五分类血细胞计数仪
⏹CBC分析原理和技术
⏹库尔特原理
⏹HGB测量原理
⏹白细胞分类原理
⏹三分类原理:库尔特直方图分类
⏹五分类原理:VCS三维分析原理
1. CBC分析原理和技术
库尔特原理
当一个不良导体颗粒,例如血细胞,通过两个电极之间时,导致电路的电阻抗发生变化。
库尔特原理图
负压
HGB测量原理
I C S H H G B检测参考方法
氰化高铁血红蛋白(H i C N-H b)测定方法试剂反应时间长达5分钟以
氰化H G B检验方法(细胞仪)
氰化血红蛋白(C N-H b)测定方法试剂成分:氰化钾两者不可混为一谈!
2.白细胞分类原理
三分类原理:库尔特直方图分类
向一个计数池的稀释血样加入溶血剂
细胞化学-体积法
溶血剂令不同亚群的白细胞不同程度地失水皱缩,显示体积差异;
电阻法技术得到白细胞分布直方图
根据直方图上的体积范围定义白细胞三项分类
L Y:35-90f L,M O:90-160f L,G R:160-450f L
五分类原理:VCS三维分析
分析外周血液中的淋巴细胞
单核细胞
嗜中性粒细胞
嗜酸性粒细胞
嗜碱性粒细胞
运用V C S技术,对白细胞进行多参量分析大小、核形、颗粒特性
V CS三维分析原理
运用V、C、S三种探针,在流式通道的某一位点,对通过的单列白细胞,进行逐个的、同时的、三重的检测,以及三维分析,以确定其亚群性质。
V-低频波,分析细胞体积;
C-高频波,分析细胞核型;
S-激光,分析细胞的颗粒特性。
接近原态的W B C分析
S c a t t e r P a k双试剂系统的作用
去红细胞:红细胞溶解剂(低渗透压,低P H液)通过渗透压差溶解红细胞;
保持白细胞原态:溶解终止液(高渗透压,高P H液)令白细胞恢复到“接近原态”大小。
流体动力聚焦
流体动力聚焦的流式通道
单细胞流在鞘液的包裹下呈最适排列通过流式通道;将重叠限制到最低限度。
V C S检测
八千多个白细胞逐个、直接、同时地接受V C S三重检测,得到各自的三维座标值
普通的流式通道
流式通道内仅运用单个能量探针来分析细胞
细胞体积的大小测量方法
V是以参考的直流电阻方法检测整个细胞的体积。
普通流式方法根据激光的前向散射估计细胞的相对大小。
细胞的内部结构测量方法
R F运用类似于超声波的高频波测量细胞的内部结构。
普通流式方法根据激光的低角度散射估计细胞的复杂性
颗粒特性测量方法
S是运用一个宽角度的散射范围(10-70 )来测量细胞的颗粒特性。
普通流式方法运用单角度/側向激光散射测量细胞的颗粒特性。
细胞的三维定位
三维分析技术
将检测过的8,192个细胞分布到一个以V、C、S为三维坐标的空间内,显示出细胞群特征。
高智能的计算机软件分析分析细胞群的位置、相对密度、轮廓、和大小。
三维坐标的数据分析位点多过16X106个。
三维空间的多侧面表示-彩色
D F1D F2D F3
D F图的说明
8000白细胞计数
划线界定细胞区
根据标本情况浮
动界定线
点的颜色代表细
胞浓度
十种异常细胞的报警提示
3.网织红细胞分析原理
新亚甲蓝-V C S检测法
N M B-V C S检测法
以经典的超活染料新亚甲蓝(N M B)着色网织红细胞。
去除红细胞内血红蛋白,
在流式通道,运用V C S三维技术,将网织红细胞与成熟红细胞、白细胞、血小板、和有核红细胞区分开来
网织红细胞染色
新亚甲蓝令幼稚红细胞内的残留R N A沉淀。
左图中标记A、B、C的细胞分别代表不同成熟度的网织红细胞的。
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网织红细胞的V C S三维分析
运用V C S三维技术分析染色后的红细胞。