磁珠法提取DNA试剂盒磁珠法提取DNA试剂盒，它是生物科学和纳米材料科学二者合一的高新技术产品，是我国DNA提取技术和纯化技术的一次大的突破，它彻底的解决了我国DNA的提取与纯化长期依赖进口的局面，其价格只有进口产品的1/3。

中文名磁珠法提取DNA试剂盒属性高新技术产品学科生物科学和纳米材料科学二者合一贡献一次大的突破价格进口产品的1/3技术现状两个问题目录1背景2DNA提取技术现状3发展历程4适用范围5优势1背景众所周知,DNA提取技术是分子生物学研究的基础技术。

提取DNA的纯度及结构的实验，是进行基因工程各项研究所必须的条件，DNA提取技术是DNA检验的第一步骤，也是最关键的步骤。

能否成功地进行DNA检验，完全取决于能否从生物检材中获得纯量的DNA。

DNA提取技术的优劣，将直接关系下游实验的安全与成败。

2DNA提取技术现状就我国的DNA提取技术现状来讲，主要存在以下两个问题：1，技术发展滞后。

现在采用的DNA提取技术仍然停留chelex—100法。

有机提取法等常规方法上，存在着提取DNA不纯、耗时、效率低，不能定量提取和DNA提取后扩增成功率低等诸多缺陷。

2，缺少自主的知识产权。

美国、德国、挪威、芬兰等国家的生物公司，这些年来相继开发的新的DNA提取试剂盒，成功的解决了DNA提取纯化和定量提取等很多的难题，尤其是磁珠法可以实现自动化提取的技术更加的诱人。

但由于这些试剂盒基于专利技术，价格昂贵，不可能在国内推广使用。

应用于建立DNA数据库所需大量的生物样本的提取，更是可望不可及的事情。

3发展历程2005年7月25日，磁珠法提取DNA试剂盒在公安部第三期法医物证检验技术推广班上受到参会百余名专家学者的一致认可。

2005年11月30日，磁珠法提取DNA试剂盒通过公安部刑事技术产品质量监督检验中心检验。

2005年8月12日，磁珠法提取DNA试剂盒在教育部、初高中生物实验课经验交流会议上受到来自生物实验课知道老师的一致认可和好评。

2006年3月，中国动植物检验检疫所、国家质检总局食品安全局，农业部食品局达成意向，由动植物检验检疫研究所牵头，用磁珠法提取DNA试剂盒进行食品和实用油脂中转基因植物成分定性检测、试验。

4适用范围磁珠法提取DNA试剂盒是纳米技术、分子生物学技术、生物医学技术和法医学技术的综合高科技产品。

可广泛应用于分子生物学中的基因组研究、分子进化研究、医学中遗传病的研究、突变基因的检测、肿瘤的筛查、HPV等的检测、HLA分型、移植配型等、法医学生物样本血斑、精斑、头发、烟蒂等现场证物的检测、和司法上的亲子鉴定、血缘关系的鉴定等提供证据、考古学、大中小学的生物试验等许多领域。

磁珠法提取DNA试剂盒要比传统的方法，例如：Chelex100 法、有机法、二氧化硅法、盐析法等更为简单、方便，转移离心管的次数较少，不易污染等。

磁珠法在DNA纯化、微量检裁及PCR扩增等方面是其它方法不可代替的。

5优势独特的裂解液/蛋白酶K迅速裂解细胞并灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA选择性吸附于磁珠，再通过一系列快速的漂洗-分离的步骤，抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后用双蒸水即可将纯净基因组DNA从磁珠上洗脱。

产品特点：·不使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤，而且省去了离心步骤。

·快速简捷，一般可在36分钟内完成。

·不用多次漂洗磁珠也可确保高纯度，提取出的基因组DNA OD260/OD280典型的比值达1.7-1.9，长度可达2 0 k b - 5 0 k b，可直接用于P C R、Southern-blot和各种酶切反应。

·洗脱液可以用双蒸水代替，不影响下游酶切、连接等反应。

·适用范围：新鲜植物、动物组织，高温干燥过 DNA破坏比较严重的植物、动物组织，海洋生物，法医鉴定，新鲜哺乳动物血液或干血点，转基因食品·产品储存：·所有试剂均可室温保存·有效期达180天以上磁珠法核酸提取背景编辑自沃森、克里克的DNA双螺旋模型诞生，生物学进入到了一个全新的时代，在生物学界言必DNA，论必中心法则，对DNA的提取成为生物医药领域甚至农林牧渔等领域内所有学科科学研究的基础，随着基因诊断、转基因食品检测、个性化医疗等的快速发展，现在的核酸提取技术已经不能够满足当今生物技术的需要，急需能够高通量、自动化的核酸提取方法。

在这种背景下，磁珠法核酸提取应运而生(资料来源：惠尔纳米)。

2磁珠法核酸提取简介编辑磁珠法核酸提取试剂盒，是生物科学和纳米材料科学二者合一的高新技术产品，是我国核酸提取纯化技术的一次大的突破，它彻底的解决了我国核酸提取纯化长期依赖进口的局面。

磁珠法核酸提取，具有传统DNA提取方法无法比拟的优势，主要体现在[1-2]：①能够实现自动化、大批量操作，目前已有96孔的核酸自动提取仪，用一个样品的提取时间即可实现对96个样品的处理，符合生物学高通量的操作要求，使得传染性疾病爆发时能够进行快速及时的应对，这一特点使得传统方法望尘莫及；②操作简单、用时短，整个提取流程只有四步，大多可以在36-40分钟内完成；③安全无毒，不使用传统方法中的苯、氯仿等有毒试剂，对实验操作人员的伤害减少到最少，完全符合现代环保理念；④磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高、浓度大。

3磁珠法核酸提取原理编辑依据与硅胶膜离心柱相同的原理[3]，运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。

该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。

利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐（盐酸胍、异硫氰酸胍等）和外加磁场的作用下，能从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中的DNA 和RNA分离出来，可应用在临床疾病诊断、输血安全、法医学鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、分子生物学研究等多种领域。

4磁珠法核酸提取过程编辑磁珠法核酸提取一般可以分为四步：裂解——结合——洗涤——洗脱。

磁珠法核酸提取过程示意图惠彤磁珠法提取玉米种子电泳图6磁珠法核酸提取的行业推动作用编辑基因检测必将成为生物学产业发展的新标志，高通量、自动化核酸提取方法的产生为基因检测人力成本的降低、大批量检测成为现实，也使得基因检测走向普通百姓成为可能。

•1．王平康．磁珠法快速提取鉴定DNA的实验研究：生物学通报，2006．•2．ZMSaiyed．Isolation of genomic DNA using magnetic nanoparticles as a solid-phase support：physics:condensed matter，2008．•3．Boom．Rapid and simple method for purification of nucleic acids：clinica microbiology，1990．磁珠法分离纯化DNA原理及其步骤•磁珠法纯化DNA主要是利用利息交换吸附材料吸附核酸，从而将核酸和蛋白质等其细胞中其他物质分离。

本文主要概述了磁珠法纯化DNA原理、核酸分离与纯化的原则、核酸分离与纯化的步骤。

•磁珠法纯化DNA原理•磁珠法核酸纯化技术采用了纳米级磁珠微珠，这种磁珠微珠的表面标记了一种官能团，能同核酸发生吸附反应。

硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一层硅材料，来吸附核酸，其纯化原理类型于玻璃奶的纯化方式。

离心磁珠是指磁珠微珠表面包裹了一层可发生离心交换的材料(如DEAE，COOH)等，从而达到吸附核酸目的。

不同性质的磁珠微珠所对应的纯化原理是不一致。

使用磁珠法来纯化核酸的最大优点就是自动化。

磁珠在磁场条件下可以发生聚集或分散，从而可彻底摆脱离心等所需的手工操作流程。

Omega拥有全面的磁珠法核酸分离试剂盒，基于这种技术的试剂盒，名称前都有’Mag-Bind’。

•核酸分离与纯化的原则•核酸在细胞中总是与各种蛋白质结合在一起的。

核酸的分离主要是指将核酸与蛋白质、多糖、脂肪等生物大分子物质分开。

在分离核酸时应遵循以下原则:保证核酸分子一级结构的完整性：排除其他分子污染。

•核酸分离与纯化的步骤•大多数核酸分离与纯化的方法一般都包括了细胞裂解、酶处理、核酸与其他生物大分子物质分离、核酸纯化等几个主要步骤。

每一步骤又可由多种不同的方法单独或联合实现。

• 1. 细胞裂解:核酸必须从细胞或其他生物物质中释放出来。

细胞裂解可通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。

•(1) 机械作用:包括低渗裂解、超声裂解、微波裂解、冻融裂解和颗粒破碎等物理裂解方法。

这些方法用机械力使细胞破碎,但机械力也可引起核酸链的断裂,因而不适用于高分子量长链核酸的分离。

有报道超声裂解法提取的核酸片段长度从<500bp ～ > 20kb 之间,而颗粒匀浆法提取的核酸一般< 10kb。

•(2) 化学作用:在一定的p H 环境和变性条件下,细胞破裂,蛋白质变性沉淀,核酸被释放到水相。

上述变性条件可通过加热、加入表面活性剂(SDS、Triton X-100 、Tween20 、NP-40 、CTAB、sar-cosyl 、Chelex-100 等) 或强离子剂(异硫氰酸胍、盐酸胍、肌酸胍) 而获得。

而p H 环境则由加入的强碱(NaOH) 或缓冲液 ( TE、STE 等) 提供。

在一定的p H 环境下,表面活性剂或强离子剂可使细胞裂解、蛋白质和多糖沉淀,缓冲液中的一些金属离子螯合剂( EDTA 等) 可螯合对核酸酶活性所必须的金属离子Mg2+ 、Ca2+ ,从而抑制核酸酶的活性,保护核酸不被降解。

•(3) 酶作用:主要是通过加入溶菌酶或蛋白酶(蛋白酶K、植物蛋白酶或链酶蛋白酶) 以使细胞破裂,核酸释放。

蛋白酶还能降解与核酸结合的蛋白质,促进核酸的分离。

其中溶菌酶能催化细菌细胞壁的蛋白多糖N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸残基间的β-(1 ,4) 键水解。

蛋白酶K能催化水解多种多肽键,其在65 ℃及有EDTA、尿素(1～4mol/ L) 和去污剂(0. 5 %SDS 或 1 %Triton X-100) 存在时仍保留酶活性,这有利于提高对高分子量核酸的提取效率。

在实际工作中,酶作用、机械作用、化学作用经常联合使用。

具体选择哪种或哪几种方法可根据细胞类型、待分离的核酸类型及后续实验目的来确定。

• 2. 酶处理:在核酸提取过程中,可通过加入适当的酶使不需要的物质降解,以利于核酸的分离与纯化。

如在裂解液中加入蛋白酶(蛋白酶K 或链酶蛋白酶) 可以降解蛋白质,灭活核酸酶(DNase 和RNase) ,DNase 和RNase 也用于去除不需要的核酸。