(时间：90分钟；满分：100分)一、选择题(本题共20小题，每小题2.5分，满分50分)1．破译生物基因组DNA的遗传信息进行基因操作时，首先要提取细胞核DNA。
下列不．适宜作为提取DNA的实验材料的是()A．鸡血细胞B．蛙的红细胞C．人的成熟红细胞D．菜花解析：选C。
DNA主要分布于真核细胞的细胞核中，而人的成熟红细胞中无细胞核，故无DNA，因而不能用人的成熟红细胞作为提取DNA的实验材料。
2．在下列图示中，可以正确反映DNA溶解度与NaCl溶液浓度之间关系的是()解析：选C。
在NaCl溶液的浓度为0.14 mol/L时，DNA的溶解度最小，而蛋白质的溶解度较大；NaCl 溶液的浓度高于或低于0.14 mol/L时，随着其浓度的升高或降低，DNA的溶解度都会逐渐增大。
3．蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是()A．蒸馏水B．NaCl溶液C．NaOH溶液D．盐酸答案：B4．在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，有两次DNA沉淀析出：①DNA在NaCl溶液中的物质的量浓度为0.14 mol/L溶解度最低；②DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能够沉淀析出。
该实验依据的原理是()A．两次都是①B．两次都是②C．第一次是①，第二次是②D．第一次是②，第二次是①解析：选C。
DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低，而高于或低于这一浓度，DNA在NaCl 溶液中的溶解度都会增大；DNA不溶于酒精溶液，但是，细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，这样DNA 就可以沉淀析出。
5．在研究DNA的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。
用蛋白水解酶处理血样的目的是()A．除去血浆中的蛋白质B．除去染色体上的蛋白质C．除去血细胞表面的蛋白质D．除去血细胞中的所有的蛋白质，使DNA释放，便于进一步提纯解析：选D。
蛋白水解酶简称蛋白酶，能够催化多肽或蛋白质水解，所以这种酶可以分解血细胞中的所有蛋白质，有利于DNA的释放。
6．将含有DNA的滤液放在60～70 ℃的恒温水浴箱中保温10～15 min，可以得到含杂质较少的DNA，这一做法所依据的原理是()A．高温使蛋白质变性B．高温使DNA变性C．高温使蛋白质分解D．高温使DNA分解解析：选A。
大多数蛋白质不能忍受60～80 ℃的高温，而DNA在80 ℃以上才会发生变性。
在60～70 ℃的恒温水浴箱中保温，目的是使蛋白质发生变性，从而分离得到DNA。
7．在DNA的粗提取实验过程中，对DNA提取量影响较小的是()A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质B．搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C．在析出DNA黏稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直到黏稠物不再增多D．要用冷酒精沉淀DNA，甚至再将混合液放入冰箱中冷却解析：选B。
本题考查DNA的粗提取与鉴定的有关知识，同时考查学生对DNA提取原理的理解。
搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动的目的是防止DNA的细丝被打碎，但是打碎的DNA分子并不影响提取的DNA的含量；如果鸡血细胞破裂不充分，DNA等核物质释放不充分，DNA的提取量会减少；在析出DNA黏稠物时，加入蒸馏水的量不足，会使DNA不能充分析出，而如若加入蒸馏水的量过多，析出的DNA又会溶解，DNA的提取量也会减少；用冷酒精沉淀DNA甚至将混合液放入冰箱冷却的目的是抑制DNA水解酶活性，防止DNA降解，如果酒精冷却不充分，DNA析出量减少，DNA的提取量也会减少。
此类题目的解题方法是理解实验各个环节或操作的目的，突破的方法是将各个环节进行比较分析，找出其中的相互关系。
8．如图表示PCR扩增的产物，请分析它是哪次循环的产物()A．第一次循环B．第二次循环C．第三次循环D．第四次循环解析：选A。
在PCR反应中以引物为标记，第一次循环时，以加入的DNA为模板，两条DNA链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合，并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以，形成的每个子代DNA中只有一种引物。
从第二次循环开始，第一次产物的DNA分子又可作为模板参与反应，形成的DNA分子两端都含有引物。
9．PCR仪实质上是一台自动调控温度的仪器，下列关于它调控不同温度的目的叙述错误的是()A．95 ℃，使DNA分子变性，解开螺旋B．55 ℃，使DNA分子两条单链与两种引物结合C．72 ℃，使DNA分子开始复制，延伸D．72 ℃，使DNA分子恢复双螺旋结构，恢复活性解析：选D。
PCR利用DNA热变性的原理，当温度上升到90 ℃以上时，双链DNA解旋为单链，A 项正确；当温度下降到50 ℃左右时，两种引物通过碱基互补配对原则与两条单链DNA结合，恢复活性，B项正确；当温度上升到72 ℃左右时，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，从而实现DNA延伸，故C正确，D错误。
10．下列关于DNA复制的叙述，不．正确的是(多选)()A．DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5′端延伸DNA链B．DNA复制不需要引物C．引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D．DNA的合成方向总是从子链的3′端向5′端延伸解析：选ABD。
只认为B错误的原因是没有理解DNA复制过程以及DNA聚合酶的作用特点。
DNA 聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3′端延伸DNA链。
由于模板链首先复制的是3′端，即复制方向3′→5′，而DNA分子是反向平行的，子链是依据碱基互补配对原则，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向从子链的5′→3′。
11．在pH＝5.12时进行电泳，哪种蛋白质既不向正极移动也不向负极移动()A．血红蛋白：pI(等电点)＝7.07B．鱼精蛋白：pI＝12.20C．α1球蛋白：pI＝5.06D．β球蛋白：pI＝5.12解析：选D。
β球蛋白在pH＝5.12时不带电，在电泳时既不向正极移动也不向负极移动。
12．洗涤红细胞时，离心所采用的方法是()A．低速长时间离心B．低速短时间离心C．高速长时间离心D．高速短时间离心解析：选B。
高速或长时间离心，会导致白细胞和淋巴细胞一同沉淀，得不到纯净的红细胞，进而影响后面血红蛋白的提取纯度。
13．将猪的红细胞分别放在9%的NaCl溶液和蒸馏水中，表现出的现象分别是()A．都发生质壁分离B．无变化、涨破C．无变化、无变化D．皱缩、涨破解析：选D。
动物细胞由于没有细胞壁，不会发生质壁分离。
9%的NaCl溶液浓度已很高，红细胞会失水皱缩，在蒸馏水中则会吸水涨破。
14．将处理破裂后的红细胞混合液以2000 r/min的速度离心10 min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是()A．血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、细胞破碎物沉淀层B．甲苯层、细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层C．脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、细胞破碎物沉淀层D．甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、细胞破碎物沉淀层解析：选D。
混合液经离心后按密度大小排列，在离心管中从上到下的顺序依次是：第1层为无色透明的甲苯层，第2层白色薄层固体是脂溶性物质沉淀层，第3层红色透明液体是血红蛋白水溶液，第4层暗红色沉淀物主要是红细胞破碎物沉淀。
15．人们用鸡的红细胞提取DNA不用人的红细胞提取血红蛋白的原因是()A．鸡的红细胞无血红蛋白，人的红细胞有血红蛋白B．鸡的红细胞有线粒体，人的红细胞无线粒体C．鸡的红细胞有细胞核，人的红细胞无细胞核D．鸡的红细胞有氧呼吸，人的红细胞无氧呼吸解析：选C。
鸡(鸟类)的红细胞具有完整的细胞核，含有核DNA，便于进行DNA的提取；人的成熟红细胞无细胞核，结构简单，血红蛋白含量丰富，便于提取血红蛋白。
16．在提取血红蛋白的样品处理阶段，洗涤红细胞十分重要，其目的是()A．让红细胞破裂，释放血红蛋白B．洗去血浆蛋白C．防止血液凝固D．保证红细胞的正常形态解析：选B。
本题考查血红蛋白的分离中样品处理的原理。
血液中含有多种蛋白质，除红细胞内的血红蛋白，血浆中还含有多种蛋白质，这些蛋白质在血红蛋白释放出后会与其混合，需要在红细胞破裂前将其除去。
17．凝胶色谱法操作正确的是()A．将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴B．将橡皮塞下部切出凹穴C．插入的玻璃管的上部要超出橡皮塞的凹穴底面D．将尼龙网剪成与橡皮塞下部一样大小的圆片解析：选A。
凝胶色谱柱制作时，首先选择合适封堵玻璃管口的橡皮塞，将橡皮塞上部用刀切出锅底状的凹穴；插入的玻璃管的上部不得超出橡皮塞的凹穴底面；把尼龙网剪成与橡皮塞上部一样大小的圆片。
18．在实验室中，做PCR通常使用的微量离心管是一种薄壁塑料管，此过程可以使用玻璃离心管吗？为什么()A．可以，玻璃离心管、塑料微量离心管都可以使用B．不可以，玻璃离心管易碎，使用不安全C．不可以，玻璃离心管一般较大，不适合作为微量离心管D．不可以，玻璃离心管容易吸附DNA解析：选D。
本题考查多聚酶链式反应扩增DNA片段的有关知识。
DNA亲和玻璃，在进行DNA 操作时应用塑料器皿。
19．某考古学家在西伯利亚泰加林地区的冰中，发现了一种冰冻的已灭绝的巨型动物的肌肉，他想了解该巨型动物的DNA与现今印度大象的DNA的相似性，于是做了如下检测工作，其中正确的操作步骤及顺序是()①降低温度，检测处理后的杂合DNA双链②通过PCR技术扩增巨型动物和大象的DNA③把巨型动物的DNA导入大象的细胞中④在一定温度条件下，将巨型动物和大象的DNA水浴共热A．②④③B．②④③①C．③④①D．②④①答案：D20．下面说法不．正确的是()A．在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变B．缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成C．电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D．透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内解析：选D。
透析袋一般是用硝酸纤维素制成的。
透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。
透析可以除去样品中相对分子质量较小的杂质，或用于更换样品的缓冲液。
二、非选择题(本题共4小题，满分50分)21．(12分)回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题。
(1)下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述，正确的是()A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNAC．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D．在沸水中，DNA遇二苯胺会出现紫色反应(2)如下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。
①正确的操作顺序是________________________________________________________________________。