ApaI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5'GGGCC^C 3' BamHI（类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' G^GATCC 3' BglII （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' A^GATCT 3' EcoRI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' G^AATTC 3' HindIII （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' A^AGCTT 3' KpnI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' GGTAC^C 3' NcoI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' C^CATGG 3' NdeI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' CA^TATG 3' NheI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' G^CTAGC 3' NotI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' GC^GGCCGC 3' SacI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' GAGCT^C 3' SalI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' G^TCGAC 3' SphI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' GCATG^C 3' XbaI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' T^CTAGA 3' XhoI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' C^TCGAG 3'
Trx-tag硫氧还蛋白标签是个融合标签，有利于蛋白可溶性表达。

His-tag是纯化标签，能与Ni柱亲和层析，便于下游蛋白纯化，2个His-tag分别设计在N,C 端、自己通过选择酶切位点选择其中的一个就可以。

S-tag是用于做western blotting 分子杂交鉴定的，能与Anti-S-tag产生抗原抗体反应。

thrombin 不是凝血酶，是凝血酶酶切位点，enterokinase也不是肠激酶，而是肠激酶酶切位点，因为pET32是融合表达载体，为了让你可以得到非融合的目标蛋白，设计了这两个蛋白酶酶切位点，用于表达后的融合标签去除。