• 触酶阳性，无动力，无芽胞 • 吕氏血清斜面的菌落：灰白色、隆起、湿润 • 亚碲酸钾血平板的菌落：黑色或灰黑色
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毒力试验
• 人类临床标本中检出白喉棒状杆菌，并非 都能产生毒素，产生外毒素的菌株是由于 携带β-棒状杆菌噬菌体。可用 Elek 琼脂 扩散法体外试验或用动物体内毒力测定。
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(1)琼脂平板毒力试验：
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电镜下的白喉杆菌
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形态与染色
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革兰染色白喉棒状杆菌
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2. 培养特性：
本菌为需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格， 在一般培养基上不生长。
在吕氏血清斜面上生长快，菌落为细小有光泽、 圆形、灰白色、凸起、光滑的菌落；涂片染色菌体 形态典型、异染颗粒明显。
在亚碲酸钾血平板上，可形成黑色或灰黑色菌 落。此培养基可作为选择和鉴定之用。
第十二 章
革兰阳性需氧和兼性厌氧杆菌
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总体概述
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本章内容
• 革兰阳性无芽胞杆菌
– 白喉棒状杆菌 – 产单核细胞李斯特菌 – 红斑丹毒丝菌
• 革兰阳性需氧芽胞杆菌属
– 炭疽芽胞杆菌 – 蜡样芽胞杆菌
–革兰染色：观察形态、染色 –异染颗粒染色：观察异染颗粒 –初步报告：检出具有异染颗粒的革兰阳性杆菌
• 分离培养：同时接种血平板及吕氏斜面或亚碲酸 钾血平板
–吕氏斜面：生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显 –亚碲酸钾血平板：黑色菌落
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鉴定要点
• 革兰阳性，着色不均匀，菌体细长弯曲，排列不 规则，有X、V形态，具有异染颗粒
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教学要求
• 掌握白喉棒状杆菌、炭疽芽孢杆菌生物学性状与 微生物学检验。
• 熟悉产单核细胞李斯特菌的生物学性状与微生物 学检查法。
• 了解红斑丹毒丝菌、蜡样芽胞杆菌的生物学性状 与微生物学检查
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第一节 革兰阳性无芽胞杆菌
一、白喉棒状杆菌
（一 ）生物学特性
1. 形态结构：革兰氏染色阳性，菌体细长弯曲， 一端或两端膨大呈棒状，常排列呈V、L等文字 形。无鞭毛、无荚膜、无芽胞。用亚甲蓝或奈 瑟染色，菌体一端、两端或中央可见明显的浓 染颗粒，称为异染颗粒，主要成分是核糖核酸 和多磷酸盐。
猫、鸟、鱼等） • 正常人粪便带菌率达10%左右，70%的人可短期带
菌。新生儿、免疫功能降低者，易受该菌感染
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（三）临床意义
• 健康带菌者是主要的传染源 • 污染食物，粪-口途径传播，通过肠道扩散全身 • 胎盘和产道——感染新生儿 • 接触病畜及产品——眼和皮肤的局部感染
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第二节 革兰阳性需氧芽胞杆菌属
• 炭疽芽胞杆菌 • 蜡样芽胞杆菌
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炭疽病疫情
• 据新华社电2011年8月 12日，从辽宁省卫 生厅获悉，辽宁鞍山海城市和岫岩县近日 发生的皮肤炭疽传染病疫情，截至11日20 时病例报告数已增至30例，其中临床确诊 病例3例，疑似病例27例，无死亡病例。
• 据调查，辽宁这次疫情是由于当地居民私 自屠宰或接触病牛而感染发生的
（二）微生物学检验
• 标本的采集 • 鉴定
– 直接涂片 – 分离培养 – 毒力试验
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1. 标本的采集
用无菌长棉拭子从疑为假膜的边缘采取分 泌物，也可采取鼻咽部或扁桃腺分泌物。作 培养时应在抗生素前采取，如不能立即送检， 应将标本浸于无菌生理盐水或15%甘油中，标 本应取双份。
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2. 鉴定
• 直接涂片染色镜检
4℃冰箱中冷增菌，然后转种于血琼脂平板
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（二）微生物学检验
–鉴定特点：G+杆菌，细菌在湿片中呈翻筋斗运 动，触酶阳性等
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（三）临床意义
• 李斯特菌属有7个种，只有该菌对人和动物致病 • 分布广泛，土壤、水、植物、人和动物粪便中均
存在，亦可自甲壳动物、蝇、蜱中分离出 • 能引起多种野生动物和家畜感染（羊、马、狗、
• 生化反应：触酶（+），甲基红（+），VP（+）， CAMP（+），发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖等，产酸 不产气
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（二）微生物学检验
• 标本采集：血液、脑脊液、分泌物及病变组织等 • 鉴定：
–直接涂片：脑脊液离心后取沉淀涂片，其它直接涂片 –分离培养：
• 脑脊液：血琼脂平板 • 血标本：增菌后，再接种血琼脂平板 • 咽拭子、组织和粪便等：接种于肉汤培养基中，置于
将含有20％牛血清肉汤琼脂注于平皿 中，将浸有lOOu／ml抗毒素血清的滤纸条 沉于琼脂内，在与滤纸条垂直方向将待检 菌划线接种，同时接种标准产毒株作为阳 性对照。37℃培养 24—48h，若菌苔两侧 出现斜向外侧延伸的乳白色沉淀线，并与 其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合，则 为产毒株。
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Elek平板试验结果
白喉杆菌菌苔
沉淀线(阳性) 含白喉抗毒素滤纸片
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(2)动物试验
采用家兔皮内试验法。取待检菌的48h肉汤 培养液O．2ml，注射在去毛的一侧体壁皮内， 5h后注射500U白喉抗毒素血清，30min后再次注 射同样的培养液于动物去毛的另一侧体壁皮内 作为对照。经24—72h后，若注射抗毒素前接种 培养液的部位发生红肿与坏死，而对照部位不 发生任何变化，则说明待检菌株具有毒力。
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（三）临床意义
• 传染源：患者或带菌者 • 致病物质：白喉外毒素（由携带β-棒状杆菌噬菌
体的白喉杆菌产生） • 经呼吸道飞沫感染，引起白喉。 • 假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因 • 中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因 • 抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用
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二、产单核细胞李斯特菌
（一）生物学特性 （二）微生物检验 （三）临床意义
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（一）微生物特性
• 形态与染色：G+短小杆菌或球杆菌，常成双排列， 无芽胞
• 培养特性：最适30～37℃， 4℃能生长，在血琼 脂平板上，形成较小、圆形、光滑而有狭窄β-溶 血环的菌落，耐8.5%NaCl，半固体培养中动力阳 性（倒伞形，是本菌特征之一）。
在麦康凯平板上不生长。
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血平板上菌落
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亚碲酸钾血平板菌落：
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ11
3. 生化反应
–发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气。 –触酶和硝酸盐还原试验阳性，氧化酶阴性。 –不分解尿素，不产生吲哚。
4. 抵抗力
对热抵抗力强，煮沸1分钟死亡。对干燥、寒 冷和日光的抵抗力较其他无芽胞细菌强，对一 般消毒剂敏感。
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