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玉米茎秆徒手切片制作方法

玉米茎秆徒手切片制作
材料:玉米植株开花期地上第三茎节
仪器:光学显微镜
方法:
(1)固定材料:取材料材料固定于由无水乙醇与冰醋酸组成的固定液(无水乙醇:冰醋酸=3:1)中固定10h,后转移于70%乙醇保存。

(2)材料洗涤:将材料依次在梯度乙醇溶液(70%、50%、30%、10%)中洗涤各1h,后在清水中洗涤材料2-3h。

(3)切片:用双面刀片徒手切茎秆横截面,制茎秆新鲜切片约20μm厚,放于清水中,在显微镜下观察,选择细胞结构完整、厚度均匀的切片进行试验。

(4)染色:用1%番红液染色30min,后将材料置于清水中洗涤,然后将材料置于固绿中染色30s,后将材料在清水中洗涤。

注意:蕃红染料最好用配制半年以上的溶液
(5)观察和分析:将切片置于载玻片中央赶上盖玻片,在光学显微镜下观察茎秆解剖结构,比较茎秆表皮厚壁细胞厚度及维管束差异。

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