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动物细胞融合与单克隆抗体.ppt
比较项目
植物体细胞杂交 动物细胞融合
原理
细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 细胞膜的流动性
去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 细胞融合的方法 导原生质体融合 导细胞融合
诱导方法
物理(离心、振动、物理、化学方法
电刺激)
(同左)
化学(聚乙二醇) 灭活的病毒
用途
获得杂种植株
主要用于制备 单克隆抗体
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤
通过长期的实验,科 学家们采用体细胞杂交 技术获得了“番茄—马 铃薯”植株。
“番茄—马铃薯”理想图
植物体细胞杂交技术过程
植物细胞的融合
植物组织培养
植物细胞A 方法?
融合 完成
去壁
的 标志
原生质体A 原生质体B
去壁
融合的 杂种
愈
原生质
人 工
体AB
诱
导
再 生 出 细
细胞
AB
脱 分
化
伤 组 织
植物细胞B
胞
促进融合 壁
的方法?
杂
种
再植
分 化
株
成果和未解决的问题
成果:克服不同生物远缘杂交的障碍,出 现自然界没有的新品种。
未解决的问题:未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。
如果将牛的细胞与植物细胞杂交,得到绿色的小奶 牛,那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶啦!
动物细胞也能融合吗?
一、动物细胞融合
一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后,这 个卵细胞经过多次分裂,再植入第三只羊的子宫内发 育,结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途, 但是不能
D A.有选择地繁殖某一性别的家畜 B.繁殖家畜中的优秀个体 C.用于保存物种 D.改变动物的基因型
下列哪—项属于克隆
D
A.将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中
诱导剂:仙台病毒、聚乙二醇 诱导细胞融合的仙台病毒必须灭活。
思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的 病毒需要灭活?不灭活行吗?
因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂 质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合,不灭 活的话会感染细胞,而不能诱导细胞融合。
细胞融合技术应用于哪些方面? 细胞学、遗传学、免疫学及制备单克隆抗体。
由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的,所 以产生的抗体必然是化学性质单一的,特异性强的单 克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义, 只不过克隆的不是B淋巴细胞,而是杂交瘤细胞。)
3.单克隆抗体的应用:
①作为诊断试剂 特异性高、灵敏度高等优越性。
②用于治疗疾病和运载药物 生物导弹
植物、动物细胞融合的比较
不能
6、你能归纳出什么叫做动物细胞融合吗?
2、动物细胞融合的概念
动物细胞融合也称细胞杂交, 是指两个或多个动物细胞形成一 个细细胞融合有哪些方面的应用吗? 利用动物细胞融合技术诱导形成杂交瘤细胞
8、在生产实际中杂交瘤细胞有怎样的应用? 生产单克隆抗体
细胞融合与融合诱导细胞融合物质:
再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易
成功“复生”野驴的方法是
C
A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分 化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新 个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中, 经孕育培养成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体
B.将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内
C.将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤
风杆菌的实验方案
A
1、该实验方案的目的是_制__备__单__克__隆_ 抗体
骨髓瘤细胞 B
杂交瘤细胞
2、A是从小鼠的脾脏中取得
C
__B_细__胞__,该细胞能够产生_抗__体___
3、图中B为_细__胞__融__合_过程,常用 足够数量的细胞群 _灭__活__病__毒__作为诱导剂,该细胞继
承__双__亲__细__胞___的遗传特性,既能 _分__泌__抗__体___,又能__无__限__增__殖___。
体外培养
注射到
4、C过程指细胞培养,该过程包括
小鼠腹腔
_原__代__培养和_传__代__培养两个阶段。
下列属于动物细胞培养与植物组织培养主要区别的是 A.培养基成分不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行 A
C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能 D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株
杂种细胞
浆细?胞
抗?原
二、单克隆抗体
2.制备过程:
诱导其融合的 方法有哪些?
细胞融合后培养液中有几种细胞? B BB B瘤 瘤瘤 瘤 筛选(特定的 选择性培养基)
杂种细胞
整个制备过程要经过几次筛选?
(第一次筛选得到杂交瘤细胞(多种),
第二次需先在多孔培养板上,在每孔只有一个杂交瘤 细胞的情况下开始培养,然后再筛选出能产生特异性 抗体的细胞群。
细胞A
细胞B
物理法 化学法
仙台病毒 灭活的病毒 疱疹病毒
杂交细胞
新城鸡瘟病毒
1、动物细胞融合过程
不同DNA的两个细 胞 灭活病毒诱导细胞融合
融合后的细胞 进行有丝分裂
思考题
1、植物体细胞杂交前做何处理?怎么处理?
去壁
酶解法,如纤维素酶或果胶酶
2、动物细胞融合时需要进行去壁处理吗?为什么?
无需,因为动物细胞无细胞壁
下列与动物细胞培养有关的表述中,不正确的是 C
A.培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素 和动物血清 B.原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞 C.动物细胞培养一般能够传到40~50代,但其遗传物质 发生了改变 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身 健康细胞
生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不
二、单克隆抗体
提 问
1.抗体是由何种细胞产生的?
2. 如何得到抗体?
?
二、单克隆抗体
1、抗原
刺激
浆细胞 动物体内
抗体
2、特异性差、纯度低;产量低、反应不够灵敏
抗原 刺激
浆细胞
动物体内
抗体
抗原不纯
抗体不纯
筛选单一浆细胞
不能增殖产生大量抗体
二、单克隆抗体
如何获得化学性质单一、特异性强的抗体? 设计方案: 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖
3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些? 离心、振动、电激等物理方法;PEG等化学方法
思考题
4、动物细胞融合能利用上述两类方法吗?还有其他方法? 能 还可以利用灭活的病毒进行诱导
5、植物体细胞杂交过程应先进行原生质体融合再进行 组织培养形成完整的个体,动物细胞融合后能形成杂种 动物个体吗?