1. 目的：建立无水枸橼酸的标准检验技术程序。

2. 范围：本公司生产的无水枸橼酸。

3. 责任者：检测中心。

4. 程序：4.1 中文名称：无水枸橼酸4.2 分子式：C6H8O74.3 分子量：192.104.4 性状4.4.1本品为白色结晶性粉末,无色晶体或颗粒,极易溶于水,易溶于乙醇,微溶于乙醚。

4.5 鉴别4.5.1 取本品少许，用直火炽灼，即缓缓分解，但不发生焦糖臭（与酒石酸的区别）。

4.5.2 本品显枸橼酸盐的鉴别反应4.5.2.1试剂4.5.2.1.1 稀硫酸4.5.2.1.2 高锰酸钾试液4.5.2.1.3 硫酸汞试液4.5.2.1.4 溴试液4.5.2.1.5 吡啶-醋酐（3：1）试液4.5.2.2试验取枸橼酸约10mg，溶于2ml水中，加稀硫酸数滴，加热至沸，加高锰酸钾试液数滴，振摇，紫色即消失；溶液分成两份，一份中加硫酸汞试液1滴，另一份中逐滴加入溴试液，均生成白色沉淀。

取枸橼酸约5mg，加吡啶-醋酐（3：1）约5ml，振摇，即生成黄色到红色或紫红色的溶液。

4.5.3本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集263图）一致。

4.6 检查4.6.1 试剂4.6.1.1 标准硫酸钾溶液4.6.1.2 25%氯化钡溶液（取氯化钡2.5g研细，加水10m溶解即得）4.6.1.3 醋酸钾试液4.6.1.4 比色用氯化钴液4.6.1.5 比色用重铬酸钾液4.6.1.6 比色用硫酸铜液4.6.1.7 无水甲醇4.6.1.8 吡啶4.6.1.9 碘4.6.1.10 二氧化硫4.6.1.11 醋酸4.6.1.12 氨试液4.6.1.13 氯化钙试液4.6.1.14 草酸铵溶液4.6.1.15 乙醇4.6.1.16 正丁醇4.6.1.17 铁标准溶液4.6.1.18 过硫酸铵4.6.1.19 30%硫氰酸铵溶液4.6.1.20 硝酸铅标准溶液4.6.1.21 硫代乙酰胺试液4.6.1.22 稀硫酸4.6.1.23 溴化钾试液4.6.1.24 盐酸4.6.1.25 醋酸铅棉花4.6.1.26 溴化汞试纸4.6.1.27 标准砷溶液4.6.1.28 碘化钾试液4.6.1.29 氯化亚锡试液4.6.1.30 锌粒4.6.1.31 醋酸盐缓冲液4.6.1.32 酚酞指示液4.6.2 器具与仪器4.6.2.1 纳氏比色管4.6.2.2 水浴锅4.6.2.3 干燥箱4.6.2.4 箱式电阻炉4.6.2.5 电子天平4.6.2.6 砷测定瓶4.6.3 操作步骤4.6.3.1 硫酸盐取本品1.0g，依法检查（附录1），与标准硫酸钾溶液1.5ml制成的对照液比较，不得更浓(0.015%)。

4.6.3.2 草酸盐取本品1.0g，加水10ml溶解后，加氨试液中和，加氯化钙试液2ml，在室温放置30分钟，不得发生浑浊4.6.3.3 易炭化物取本品1.0g，置比色管中，加95%硫酸10ml，在90±1℃加热1小时，立即冷却，如显色，与对照液（取比色用氯化钴液0.9ml、比色用重铬酸钾液8.9ml与比色用硫酸铜液0.2ml混匀）比较，不得更深。

4.6.3.4水分取本品，照水分测定法（附录2）测定，水分为7.5—9.0%。

4.6.3.5炽灼残渣不得过0.1%（附录3）。

4.6.3.6钙盐取本品1.0g，加水10ml溶解后，加氨试液中和，加草酸铵试液数滴，不得发生浑浊。

4.6.3.7铁盐取本品1.0g，依法检查（附录4）,加正丁醇提取后,与铁标准溶液1.0ml用同一方法制成的对照液比较,不得更深(0.001%)。

4.6.3.8 重金属原理：Pb2+＋H2S→PbS↓+2H+操作步骤：取本品4.0g，加水10ml溶解后，加酚酞指示液1滴，滴加氨试液适量至溶液显粉红色，加醋酸缓冲液（pH3.5）2ml与水适量使成25ml，依法检查（附录5），含重金属不得过百万分之五。

4.6.3.9 砷盐原理：As3++3Zn+3H+→3Zn2++AsH3AsH3+3HgBr2→3HBr+As(HgBr)3（黄色）操作步骤取本品2.0g，加水23ml溶解后，加盐酸5ml，依法检查（附录6）,应符合规定（0.0001%）。

4.7 含量测定4.7.1 试剂4.7.1.1 氢氧化钠标准溶液4.7.1.2 酚酞指示液4.7.2 仪器：电子天平4.7.3 操作方法：取本品约1.5g，精密称定，加新沸过的冷水40ml 溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（1mol/L）滴定，每1ml的氢氧化钠滴定液（1mol/L）相当于64.04mg的C6H8O7。

计算公式：V×M×0.06404含量 = ×100%GV—样品消耗氢氧化钠滴定液的体积（ml ）M--氢氧化钠滴定液浓度G—样品重量（g ）4.7.4 允许差：相对偏差不得超过0.2%附录：1、硫酸盐检查法2、水分测定法3、炽灼残渣检查法4、铁盐检查法5、重金属检查法6、砷盐检查法附件1：枸橼酸(无水)检验原始记录分发部门：质量副总、质保部、检测中心附录1：硫酸盐检查法1. 试验前准备1.1 仪器与用具1.1.1 选玻璃质量好，配对，无色（尤其管底），管的直径相等，管上刻度高低一致的50ml纳氏比色管。

1.1.2 容量瓶、移液管。

1.2 试药与试液1.2.1 标准硫酸钾溶液的制备：称取硫酸钾0.181g，置1000ml量瓶中，加水适量使2-）溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml相当于100ug的SO41.2.2 稀盐酸的配制：取盐酸234ml，加水稀释至1000ml即得。

1.2.3 25%氯化钡溶液2.原理：药物中微量的硫酸盐与氯化钡溶液在酸性条件下作用，生成硫酸钡的浑浊液，同一定量的标准硫酸钾溶液与氯化钡在同样条件下生成的浑浊液比较，判断药物中含硫酸盐的限量。

3.操作方法3.1 供试品溶液的配制：除另有规定外，取各该药品项下规定量的供试品，加水溶解使成40ml（溶液如显碱性，可滴加盐酸使成中性）；如溶液不澄清，滤过；置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，摇匀，即得供试溶液。

3.2对照品溶液的配制：取规定量的标准硫酸钾溶解，置50ml纳氏比色管中，加水使成约40ml，加稀盐酸2ml，摇匀，即得对照溶液。

3.3于供试溶液与对照溶液中，分别加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释使成50ml，充分摇匀，放置10分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较，即得。

3.4供试溶液如带颜色，除另有规定外，可取供试溶液两份，分置50ml纳氏比色管中，一份中加25%氯化钡溶液5ml，摇匀，放置10分钟，如显浑浊可反复滤过，至滤液完全澄清，再加规定量的标准硫酸钾溶液与水适量使成50ml，充分摇匀，放置10分钟，作为对照溶液，另一份中加25%硫酸钡5ml与水适量，使成50ml，摇匀，放置10分钟，按上述方法与对照溶液比较，即得。

4.结果与判断：供试品管的浑浊不深于对照管，则为符合规定，若深于对照管，则为不符合规定。

5注意事项与说明5.1供试品溶液加盐酸使成酸性，可防止碳酸钡或磷酸钡等沉淀生成。

5.2供试液如需过滤，应先用盐酸使成酸性的纯化水洗净滤纸中硫酸盐。

5.3硝酸盐的存在对浊度有影响，故必须先将硝酸盐加盐酸使成硝酸，在水浴中蒸干，赶去产生的硝酸后，再依法检查。

如：KNO3+HCl→KCl+HNO35.4反应灵敏度：最低检出量为 2ugBa2+，最低检出浓度为1:106。

附录2：水分测定法1．本法为容量滴定法2．原理本法是根据碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中能与水起定量反应的原理以测定水分，所用仪器应干燥，并能避免空气中水分的侵入；测定操作宜在干燥处进行。

3．费休氏试液的制备与标定3．1配制称取碘（置硫酸干燥器内48小时以上）110g，置干燥的具塞烧瓶中，加无水吡啶160ml，注意冷却，振摇至碘全部溶解后，加无水甲醇300ml，称定重量，将烧瓶置冰浴中冷却，通入干燥的二氧化硫至重量增加72g，再加无水甲醇使成1000ml，密塞，摇匀，在暗处放置24小时。

本液应遮光，密封，置阴凉干燥处保存。

临用前应标定浓度。

3．2标定用水分测定仪直接标定。

或取干燥的具塞玻瓶，精密称入重蒸馏水约30mg，加无水甲醇2-5ml，用本液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法（附录VIIA）指终点；另作空白试验，按下式计算。

WF = ———A-B式中 F为每1ml费休氏试液相当于水的重量，mg；W 为称取重蒸馏水的重量，mg；A 为滴定所消耗费休氏试液的容积，ml；B 为空白所消耗休氏试液的容积，ml；4．测定法精密称取供试品适量（约消耗休氏试液1-5ml），除另有规定，溶剂为甲醇，用水分测定仪直接测定；或将供试品置干燥的具塞玻瓶中，加无水甲醇2-5ml，在不断振摇（或搅拌）下用费休氏试液滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法（附录VIIA）指示终点，另作空白试验，按下式计算。

（A-B）F供试品中水分含量%= —————×100%W式中 A 为供试品所消耗费休氏试液的容积，ml；B 为空白所消耗费休氏试液的容积，ml；F 为每1ml费休氏试液相当于水的重量，ml；W 为供试品的重量，mg；附录3：炽灼残渣检查法1.试验前准备工作1.1 仪器和用具1.1.1 高温炉1.1.2 坩锅1.1.3 坩锅钳1.1.4 通风橱1.1.5 电炉1.2试药与试液硫酸2.原理：药物在高温（一般为700～800℃）加热破坏或变为可挥发性的物质而逸去，所残留的不易挥发的无机物（多为金属氧化物、碳酸盐、硫酸盐和氯化物等）经与硫酸作用转成硫酸盐后，再行炽灼至灰化完全，最后所留残渣，称为炽灼残渣。

3.操作方法3.1空坩锅恒重：取坩锅置于高温炉内，将盖子斜盖在坩锅上，经700℃-800℃炽灼约30-60分钟，取出坩锅，稍冷片刻，置于干燥器内并盖上盖子，放冷至室温（一般约需20分钟），精密称定坩锅重量，再在上述条件下炽灼约30分钟，取出，稍冷片刻，置于干燥器内，直至恒重，备用。

3.2称取供试品取供试品1.0－2.0g，或各该药品项下规定的重量，置恒重的坩锅内，精密称定。

3.3炭化将盛有供试品的坩锅斜置电炉缓缓灼烧（避免供试品骤然膨胀而逸出），炽烧至供试品全部炭化为黑色，并不冒浓烟，放冷至室温,“炭化”操应在通风橱内进行。

炭化除另有规定外，滴加硫酸0.5-1.0ml ，使炭化物全都湿润，继续在电炉上加热至硫酸蒸气除尽，白烟完全消失（以上操作应在通风橱内进行），将坩锅移置高温炉内，盖子斜盖于坩锅上，在700～800℃炽灼约60分钟，使供试品完全灰化。

3.4恒重 按操作方法 3.1自”取出坩锅稍冷片刻”起，依法操作，直至恒重。

3.5计算炽灼残渣＝残渣与坩锅重一空坩锅重×100％供试品重量4.结果与判定计算结果 按有效数字修约规程，使与标准中规定限度的有效位数一致，其数值小于或等于限度时，判为符合规定；其数值大于限度时，判为不符合规定。