医学生物学实验
医学微生物教研室
2011年6月
精品课件
实验八
脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定
精品课件
实验内容
脓汁标本中金黄色葡萄球菌的鉴定
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目的
熟悉临床标本中常见化脓性细菌的分离鉴定程 序；掌握细菌分离培养的基本技术。
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实验器材
标本：脓拭子、感染分泌物或模拟脓汁标本 菌种：金黄色葡萄球菌培养物、表皮葡萄球菌 培养基：血琼脂平板、甘露醇发酵管 其他：血浆、生理盐水、革兰染液、玻片、滴管
于玻片玻片左右二侧菌悬液中各加血浆一滴并轻轻摇匀
1~3分钟内观察结果，出现颗粒状凝集为血浆凝固酶试验 阳性，否则为阴性
结果报告：
标本+Leabharlann 浆 白葡菌+血浆阳性（+）/阴性（─）
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检查方法和结果报告
甘露醇发酵试验：无菌操作取标本和白葡菌（阴性对 照）培养物分别接种于甘露醇发酵管，其上覆盖无菌 液体石蜡油，37℃培养18~24小时，观察结果。金 葡菌发酵甘露醇产酸，使培养基变混充，颜色由紫色 变黄色，是为甘露醇发酵试验阳性，而白葡菌相反。
直接显微镜检查：取标本直接涂片，均匀涂成菌 膜，自然干燥，固定后革兰染色，油镜观察。
金黄色 葡萄球菌
革兰染色镜检
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形态
排列 染色性
注：若染色后未发现细菌，可报告“直接镜检未发现细菌”
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检查方法和结果报告
细菌分离培养：取脓液或创伤分泌物接种于血琼脂平板上 （接种后4℃保存），划线分离，37℃培养18~24h后，观 察菌落特征，取单个菌落进行革兰染色镜检。
标本+甘露醇
阳性（+）/阴性（─）
注：第2天观察记录结果
精品课件
白葡菌+甘露醇
实验报告
本次实验的目的要求、器材、检查原则、标本检 测程序 （简要）、结果报告和结论
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培养箱、 酒精灯、接种环等
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检查原则
在脓汁标本中，以化脓性球菌最为常见，本实 验主要检测金黄色葡萄球菌
用药前采集标本 无菌操作
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标本检测程序
脓汁、脓性分泌物（未知菌液/固体培养物）
直接
涂片 革兰染色 镜检
接种 血琼脂平板
菌落观察
血浆凝固酶试验
甘露醇发酵
精诊品课断件报告
检查方法和结果报告
血平板培养结果观察
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菌落特点 溶血性 菌落颜色 金黄色 葡萄球菌
注：第2天观察记录结果；如培养48~72h后仍然无菌生长， 则报告“无细菌生长”。
精品课件
检查方法和结果报告
血浆凝固酶试验（玻片法）：
用灭菌接种环取标本和白葡菌（阴性对照）培养物少许， 分别与玻片左右二侧的生理盐水制成均匀菌悬