的稀释度计算每毫升的含菌量较适宜。


三．作业： 计算菌体含量(单位:cfu/mL)。
平板菌落计数法
实验目的 学习平板菌落计数法。
实验原理
微生物的计数方法分为直接计数和间接计数。 直接计数是通过血球计数板将微量体积样品中 的微生物在显微镜下数出（详见实验三）。直 接计数所计为微生物总数（包括死细胞和活细 胞），而且适用于体积较大的微生物如酵母、 霉菌的孢子等。
实验原理
平板菌落计数法是一种典型的间接计数法。将 一定稀释度的样品均匀接种到固体平板培养基 中，培养长出单菌落后，可认为每个单菌落由 一个微生物长出，根据稀释倍数可计算样品中 的微生物浓度。该方法不受微生物的大小的限 制，所计的只是活的可培养微生物，而且可用 于混合微生物样品的计数。
三.实验步骤
1．编号 取无菌平皿9个，分别用记号笔标 明10-4、10-5、10-6（稀释度）各三 套。另取6支试管，加入9ml无菌水， 依次标明10-1 、 10-2、10-3、10-4、 10-5、10-6。
三.实验步骤
2．稀释 水样：用无菌吸管取1ml样品加入含9ml无菌水的10-1试管中， 此即为10倍稀释。将10-1试管振荡，充分混匀。用另一吸管吸 取10-1菌液1ml，加至含有9ml无菌水的10-2试管中，此即为100 倍稀释。其余10-3、10-4、10-5、10-6稀释依次类推。 固体样品：准确称取10g样品，加入90ml无菌水中，充分混匀 后即为10倍稀释。将10-1试管振荡，使其充分混匀。用另一吸 管吸取10-1菌液1ml，加至含有9ml无菌水的10-2试管中，此即为 100倍稀释。其余10-3、10-4、10-5、10-6依次类推。