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叶绿素测定办法

分光光度法测定叶绿素含量
一、实验目的
1.了解植物组织中叶绿素的分布及性质。

2.掌握测定叶绿素含量的原理和方法。

二、实验原理
叶绿素广泛存在于果蔬等绿色植物组织中,并在植物细胞中与蛋白质结合成叶绿体。

当植物细胞死
1.
2.—比尔
叶绿素a

提取液在a、叶绿素b
仪器
原料
新鲜(或烘干)的植物叶片
试剂
1.96%乙醇(或80%丙酮)
2.石英砂
3.碳酸钙粉
四、操作步骤
取新鲜植物叶片(或其它绿色组织)或干材料,擦净组织表面污物,去除中脉剪碎。

称取剪碎的新鲜样品2g,放入研钵中,加少量石英砂和碳酸钙粉及3mL95%乙醇,研成均浆,再加乙醇10mL,继续研磨至组织变白。

静置3~5min。

取滤纸1张置于漏斗中,用乙醇湿润,沿玻棒把提取液倒入漏斗,滤液流至100mL棕色容量瓶中;用少量乙醇冲洗研钵、研棒及残渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中。

用滴管吸取乙醇,将滤纸上的叶绿体色素全部洗入容量瓶中。

直至滤纸和残渣中无绿色为止。

最后用乙醇定容至100mL,摇匀。

取叶绿体色素提取液在波长665nm、645nm和652nm下测定吸光度,以95%乙醇为空白对照。

五、计算。

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