A standard
0.2
M standard = C standard× V standard
正常参考值为10-150 mg/dl。
注意事项
抽提时摇匀静置，待完全分层后才能吸取上层液， 吸取上层液时不能吸入下层液； 选用小试管时试管口径不能太细；
试管使用时必须要干燥；
实验完成后，试管和比色杯必须用皂粉洗干净， 不能有油污，将水甩干，倒置晾干； 枪头必须清洗干净，甩干
组成与含量 总 脂 400~700mg/dl (5 mmol/L) 甘油三酯 10~150mg/dl (0.11 ~ 1.69 mmol/L) 总 磷 脂 150~250mg/dl (48.44 ~ 80.73 mmol/L) 总胆固醇 100~250mg/dl (2.59 ~ 6.47 mmol/L) 游离脂酸 5~20mg/dl (0.195 ~ 0.805 mmol/L)
实验四
血清甘油三酯含量测定
Assay of Triglyceride content
一、目的与要求
1、了解血清(serum)甘油三酯含量测定的 正常值与临床意义
2、掌握血清甘油三酯化学法测定的基本原 理及主要技术方法
BACKGROUND
血浆所含脂类统称血脂， 包括：甘油三酯、磷脂、胆固醇及其酯以及游离脂酸。
PRINCIPLE
甘 FA 油 FA
FA
1、血清脂蛋白中的甘油三酯经正庚烷-异丙醇混合 溶剂抽提(isolated )后，脂蛋白变性，结合的甘 油三酯分离。
2、用氢氧化钾皂化(saponified)，使甘油三酯水解 成脂肪酸和甘油。
3、游离的甘油被过碘酸氧化(oxided)成甲醛，甲 醛与乙酰丙酮在铵离子存在下，缩合成黄色的3, 5-二乙酰-1, 4-二氧二甲基吡啶，
* 血脂含量受膳食、年龄、性别、职业及代谢等的影响，
波动范围很大。成人（空腹14~16 h）
BACKGROUND
➢ 甘油三酯
甘 FA 油 FA
FA
➢ 血脂与血浆中的蛋白质结合，以脂蛋白 (lipoprotein)形式而运输。
CM、VLDL、LDL、HDL
BACKGROUND
▪ People with high triglycerides always have conditions that increase the risk of coronary artery disease, diabetes, high blood pressure, and metabolic syndrome, which are the common causes of death in present-day.
➢ 切勿吸到下层液. ➢ 按下表操作:
上层液 下层液
Reagents, ml supernatant Isopropanol Saponifier KOH
Blank 0.5 2.0 0.4
Standard 0.5 2.0 0.4
Assay 0.5 2.0 0.4
➢ 混匀后，放置65℃水浴5min.
氧化显色(Oxidation and coloring)
➢ 在以上3管中, 各加入氧化试剂2ml,混 匀后再加乙酰丙酮各2ml.
➢ 充分混匀, 置 65℃ 水浴保温 15 min 使显色, 取出自然冷却.
➢ 用空白管调零, 420nm 波长比色, 记 录各管吸光度.
DATA ANALYSIS
血清甘油三酯浓度（ mg/dl ）
=
A assay ×1.0×0.2× 100
临床应用
血脂：血甘油三酯、血胆固醇
餐后甘油三酯会增高，检查时一定要空腹抽血 饮酒可引起血清甘油三酯浓度急性、短暂性升高，
抽血前几天禁止饮酒 正常人血清甘油三酯水平有随年龄增高的趋势 血清甘油三酯水平升高多见于糖尿病、肾病综合征、
急性胰腺炎、原发性高甘油三酯血症血症及 动脉粥样硬化等
Let’s begin
0.2
一
Extraction agent
正庚烷-异丙醇
2.0
2.0
0.04mol/L H2SO4
0.6
0.6
Assay 0.2 一
一 2.0 0.6
充分振荡10-15min； 静置分层后，吸取上层液。
皂化反应 (Saponification)
➢ 另取3支大试管, 标号,分别从抽 提小试管,移取0.5ml 上层液.
4、与同样处理的标准管进行比色(colorimetric assay )，测出甘油三酯的含量。
PROCEDURES
抽提 Isolation 小试管
Reagents, ml
Blank Standard
Serum
一
一
Standard solution
一
ห้องสมุดไป่ตู้
0.2
(1.0mg/ml)
Distilled water