LOGO
实验数据表格
分析日期：
土壤样品 重复 吸取待测液 体积（ ml ） OD值 全磷含量 （g/kg） 平均值±标 准误差
1 2
3 1 2 3
附：实验流程

LOGO
每组7个容量瓶（1个做空白，3个测定A待测液，3个测定B待测液）
4)钼锑抗法要求显色液中硫酸的浓度为0.23~0.33mol.L-1。如果酸度小于 0.23mol.L-1，虽然显色加快但稳定时间较短，如果酸度大于0.33mol.L-1， 则显色变慢。

LOGO
作业
1. 列出影响实验结果的因素或者关键步骤，且根据结果对土 壤样品做出评价。 2. 比较不同样地土壤全磷含量的差异并作简要分析 。
注意I: 显色液中含磷量 在20-30g最好，可通 过称样重和最后显色时 吸取待测液体积进行控 制。建议量取2-3ml
加2~3滴二硝基酚指示剂，调节pH，溶液刚呈微黄色
加入钼锑抗显色剂5ml，用水定容至刻度，摇匀
室温高于15℃的条件下放置30min 700nm的波长比色 录数据入表
注意III:钼锑抗法要 求显色温度为 15~60℃，如果室温 低于15℃，可放置在 30~40℃烘箱中保温 30min，取出冷却后 比色。
磷酸钙、镁（如磷酸八钙、十钙等） 磷酸铁、铝（如红磷铁矿）
其他复合磷酸盐（如氟磷灰石）
正磷酸盐（磷酸一钙、磷酸二钙等）
有机磷：占全磷的20%-50%
磷脂 核酸、核蛋白 植素（如肌醇六磷酸钙镁等）

LOGO
土壤中磷的主要来源
1.岩石风化而来。
2.人为施入土壤的含磷肥料 。

LOGO
5 注意事项
1)最后显色液中含磷量在20-30g最好，可通过称样重和最后显色时吸 取待测液体积进行控制。
2)样品批量测定时，加入浓硫酸后放置数小时，甚至过夜，可缩短消化时间。
3)钼锑抗法要求显色温度为15~60℃，如果室温低于15℃，可放置在 30~40℃烘箱中保温30min，取出冷却后比色。
LOGO
土壤全磷含量的测定
2014年3月10-13日

LOGO
实验目的
1. 了解土壤中磷的存在形式及来源。
2. 通过对土壤全磷含量的测定，掌握土壤全磷测定的原理和 方法。

LOGO
土壤全磷的存在形式
无机磷：占全磷的50%-80%

LOGO
2 待测液的测定
1）吸取澄清后的消化液2.00~10.00ml（含P 5~25g），放入50ml容量瓶
中，加水稀释至约30ml。 2 ）加 2~3 滴二硝基酚指示剂，用4mol.L-1 的 NaOH 溶液和 1mol.L-1 稀硫酸 调节pH至溶液刚呈微黄色（指示剂酸方色为无色，在显色酸度时， 指示剂本身不会带来颜色干扰），摇匀。 3）加入钼锑抗显色剂5ml，用水定容至刻度，摇匀。 4）在室温高于15℃的条件下放置30min后，在分光光度计上用1cm光径 比色皿700nm的波长比色，以空白试验溶液作为参比液调零点，读取 吸收值，利用标准曲线上计算出显色液P mg.L-1数，溶液颜色在8h内 可保持稳定。

LOGO
实验原理
土壤样品经浓硫酸和高氯酸高温消化，使土壤中有 机磷、无机磷经脱水碳化、氧化还原等一系列作用，最终 转化成正磷酸盐。溶液中的正磷酸盐磷在钼酸铵和酒石酸 锑钾的作用下，形成磷钼锑三元杂多酸，然后被抗坏血酸 还原为磷钼蓝，可用比色法测定。

LOGO
方法与步骤
1 待测液的制备（已备好）
称取通过100目筛孔的烘干土样1.0g置于100 ml消化管底部（勿将 样品黏附在瓶颈上）。先滴入少许水润湿样品，在加浓硫酸5ml，摇 匀放置30min（或放置过夜，可缩短消煮时间），然后加入60%高氯 酸10滴，摇匀。消化炉上加热消化，直至消化液转为白色，表示消化 完全，继续消化20 min（如长时间消化，溶液仍为黑色或棕色，则可 将消化管取下，冷却，补加高氯酸1~2滴置消化炉上继续消化），全 部消化时间约2.5小时，取下，冷却，将消化液无损的转移至100ml容 量瓶，冷却至室温后定容，放置澄清后吸取清液供磷的测定。 同时做空白试验。

LOGO
4、结果计算
V m
土壤全磷含量测定（g/kg）= ρ×
× ts × 10-3
ρ——从校准曲线求得的显色液中磷的浓度，mg.L-1 m——烘干土样质量，g V——显色时溶液定容的体积，ml 10-3——将g数换算成每土壤中含磷的g数 ts——分取倍数，ts=消煮待测液定容体积/测定时吸取待测液的体积
待测液的制备（已备好）
吸取澄清后的消化液2.00~10.00ml（含P 5~25 g ），放入50ml容量瓶中，加水稀释至约30ml
注意II:钼锑抗法要求显 色液中硫酸的浓度为 0.23~0.33mol.L-1。如果 酸度小 于0.23mol.L-1， 虽然显色加快，但稳定 时间较短，如果酸度大 于0.33mol.L-1，则显色 变慢。

LOGO
磷标准曲线
磷标准液在700nm处的标准曲线 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 0
y = 0.7339x + 0.006 R 2 = 0.9993
吸光度值
0.2
0.4
0.6
0.8
磷标准液浓度（mg.L -1 ）
LOGO
仪器与设备：
土壤筛：孔径0.149mm 分析天平 分光光度计 消化炉
试剂：
硫酸（密度1.84g.ml-1, 分析纯） 氢氧化钠溶液（c=4mol.L-1） 硫酸（c=1mol.L-1 ） 高氯酸（c=60%） 二硝基酚指示剂 硫酸钼锑储备液 钼锑抗显色剂
分光光度计
消化炉


LOGO
3 标准曲线的绘制（已备好）
分别准确吸取5mg.L-1磷标准溶液 0、1、2、3、4、5、6 ml于 50ml容量瓶中，加水稀释至约30 ml。加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀定 容。即得含磷(P)量分别为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mg.L-1的标 准溶液系列。摇匀，于15℃以上温度放置30 min后，1cm光径比色皿 700 nm波长比色，用0 mg.L-1磷标准系列显色液作参比液，调节吸收 值到零，由稀到浓测标准系列显色液的吸收值，以吸收值为纵坐标， 磷浓度(mg.L-1)为横坐标，绘制标准准曲线。