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第六章黄酮类化合物 鉴定

PC 适于分离各种天然黄酮类化合物及其苷 类的混合物。 黄酮苷:一般采用双向展开
BAW
第一向


第二向 HOAc
黄酮类化合物的检识和结构鉴定
第一相展开采用醇性展开剂 如: BAW n-BuOH: HOAc:H 2O=4:1:5 上层
TBA t-BuOH: HOAc: H 2O=3:1:1 水饱和n-BuOH 层析行为: Rf值: 苷元>单糖苷>双糖苷 一般:苷元在0.70以上,而苷则小于0.7。
黄酮苷及花色素类的分离鉴别
纸层析(PC):采用双向纸层析 。 苷元: 平面型分子 : 黄酮(醇)、查耳酮的 Rf小, 几乎留在
原点不动 (Rf < 0.02); 非平面型分子 : 二氢黄酮 (醇)、二氢查耳酮的 Rf大,
因亲水性较强 (Rf 0.10-0.30) 。 层析检查方法: ①观察荧光 ,用紫外光灯照射看到有色斑点, NH3处 理
第II向 水性展开剂
(2~8%HAc 、3%NaCl、1%HCl )
正相色谱 固定相(水)极性 > 流动相
反相色谱 ( 有认为是吸附原理)
Rf规律:极性小的化合物Rf大
极性大的化合物Rf大
苷元>单糖苷>双糖苷
Rf规律与左边相反
母核相同,二-OH> 三-OH> 四-OH> 五-OH黄酮
主要应用:苷元的分离鉴别
PC
BAW
C B A
原点
OH
O
OH
OH
O
A
OH
O
OH OCH 3 O
B
H3CO
O
OH OCH 3 O
C
OH OH
OH OH
OH OH
glc-O
B A
glc-O D C
glc-O O
OH
O A
O
OH OH
OH O
C
glc-O
O
O B
O
OH O
D
OH OH
聚酰胺薄层 (乙醇/水)
二、纸色谱法(PC)
(1)硅胶TLC( 条件CHCl 3—MeOH 4:1 展开), Rf值( )>( )>( )>( )
(2)聚酰胺TLC( 条件60% 甲醇—水展开), Rf值( )>( )>( )>( )
(3)纸色谱(条件8% 醋酸水展开), Rf值( )>( )>( )>( )
产生明显的色变。 ②用2%AlCl 3甲醇液喷雾 ,UV灯下呈亮黄色荧光斑点 。
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习题
有下列四种黄酮类化合物
R2O
O
A、R 1=R 2= H
OH
B、R1=H, R2=Rha
C、R D、R
11==GGllcc,,
R R
22==HRha
OR1
OHOLeabharlann 比较其酸性及极性的大小: 酸性( )>( )>( )>( ) 极性( )>( )>( )>( ) 比较这四种化合物在如下三种色谱中 Rf 值大小顺序:
第6章 黄酮类化合物
----黄酮类的鉴定
鉴定
一、薄层色谱法(TLC ) 二、 纸色谱法(PC)
一、 薄层色谱法
一般采用吸附薄层,吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。
(1)硅胶薄层色谱: 用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物 分离苷元常用展开剂:甲苯 -甲酸甲酯 -甲酸;氯仿 -甲醇等。
(2)聚酰胺薄层色谱:分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。 展开剂:具有较强的极性,大多含有醇、酸或水 如:乙醇-水(3:2), 水-乙醇-甲酸-乙酰丙酮 (5:1.5:1:0.5)
纸色谱
A
苷元B
D
C
第二相展开采用水性展开剂
B
C
如:2~6% HOAc 水溶液
3% NaCl 水溶液
HOAc: 浓HCl:H 2O= 30: 3 : 10
苷元
层析行为: 连接糖链越长, Rf 越大(>0.5);
A
D
苷元Rf较小,有的留在原点。
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双相色谱
第I向 醇性展开剂
(BAW、TBA 、水饱和正丁醇)
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