手套 对于从事生物病原的人使用乳胶、腈、乙烯树脂材 料的手套 测验的手套不应再用，实用的手套能消毒再用，如 果它们没有变形的征兆。 考虑弹性和手掌的长度 双层手套 危险处理办公室对那些具有过敏的人提供帮助，找 到替换材质的手套。 在公共场所不要带实验手套
56
个体防护设备
眼和脸防护 护目镜、安全眼镜可以保护眼睛
49
混匀器、研磨器、超声破碎器和冷冻干燥器
尽可能地在BSC内操作，再打开前静置5分钟以使 气溶胶沉降。 安全地混匀
• 不要用玻璃混匀罐 • 使用后立即清除污染
冷冻真空干燥器
• 使用玻璃制造的真空部件时，确保使用前无损坏。 • 使用后所有的表面都要消毒 • 尽可能使用真空蒸发套
50
接种环
在开放的火焰上灭菌可能产生含有活微生物的气 溶胶 柄越短，越能减少震动 一次性的塑料接种环是较好的替代
生
物
安
全
概
要
姚振江
流行病与卫生统计学系
广东药学院
1
以前的实验室...
现在的实验室对个人防护有了新的要求...
2
生物安全概要
简介 实验室内感染 生物危害分类 感染/生物危害控制 溢出响应 生物医学废弃物处理 总结
3
什么是生物安全?
从业人员处理生物危害材料时的措施，以 避免感染自己、他人或环境
达到此目的主要通过：
43
一般实验室安全指导方针
基本的常识,你必须了解你所面对的实验室的危险， 并且经过正确的培训以便处理这些危险。 最基本的是知道所有的实验危险 举出5个例子?
使用移液管和移液器 使用接种环 分离血清 打开安瓶 使用离心机
b i osa f e t y44来自 良好的微生物实践 (GMP)
基本的使用标准适用于所有的微生物学实验工作 目的
面罩可以保护面部皮肤
呼吸罩
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溢出
溢出反应不同主要基于：
• 溢出的是什么？ • 溢出多少？ • 在哪里溢出的? • 对环境潜在的风险是什么？
溢出物应该被立即清理（除非产生了气溶胶），确 保正确的去除污染方法 确保恰当的使用个体防护设备，清除设备容易使用
58
溢出 一般清理
用吸收性物质盖住溢出区域 用恰当的消毒剂（10%漂白剂）浸泡溢出区 从吸收性物质的外围向内倒消毒剂 确保每个玻璃碎片都被捡起（用镊子！）并将其放入 尖锐物品盛放器内。 作用20-30分钟 擦拭掉吸收性物质 废弃物应放入适当的生物危害物品袋，以便高压灭菌 处理
11
如果发生了暴露或可能发生了暴露
开始急救 通知你的管理者或指定的人 向医院的急诊部门或大学的卫生服务部门 报告 向职业卫生、伤残和死亡办公室报告（电 话或网络）
12
全面预防
预防血传病原体传播的最简单的行之有效的方法 包括:
教育 洗手 穿防护设备 使用安全的工作规程
如果不能保证样品的非感染性，按照感染性样品处理 If samples cannot be guaranteed non-infective …… treat as infectious!
38
行政管理控制
风险评估
确定防护的种类,方法和所需的安全设备 使用者的职责, 能从ORM得到的帮助 考虑的方面有:实验设计,方法,个人的经验和知识 情况等
* http://www.hc-sc.gc.ca/pphb-dgspsp/ols-bsl/lbg-ldmbl/pdf/lbg-3e-draft.pdf
6
实验室感染
感染源
培养物和储存物 研究的动物 标本
易感宿主
免疫系统 免疫状况 年龄
传播途径
经皮接种
吸入气溶胶
粘膜接触
食入
7
实验室感染
只有20% 可查到原因
80% 是由人为的错误造成的 20% 是由于设备故障造成的
排在前4位的导致感染的事故
溢出或溅出 注射器及针 尖锐的物体，碎玻璃 动物或体外寄生虫的抓伤或咬伤
8
实验室感染
谁
研究者
什么
SARS
微生物学家
西尼罗病毒
实验室工作人员 流脑
实验室工作人员 牛痘病毒
哪里
台湾 美国 美国 欧洲
何时
2003年12月 2002年8月 2000年 2002年
如何
划伤 气溶胶? 接触
9
实验室感染
1979－1999年间实验室相关感染（LAI）的统计
10
暴露的风险
有关的病原体 体液的类型 暴露的途径 暴露的持续时间暴露过程中的血液量 此次暴露病毒的浓度 个人保护设备使用
生物安全柜
对生物病原物理防护的有效方法， 尤其当产生气溶胶时。 高效分子空气过滤器能以99.97% 的效率去除颗粒（最小 0.3微米） 有三个主要级别的安全柜（ I, II, III ） 能提供不同水平的保护。
33
在生物安全柜内安全操作
使用前:
确保生物安全柜经过检验 关闭紫外灯，打开荧光灯 用适宜的消毒剂消毒工作 台面 将最基本的条目放入安全 柜 在工作之前，让排风机运 转 5-10 分钟
标记 & 标签
生物危害标记必须粘贴在使用生物 危害材料的实验室的门上 生物危害标签应贴在使用生物病原 的容器、设备和储存装置上
42
实践和规程
总的安全指导方针 好的微生物学实践 洗手 专门的规程
离心机 注射器、针头和其他的尖锐物 移液管 混匀器、研磨器、超声破碎仪、冷冻真空干燥 器 接种环 冷冻切片机
13
生物危害的分类
常见病原体 非传统的病原体 重组 DNA 组织培养 动物工作 解剖的标本
14
_
生物危害的等级
BSL 4 BSL 3 BSL 2 BSL 1
_
水平按箭头方向由低到高
微生物对人、动物、植物和/或环境的危险性 程序和设备需求 围堵策略水平需求 对人员、环境和社区的保护程度
15
常见病原体的等级
4
High
High
Likely to cause very serious
disease
Level 1
大肠杆菌 细杆菌
Level 2 Level 3
大肠杆菌 0157:H7, 链球菌、沙门 氏菌、腺病毒、肝炎病毒A、B、 C，流感，麻疹。
炭疽杆菌，结核分支杆菌，汉坦 病毒，HIV，黄热病度
Level 4
预防实验室人员和环境被污染 预防实验或样本被污染 无菌操作、减少气溶胶产生、控制污染、个人防 护、应急反应。
45
洗手
预防感染的单纯有效 的方法之一 如果经常正确的执行 何时洗手？
Level 1 lab - a non antiseptic soap can be
used Level 2 lab requires antiseptic hand washing solutions
25
生物安全防护水平
防护水平与危险水平相似 生物安全委员会将对研究提案进行评估以确保防 护水平恰当。
一级 二级 三级 四级
26
一级水平
最基本的实验室 不需要特别的设计特性 不需要生物安全柜可在开 放的实验台上进行工作
27
二级水平
具有生物危害2级的临床、 诊断、研究和教学部门 如果具有气溶胶或溅出的 潜在风险，需要一级或二 级生物安全柜 必须制定处理溢出的应急 方案 使用权应加以控制
开始任何操作之前
离开实验室之前
当手有明显的污物时
在安全柜内完成任何实验之前和之后
每次脱掉手套时
在触及脸和嘴之前
下班时
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安全使用离心机
使用前
裂纹？ 过满？ 平衡？ 盖子或塞子安置正确？ 转速能达到？
使用可封闭的转子 使用后
离心完全停止？ 溢出或渗漏？ 使气溶胶沉降（30分钟）or 在生物安全柜内打开
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在生物安全柜内安全操作
保养:
2次/天 --擦拭工作台面 1次/周 –擦拭紫外灯 1次/月 –擦拭所有的垂直面 1次/年 – 紫外灯强度验证
-- 用甲醛气体去除沾染 (ORM) -- 认证 (ORM)
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行政管理控制
根据程序、信息和方法将暴露危险降至最低
危险评估 医学监测 培训/教育 资源 检查 符号 & 标志
阻断暴露的途径 提供保护的级别 容易使用
只有当正确的选择、适合、小心使用和个体培训 才能产生效果 确保离开实验室前脱下个体防护设备
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个体防护设备
鞋袜 应该穿包裹脚趾的鞋，在一些较高级防护的实验 室和动物设施部门穿靴子。
实验室外衣 长袖达膝的外衣 有弹性的袖口 后背系带的长大衣 定期清洗
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个体防护设备
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组织培养
一般可能含有致病微生物的潜在风险
人和灵长类的含有支原体的细胞系
Level 2
其他
Level 1
当使用新的细胞系时要进行详细的评估
19
动物工作
动物可储存感染性的微生物（自然的或引进的） 等级基于所从事工作的类型 对所有从事动物工作的人员都需要进行专门的动 物照料培训 所有的工作包括动物的使用必须得到动物委员会 的许可
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冷冻干燥器
在准备冰冻切片时戴手套，当 使用冷冻干燥器时戴厚手套。 经常性的去污 (70%乙醇or 专 门的消毒剂) 防备和上锁!
52
个体防护设备
个体防护设备是非常重要的防护屏障，也是最后一道防护线 监督者和使用者的职责就是确保使用个体防护设备
护目镜 手套
实验室外衣
鞋
53
个体防护设备
考虑的标准
危险 分组
个体危险
公众危险
遏制
例子
1
Low
Low
Unlikely to cause disease in healthy workers or animals